苯与DNA损伤及细胞凋亡

苯是一种最简单的芳香簇化学物。随着生产的不断发展 ,有关生产环境特别是小型乡镇企业及三资企业中的生产环境当中 ,苯的危害问题引起了社会各界的广泛关注。早在1987年 ,我国就将苯致白血病列为 8种职业性肿瘤之一 ,但到目前为止 ,苯危害问题仍然十分严峻 ,据报道 ,某市使用氯丁胶粘合剂的鞋类生产厂家 ,生产现场苯浓度超标率竟高达 73 % !最近 ,国家劳动卫生法的颁布与实施 ,苯危害问题可望得到遏制。近 10多年以来 ,有关苯毒性的研究工作取得了一定的成果 ,但在苯毒性及发病机制等方面仍然存在大量的问题有待于进一步的研究。本文从 DN…     

接受DOTS化疗方案的涂阳TB病人近期预后影响因素的流行病学研究

当今 ,由于人口的极大流动、人类免疫缺陷病毒(HIV )的感染 ,以及耐药结核分枝杆菌 (DR- MTB) ,特别是多重耐药结核分枝杆菌 (MDR- MTB)的出现 ,结核病已成为危及全球的重大公共卫生问题之一 〔1 ,2 ,3〕。为控制结核病疫情的发展 ,抗结核的化学药物治疗起着决定性的作用。目前 ,DOTS化疗方案被认为是比较有效的治疗结核病的方法 ,据研究报道 ,该方案在试验条件下的理论治愈率可达95 %以上 ,但在实际的结防工作中 ,该方案的实际治愈率却有较大的出入 ,而且各地的报道差距较大 ,一般在 76.4%到99.2 %之间不等 〔4,5 ,7〕。本课题以接…     

miR-148a-DNMT1对汽油添加剂甲基叔丁基醚所致16HBE细胞DNA损伤的影响

目的 探讨miR-148a-DNMT1 对汽油添加剂甲基叔丁基醚（MTBE）所致人支气管上皮细胞（16HBE）DNA损伤的影响。方法 运用Lipofectamine 2000脂质体将miR-148a mimics转染至16HBE细胞;qRT-PCR分析miR-148a及DNMT1 mRNA的表达;Western Blot分析DNMT1蛋白的表达改变;以终浓度为8 µmol/L的MTBE对正常16HBE,16HBE-mimics及16HBE-NC空载体组细胞分别染毒培养48 h;运用单细胞凝胶电泳（SCGE）实验分析各组细胞的DNA损伤程度。结果 转染miR-148a mimics的16HBE细胞中miR-148a表达增强（P < 0.05）,DNMT1 mRNA及蛋白表达降低（均P < 0.05）,MTBE对各组细胞DNA有损伤,损伤程度无明显差异（P > 0.05）。结论 尚未发现miR-148a-DNMT1的表达变化对汽油添加剂MTBE所致DNA损伤的明显影响。     

中国南方汉族和苗族人群hPARP1基因遗传多态性

目的检测人类聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly（ADP-ribose）polymerase 1，PARP1]基因的基因型和基因频率在中国南方汉族和苗族人群中的分布。方法收集187名中国南方汉族和210名苗族人的血液DNA，用PCR法扩增hPARP1基因4个外显子，并进行单链构象多态性分析。结果用PCR成功扩增出第12、13、16、17外显子，片段长度分别为253bp、313bp、175bp、362bp，在187名中国南方汉族和210名苗族人群中，分别有3人和9人检测出hPARP1基因第12、13、16和17外显子上各有1种基因突变，分别为Phe548Ser、Ala683Ser、Asp798Tyr、His808Arg。结论中国南方汉族和苗族人群中hPARP1基因第12、13、16和17外显子上存在突变型等位基因。     

空调冷却水军团菌污染调查

目的 调查某市城区空调系统军团菌(Lp)污染的现状,为军团菌肺炎的预防和控制工作提供参考.方法 采取随机抽样研究方法,抽取某市城区空调冷却塔水样32份,作军团菌污染情况检测.结果 在32份冷却塔水样中,有13份水样检出了军团菌(Lp1型和Lp2-14型),其阳性检出率为41%.结论 该市空调冷却塔水军团菌污染较普遍,应当引起高度重视,加强空调系统的定期和不定期的清洗、消毒工作非常必要.     

大气环境TSP污染物有机组份的遗传毒性分析

目的 了解某市大气环境总悬浮颗粒(TSP)污染物有机组份(EOM)的遗传毒性.为出生缺陷的预防和控制及环境保护工作提供基础资料.方法 利用大流量自动采样器对某市城西工业区、旧城区及城南高新技术开发区的大气环境呼吸带(1.2-2.0m)TSP污染物分别进行采样;TSP颗粒物中的有机成份(EOM)运用二氯甲烷法(DCM法)抽提,最后以DMSO定客;利用人体支气管上皮细胞(16HBE)接受3种不同浓度EoM(5μl/ml、10μl/ml、20μl/ml)的毒性攻击实验;以DNA的损伤程度作为EOM遗传毒性的指标.以常规单细胞凝胶电泳技术(SCGE)进行检测.结果 旧城区及城南高新技术开发区样本EOM未见明显DNA损伤效应,而城西工业区3种不同浓度的EOM可见16HBE细胞DNA损伤效应.结论 EOM是城西工业区大气环境污染物的重要毒性成份.     

抑制聚ADP核糖聚合酶1活性的短发夹RNA载体构建

目的构建抑制人聚ADP核糖聚合酶1(hPARP1)活性的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达载体。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的、靶向hPARP1基因的寡核苷酸,各69对碱基,退火,然后利用BamHⅡ及EcoRⅠ与pSIRENRetroQ载体连接。用EcoRⅠ及BglⅡ切取其中U6启动子及下游的shRNA部分,与pEGFPC1载体重组构建pEGFPC1shRNA载体。结果重组构建的pEGFPC1P1、pEGFPC1P2、pEGFPC1N载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析,结果表明330个碱基成功插入到预计位点。结论载体的成功构建,为进一步研究聚ADP核糖聚合酶在DNA修复过程中的功能打下基础。     

X线修复交叉互补基因1缺陷细胞株的建立及其蛋白的表达

目的 运用载体介导的RNA干扰技术靶向抑制人X线修复交叉互补基因1(XRCC1)在支气管上皮细胞中的表达,为研究人XRCC1蛋白在环境化学污染物所致DNA损伤修复中的功能和机制作准备.方法 利用分子克隆技术构建含pU6启动子的XRCC1 RNA干扰特异性绿色荧光蛋白C1载体重组子"pEGFP-C1-U6-dsRNA";以脂质体法将载体重组子转染人支气管上皮细胞,同时以空白细胞和空载体转染细胞作对照;在经G418筛选后,以荧光显微成像技术观察细胞的转染效果,以蛋白印迹法分析转染后细胞中的XRCC1蛋白表达情况.结果 在转染重组子的细胞中,XRCC1蛋白的表达明显下调,仅相当于正常细胞的38.2%.结论 人支气管上皮细胞人X线修复交叉互补基因1的靶向抑制成功.     

PARP-1抑制剂PJ34对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响

[目的]探讨PARP-1抑制剂PJ34干预治疗对大鼠局灶脑缺血/再灌注损伤的影响. [方法]用线栓法建立局灶脑缺血/再灌注模型(Ⅰ组),分别经左侧侧脑室注射PJ34(Ⅱ组)、生理盐水(Ⅲ组)和假手术组(Ⅵ组);通过Klenow标记及TUNEL染色技术检测鼠脑中单、双链DNA断裂,分别用原位杂交及免疫组化技术检测鼠脑中PARP-1蛋白的表达,同时测定脑组织及血浆中TNF-α、IL-6及IL-8含量变化和细胞凋亡情况. [结果]与Ⅰ组比较,Ⅲ组鼠脑缺血侧DNA单、双链断裂,PARP-1的表达均无明显差异,Ⅱ组缺血侧脑中Klenow及TUNEL阳性细胞数均明显减少,PARP-1的表达明显减少,TNF-α、IL-6及IL-8含量和凋亡减少.[结论]PARP-1抑制剂PJ34对脑缺血/再灌注损伤具有保护作用.     

二氧化硅对人支气管上皮细胞TGF—β1基因产物表达的影响分析

目的分析人支气管上皮细胞（16HBE）在二氧化硅（SiO2）粉尘染毒后TGF-β1基因产物的表达情况,为探索矽肺新的治疗途径提供基础资料。方法以16HBE作为靶细胞,以灭菌SiO2粉尘配置30μg／ml及60μg／ml两种不同浓度的悬浮液（以含10％FBS的DMEM培养基定溶）,以不同浓度的SiO2粉尘悬液分别培养16HBE靶细胞8h、16h、24h、32h,各做三个平行实验孔,同时,做10％FBS的DMEM空白对照;以免疫细胞化学方法检测TGF—β1基因产物的表达。结果在经30ug／ml及60ug／mlSiO2粉尘悬浮液培养8h、16h、24h、32h后,各实验孔16HBE细胞扫描灰度值均较对照组细胞低,结果提示,16HBE细胞经SiO2粉尘染毒后TGF—β1基因产物表达增加。结论体外实验条件下,SiO2粉尘可上调16HBE细胞TGF-β1基因产物的表达。