UPLC-MS/MS分析不同品种蓝莓中的花青苷

目的:采用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)分析12个品种蓝莓中的花青苷。方法:80%乙醇作为溶剂超声辅助提取蓝莓花青苷,提取液经离心后的上清液于旋转蒸发仪浓缩用6%甲酸水溶液定容至刻度线,超滤后,采用UPLC-MS/MS,ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),乙腈-6%甲酸水溶液作为流动相,进行梯度洗脱,在电喷雾离子源(ESI)正离子模式下,用MRM模式监测。结果:12个品种蓝莓中花青苷种类较为相似,花青苷种类最丰富的蓝莓品种是R26,含有23种,花青苷种类最少的蓝莓品种是N15,含有20种,飞燕草素和锦葵素是蓝莓中最主要的两大类花青苷。12个品种蓝莓中总花青苷含量在820.43~2 114.627μg·g-1,存在显著差异(P0.05),由大到小依次为R26N12S28R6S30S7-1S12S7-2S7-3N15N1N14。R系列总花青苷含量高于S系列,N系列花青苷含量最少。不同品种蓝莓中各类花青苷含量亦存在显著差异。结论:12个品种蓝莓中的总花青苷含量存在显著差异,可为以蓝莓花青苷为功能成分的保健品、药物开发提供基础数据,同时也为蓝莓花青苷活性实验、蓝莓花青苷的检测分析提供参考依据。     

蓝莓对四氯化碳所致急性肝损伤大鼠肝组织GCLCmRNA及蛋白表达的影响

目的：探讨蓝莓对四氯化碳（CCl4）所致急性肝损伤大鼠肝组织γ‐谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ‐GCS）催化亚基（GCLC）mRNA及蛋白表达的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠分为5组,即空白组、模型组、蓝莓汁低剂量预防组（蓝低组,10．0g／kg）、蓝莓汁高剂量预防组（蓝高组,20．0g／kg）、联苯双酯预防组（联苯双酯组,0．15g／kg）,每组10只,连续灌胃7d,1次／天,其后用CCl4复制大鼠急性肝损伤模型。光镜下观察大鼠肝脏病理学变化,全自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）及天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性,酶联免疫吸附法检测肝匀浆中丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）活力及含量,分别采用反转录PCR（RT‐PCR）、免疫组织化学法、Westernblot检测大鼠肝组织中GCLCmRNA及蛋白表达。结果蓝低组、蓝高组和联苯双酯组大鼠肝细胞变性及坏死程度显著轻于模型组（P＜0．05）,血清ALT、AST及肝匀浆MDA均显著低于模型组（P＜0．01）,而肝匀浆CAT、SOD、GSH均显著高于模型组（P＜0．01）,肝组织GCLCmR‐NA及蛋白表达均显著高于模型组（P＜0．01）。3组相比,蓝高组与联苯双酯组效果相似,略优于蓝低组。结论蓝莓对CCl4诱导的大鼠急性肝损伤有一定预防作用,可能与上调大鼠肝脏GCLC表达,减轻氧化应激性肝损伤有关。     

蓝莓花色苷单体改善老龄小鼠学习记忆的研究

目的探讨蓝莓花色苷单体(矢车菊-3-O-半乳糖苷)对老龄小鼠学习记忆功能的改善作用。方法15月龄昆明小鼠24只,按体重随机分为对照(control,Cont)、蓝莓提取物(blueberry extracts,BBE)和蓝莓花色苷单体(blueberry monomer,BBM)3组。对照组小鼠灌胃蒸馏水;蓝莓提取物及其单体的灌胃剂量分别为200和50mg/kgbw·d,干预期6w。干预结束后,用Morris水迷宫实验和避暗实验检测小鼠的学习记忆能力;同时检测脑组织脂褐质含量以及血清、脑组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果与对照组比较,BBE组和BBM组小鼠的避暗潜伏期明显延长(P<0.05);Morris水迷宫中的逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),在平台象限的持续时间明显延长(P<0.05),穿越次数增加(P<0.05);同时脑组织中脂褐质含量明显降低(P<0.01);血清、脑组织中MDA含量显著下降(P<0.05,P<0.01),而SOD活性明显升高(P<0.01)。上述变化在BBE组和BBM组之间无显著性差异(P>0.05)。结论蓝莓矢车菊-3-O-半乳糖苷单体能够显著改善老龄小鼠学习记忆功能,其作用机制与减少脑组织中脂褐质的积累、提高抗氧化防御系统功能有关。     

蓝莓对大鼠肝纤维化TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的观察蓝莓对大鼠肝纤维化的预防作用及对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子（transforminggrowthfactor,TGF）-β1／Smads信号通路的影响。方法45只健康sD大鼠被随机分为正常对照组、模型组、蓝莓预防组、丹芍化纤胶囊预防组、蓝莓＋丹芍化纤胶囊预防组。每组9只。用四氯化碳（cch）制作大鼠肝纤维化模型,共8周。测定肝脏指数及血清ALT、AST并进行肝组织病理学检查,采用实时荧光定量RT—PCR检测TGF-β1、Smad4mRNA的表达,免疫组织化学法检测肝脏组织TGF-β1、Smad4及Smad7蛋白的表达。结果与正常对照组比较,模型组TGF-β1及Smad4的表达增高（P〈0．05）,而Smad7的表达降低（P〈0．05）。与模型组比较,各预防组血清ALT及AST均明显降低（P〈0．05）,TGF-β1及Smad4的表达均降低（P〈0．05）,而Smad7的表达均增高（P〈0．05）。结论蓝莓对GEL所致大鼠肝纤维化有一定的预防保护作用,其机制可能与蓝莓影响TGF-β1／Smads信号转导通路,从而下调TGF-β1及smad4的表达,同时上调Smad7的表达有关。     

Protective effect of blueberry anthocyanins in a CCl4-induced injury model in human embryonic liver cells

This study investigates the possible mechanism of the protective effects of blueberry anthocyanins on human embryonic liver L-02 cells. Results of the WST-8 method showed that different concentrations of blueberry anthocyanins protected the human embryonic liver L-02 cells against CCl₄-induced injury in a dose-dependent manner with IC₅₀ at 6.2×g/L. Cell clone formation inhibition assay demonstrated that cell clones increased with increased concentration of anthocyanins. Propidium iodide (PI) staining analysis showed that anthocyanins can decrease cell cycle in the G1 phase. DNA ploidy analysis showed a weakened percentage of hypodiploid cells in a dose-dependent manner. Moreover, Annexin V-FITC/PI staining analysis showed a dose-dependent effect of anthocyanins on late apoptotic and necrotic cells. Western blot assay showed gradually decreased caspase-3 protein expression levels with increased anthocyanin concentration. In summary, these findings provided pharmacological evidence supporting the clinical application and protective effect of blueberry anthocyanins against acute liver injury.     

蓝莓花青素在眼科疾病的研究进展

蓝莓又名越橘,它还有很多别名,如笃斯,都柿等,是营养价值极高的浆果,在我国主要种植于山东半岛和大小兴安岭等地区。它具有超强的抗氧化活性和清除自由基能力,归根结底是因为蓝莓中富含丰富的花青素。它还有许多优点,例如高效率、低毒和对人体的生物利用率为100%。蓝莓花青素可以降血压、降血脂,对由于糖尿病引起的毛细血管病有治疗作用,抗炎症、抗癌、预防老年痴呆、增强视力,消除眼睛疲劳、促进眼周微血管循环、延缓脑神经衰老,增强心肺功能等功效。本文主要以蓝莓的提取物花青素为代表来综述花青素的性质、药理作用以及在主要眼病如缓解视疲劳、屈光不正、眼表疾病、白内障、青光眼、视网膜病变等方面应用的最新研究进展。在未来发展进程中,如果能更加深入地研究出其药物作用机制,将会为眼科临床应用提供更多既有效又经济的药物,为广大患者带来福音。     

Soft fruit traceability in food matrices using real-time PCR

Food product authentication provides a means of monitoring and identifying products for consumer protection and regulatory compliance. There is a scarcity of analytical methods for confirming the identity of fruit pulp in products containing Soft Fruit. In the present work we have developed a very sensible qualitative and quantitative method to determine the presence of berry DNAs in different food matrices. To our knowledge, this is the first study that shows the applicability, to Soft Fruit traceability, of melting curve analysis and multiplexed fluorescent probes, in a Real-Time PCR platform. This methodology aims to protect the consumer from label misrepresentation.