人胰腺导管腺癌组织及癌旁组织双向电泳图谱的差异分析

目的:探讨人胰腺导管腺癌组织和癌旁组织之间差异的表达蛋白。方法:利用双向凝胶电泳（2-DE）对8例胰腺导管腺癌组织和癌旁组织的总蛋白进行分离,并用质谱仪对两组间差异蛋白质点进行肽指纹谱和串联质谱鉴定。利用蛋白质印迹分析和免疫组化法检测差异蛋白在胰腺癌和癌旁组织的表达。结果:2-DE显示,肿瘤组织中有28个蛋白质点表达上调,17个表达下调。上述蛋白质点经质谱鉴定得到30个蛋白质,包括酶类、抗氧化蛋白、信号转导蛋白、钙结合蛋白、结构蛋白及分子伴侣等。Western blot和免疫组化结果显示差异表达蛋白annexin II在胰腺癌组织中表达上调,与2-DE结果一致。结论:以2-DE为基础的蛋白质组学技术是研究肿瘤的一种重要手段。本实验所得的annexin II等差异表达蛋白可能成为潜在的诊断胰腺癌的分子标志或控制肿瘤生长的治疗靶点。     

大肠侧向发育型肿瘤细胞株双向电泳技术成功建立

目的:建立侧向发育型肿瘤细胞(LST)株双向电泳技术.方法:提取LST细胞株总蛋白质,采用不同pH范围IPG胶条进行LST细胞株总蛋白质双向电泳,并对实验步骤进行一系列的调整优化.结果:获得了较为清晰的LST细胞株双向电泳图谱,采用pH 3～10线性IPG胶条分离出1356±43个蛋白质斑点;pH 4～7 IPG胶条两种上样量(250μg和150μg)分别分离出了1285±51和989个蛋白质斑点.结论:通过相关条件的调整优化,成功建立了双向电泳技术,为研究LST特殊性生物学行为相关蛋白质奠定了坚实的基础.     

皮肤科学基础

人源性表皮黑素细胞膜蛋白双向电泳技术初步建立及优化设计；丹皮酚在体外对人黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素生成的影响；毛囊外毛根鞘无活性黑素细胞研究最新进展（综述）；利用中性蛋白酶消化法扩增毛囊干细胞的实验研究；PDL585nm激光在体外对人成纤维细胞p16INK4α表达的影响；     

抗性家蝇蛹期多肽的双向电泳分析

分析抗性家蝇蛹期多肽，以了解蛋白质变化情况。方法：对家蝇的抗性株、对照株和敏感株蛹体内的多肽进行了聚丙烯酸胺凝胶电泳分析。结果：抗性株具有一特异的多肽点，且有3个多肽点在量上明显多于对照株。结论：杀虫剂的作用可使抗性家蝇体内的蛋白在质和量上发生改变。     

蛋白质组学及其在疾病研究中的应用

生命的表现形式最终是由蛋白质决定的。因此，对蛋白质组的研究具有很现实的意义。从研究之初至今，研究技术不断提高，涉及面日益广泛，其应用价值越来越大。本着重从技术及应用的角度，追踪最新的研究进展，对蛋白质组学及其在疾病研究中的应用作一的概述。     

肿瘤细胞诱导T细胞下调表达腺苷脱氨酶

目的 蛋白质组学分析鉴定与肿瘤细胞共培养T细胞的表达差异蛋白.方法 双向电泳分离有/无肿瘤细胞共培养的T细胞蛋白,PDQuest软件分析筛选肿瘤细胞诱导表达异常的蛋白点,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF MS)对酶解消化样品进行肽质量指纹图谱(PMF)分析,结合数据库搜索鉴定蛋白质.结果 PDQuest分析有/无肿瘤细胞共培养的T细胞蛋白双向电泳图谱,70余个蛋白点表达水平差异显著,其中与肿瘤细胞共培养的T细胞有一明显表达下调的蛋白点,质谱分析结合数据库检索表明该蛋白点为腺苷脱氨酶.结论 肿瘤细胞诱导T细胞下调表达腺苷脱氨酶.     

双向电泳法分离LDH同工酶异常带

目的　采用双向电泳方法分离LDH同工酶的拖带现象。方法　经常规同工酶电泳后 ,改变方向 90° ,再进行第 2次电泳将异常带分开。结果　经过 2次电泳后 ,拖带现象消失 ,5种同工酶被清晰的分离。结论　普通电泳、免疫电泳、双向电泳的结合使用 ,能有效的分离异常同工酶 ,消除拖尾现象 ,确定异常电泳带的性质     

桂枝汤对发热大鼠下丘脑蛋白质组影响初探

目的：初步观察桂枝汤对发热大鼠下丘脑组织中蛋白质的差异表达，为进一步探讨桂枝汤的解热分子机制奠定基础。方法：应用蛋白质组技术，对酵母发热大鼠模型和桂枝汤治疗组下丘脑组织中蛋白质表达进行比较，观察其差异点。结果：发现模型和治疗大鼠下丘脑蛋白表达有明显差异，主要是蛋白表达量的增加和减少以及个别蛋白等电点的改变，其中在给予桂枝汤后有8种蛋白（Mr/pI：28.9kD/4.47，24.4kD/6.28，25.4kD/6.39，25.9kD/6.39,17.6中7.38,17.2kD/7.43，24.9kD/7.39，26.9kD/7.59）表达增强，6种蛋白Mr/pI：14.3kD/4.83，28.5kD/4.39，16.2kD/4.11，15.3kD/6.7，30.5kD/7.09，30.5kD/7.13）表达降低，1种蛋白（Mr/pI：14.8kD/5.4）等电点发生了改变，差异蛋白数量约占可分辨蛋白点的2.3％，本次实验未发现新的差异蛋白点。结论：桂枝汤的解热作用可能与改变下丘脑组织中某些蛋白质的表达及修饰有关。     

白血病细胞线粒体超微结构及其蛋白质双向电泳分析

探讨白血病细胞线粒体（mt）形态、结构和功能的异常与mt蛋白组分变化间的可能的关系。方法采用离心法分离纯化了可移植性小鼠腹水型白血病细胞（L7811）及正常615纯系小鼠胸腺细胞线粒体，对其超微结构进行了电镜观察。结果对它们各自蛋白质双向电泳图谱分析后发现在PH4．5～6．5，MW15～35KD范围内正常对照有8个蛋白质斑点在L7811l白血病细胞线粒体电泳图谱相应位置未观察到，而在PH6左右、MW10～17KD区域内白血病样品有3个蛋白质斑点，在正常对照的电泳图谱相应区域也未观察到。结论白血病细胞与正常对照细胞相比线粒体在超微结构和蛋白质组成上均有明显差异。     

胞必佳注射液抑制膀胱癌细胞BIU-87生长的蛋白质组学分析

目的探讨胞必佳对膀胱癌细胞杀伤作用的分子机制。方法胞必佳注射液作用膀胱癌细胞BIU-8796h,用固相pH梯度双向凝胶电泳分离胞必佳注射液处理和未处理的膀胱癌细胞BIU-87的总蛋白质,银染显色,PDQuest2-de软件分析差异蛋白质点。结果双向电泳图像分析胞必佳注射液药物处理组图像的平均蛋白质数为1021±88,未处理组的平均蛋白质数为1171±99;差异蛋白质有661个,其中有216个表达增强,有451蛋白质表达下降。结论胞必佳注射液对膀胱癌细胞的杀伤作用这些差异表达蛋白质有关,这些差异蛋白质有待质谱分析鉴定,为其作用的分子机理研究提供了新的思路。