热应激对血管内皮细胞增殖的影响及其机制初探

目的　探讨热应激条件下对血管内皮细胞增殖的影响 ,进一步从DNA损伤后P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变角度探讨增殖调控的机理。方法　以建立的血管内皮细胞热应激 (4 3℃ ,2小时 )为实验模型 ,应用流式细胞仪观察热应激后血管内皮细胞株ECV30 4的细胞周期变化 ,单细胞凝胶电泳方法观察热应激对血管内皮细胞DNA的损伤 ,RT PCR检测P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变情况。结果　热应激可使血管内皮细胞DNA产生显著损伤 (P <0 .0 5 ) ,继而P5 3mRNA表达增高 ,并促进P2 1mRNA的上调表达 ,最终使细胞产生G1期阻滞。结论　热应激可损伤血管内皮细胞DNA ,并通过P5 3、P2 1通路抑制细胞增殖     

内毒素、烫伤血清对培养的大鼠心脏微血管内皮细胞间连接的影响

目的：探讨内毒素、烫伤血清对培养的心脏微血管内皮细胞（ＣＭＥＣ）间连接成分ＶＥ－钙粘附分子表达的影响，研究内毒素对严重烧伤后内皮细胞的损伤机制。方法：①ＣＭＥＣ的分离培养；②烫伤血清和内毒素刺激培养的ＣＭＥＣ后ＥＬＩＳＡ测定内皮细胞间连接成分ＶＥ－钙粘附分子的表达。结果：ＣＭＥＣ经２０％的烫伤血清刺激后，６ｈ开始ＶＥ－钙粘附分子的表达即有明显减少，是正常对照组的６５％，到２４ｈ仍在低的水平（Ｐ＜０．０１）；经内毒素（２ｍｇ／Ｌ）刺激，从１ｈ开始即有显著降低，是对照组的８０％，６ｈ降低到最低点，是对照组的５６％，后仍在低的水平（Ｐ＜０．０１）。不同浓度的内毒素（０．５、１．０、１．５和２．０ｍｇ／Ｌ）对培养的ＣＭＥＣ进行刺激，作用１２ｈ后，与正常对照组相比差异显著（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１），分别为对照组的８８％、８３％、８０％和４７％，且２．０ｍｇ／Ｌ刺激组有更明显的降低；相同浓度的内毒素（均为２．０ｍｇ／Ｌ）刺激，有血清和不含血清组差异不明显（Ｐ＞０．０５）。结论：烫伤血清和内毒素可以影响内皮细胞中ＶＥ－钙粘附分子的表达，内毒素的影响有剂量的依赖关系，有无血清的存在对ＶＥ－钙粘附分子表达的影响差异不明显     

中枢神经系统感染患者的血清学分析及治疗

目的研究中枢神经系统感染患者的血清学成分及相关用药措施,以期为提高该类疾病的临床诊治提供参考。方法选取2011年1月-2012年6月入院确诊中枢神经系统感染患者78例,并选取同期入院体检的健康人员30名作为正常对照组,两组人员均签署知情同意书;观察并对比两组血清Delta-like-1(DLL1)、白介素IL-10、干扰素INF-γ的含量变化,均采用双抗体夹心ELISA法;并针对中枢神经系统感染患者临床表现对症用药,观察治疗前后患者的生活质量变化,应用SPSS13.0软件对所有数据进行统计分析。结果急性期与恢复期病毒性脑膜炎、化脓性脑膜炎患者血清IL-10、INF-γ的含量差异有统计学意义(P<0.01);结核性脑膜炎患者DLL1血清含量(24.63±6.36)ng/ml,明显高于病毒性脑膜炎的(3.42±2.61)ng/ml、化脓性脑膜炎的(2.63±2.33)ng/ml及对照组的(0.99±1.86)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.01);脑脊液检查中枢神经感染组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),治疗后患者的生活质量好于治疗前(P<0.05)。结论 DLL1、IL-10、INF-γ等指标有助于中枢神经系统疾病的诊断,尤其对于结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎以及病毒性脑膜炎;经临床对症治疗后患者的生活质量有了一定的提高。     

缺氧对ECV-304细胞CASK表达及细胞内分布的影响

目的 了解缺氧后ECV-304细胞钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase, CASK)蛋白表达及细胞内分布的变化.方法 将培养的ECV-304细胞置于缺氧(5%O2) 条件培养1、3、6、12 h,用Western blot方法检测CASK表达的变化,用免疫组化技术观察CASK在细胞内分布情况.结果 ECV-304细胞的CASK表达随缺氧时间延长而逐渐增高,3 h开始增加,6 h达高峰,12 h下降但仍高于正常.免疫组织化学染色的结果显示,随着缺氧时间的延长,细胞染色加深、并出现CASK向核膜聚集的现象.结论 缺氧可以影响CASK的蛋白表达和细胞内分布,提示CASK可能是一个新的值得关注的缺氧相关蛋白.     

电磁场促进骨髓间充质干细胞体外诱导分化时细胞增殖

目的 观察脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMF)对5-氮胞苷(5-aza)诱导大鼠骨髓问充质干细胞(mesenehymal stem cells,MSCs)向心肌样细胞分化时细胞增殖的影响.方法 50 Hz脉冲低频电磁场刺激5-aza诱导后7 d后的MSCs,根据不同的感应强度分为A、B、C组,每组根据作用时间的不同分为4个亚组;设未暴露PEMFs的细胞为对照组.用MTT法测定细胞增殖变化,用流式细胞技术检测细胞周期.结果 0.5 mT和1 mT的感应强度下20～30 min细胞比对照组有显著性增殖,5 mT作用30～60 min以及1 mT作用60 min与对照组相比较呈显著性抑制.流式检测细胞周期显示0.5 mT和1 mT在20～30 min内可以引起细胞S G2%增高,各感应强度下作用60 min以及5 mT感应强度下作用20 min以上均引起S G2%的下降.结论 50 Hz脉冲低频电磁场0.5 mT和1 mT的感应强度下,作用20～30 min可通过引起诱导后的MSCs周期中S G2%增高而促进它的增殖.     

脑损伤中的TGF β、TNF-α和β APP细胞信号作用

在急慢性脑损伤中β淀粉前体蛋白(β amyloid precursor protein, β APP)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF β1)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)是较突出的炎性细胞因子.这些脑损伤相关因子(Injury-associated factors)通过它们的变化作用(如表达水平,功能和代谢的变化,以及可能影响细胞易感性的基因和环境因素等)对中枢神经系统(CNS)产生影响.     

热应激后人脐静脉内皮细胞p53、NF-κB的变化及调控

目的观察p53、NF-κB在热应激后人脐静脉内皮细胞中的变化及相互关系,从信号转导的角度探讨热应激内皮细胞凋亡机制.方法人脐静脉内皮细胞经热应激模型(43℃,2 h)处理后,采用 Western Blotting研究p53表达变化;电泳迁移率改变分析法(EMSA)测NF-κB的活性变化;运用特异的反义寡核苷酸阻断NF-κB亚基(p65)后,Western Blotting检测p53表达变化.结果 p53表达增加,于热应激后6 h达到高峰;NF-κB活性降低,于热应激后3 h达到最低水平.反义寡核苷酸阻断NF-κB亚基(p65)后,p53表达增加.结论 NF-κB负向调控p53表达,该条调控途径与热应激后人脐静脉内皮细胞p53依赖性凋亡密切相关.     

冠心病患者周围血一氧化氮、肿瘤坏死因子变化的意义及开搏通的影响

本文通过对４８例冠心病（ＣＨＤ）患者外周血一氧化氮（ＮＯ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的测定及开搏通治疗前后的对比，结果显示：ＣＨＤ患者周围血ＮＯ明显降低（Ｐ＜０．０１），ＴＮＦ显著高于正常（Ｐ＜００１），且与病情严重程度相一致，接受开搏通治疗三周后，ＮＯ有所回升，ＴＮＦ明显下降，治疗前后比较有显著差异（Ｐ＜００１），提示ＮＯ，ＴＮＦ参与ＣＨＤ的发病过程开搏通具有治疗意义。     

CASK在血管内皮细胞缺氧应激增殖反应中的作用

目的 建立钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase, CASK)剔降血管内皮细胞株,初步探讨其对短暂缺氧的反应性.方法 采用RNAi技术和脂质体介导的细胞转染技术,建立CASK表达下调的血管内皮细胞株,并观察缺氧应激条件下培养0(常氧)、1、3、6、12 h细胞增殖指数的变化.结果 血管内皮细胞在短暂缺氧后细胞增殖指数升高(常氧:42.93%,1 h:50.46%, 3 h:52.53%),随着缺氧时间延长增殖指数则低于常氧对照组(6 h:40.71%,12 h:25.18%).而CASK剔降血管内皮细胞株,在1～12 h缺氧应激时限内,其增殖指数无明显变化.结论 CASK剔降内皮细胞株与对照EA.hy926细胞比较,对短暂缺氧应激的增殖反应性减弱.     

渗透性脱髓鞘综合征的临床和影像学研究(附四例报道)

目的 探讨渗透性脱髓鞘综合征的临床和神经影像特点.方法 对4例渗透性脱髓鞘综合征患者的临床演变过程、CSF、头颅CT和MRI、EEG动态变化特点、治疗及预后进行分析.结果 4例患者均存在低钠血症,纠正后出现精神意识改变、构音和吞咽困难、四肢瘫痪、肌张力障碍等症状,临床过程有双相性.EEG出现一过性的重度异常.头颅CT及CSF均未见异常.MRI特征性影像晚于临床表现10 d以后出现,4例患者首次MRI均为阴性,7～13 d后复查才显示病灶.MRI示4例患者均存在脑桥外髓鞘溶解症病灶,T1WI加权低信号,T2WI加权高信号,对称性地累及双侧尾状核、豆状核、丘脑、脑岛叶皮质、海马头部等部位,其中3例同时存在脑桥中央髓鞘溶解症改变,呈脑桥基底部位对称性T1低、T2高信号的蝶形病灶;Flair加权异常信号更清楚.3例有好转或痊愈,其中1例遗留明显肌张力障碍.结论 渗透性脱髓鞘综合征与慢性低钠血症有关,合并低血钾、低血氯时可能更易发生.治疗时应尽量避免过快纠正,临床病程具有双相性.MRI的特征性改变出现较迟,复查MRI是非常必要的.