免疫转印技术对人结肠Mr40KD蛋白粗提物中干扰成分的分析

目的；分析ＥＬＩＳＡ包被抗原在检测溃疡性结肠炎血清ＡＣＡ的非特异性干扰物。方法：应用免疫转印技术结合酶标抗人ＩｇＧ抗体和荧光抗人ＩｇＧ抗体对含Ｍｒ４０ＫＤ蛋白包被抗原的人结肠提取物进行纯度和免疫学性质的分析。结果；包被抗原粗提物中除含有Ｍｒ４０ＫＤ蛋白外，还含有过氧化物酶和人ＩｇＧ活性成分。结论；过氧化物酶和人ＩｇＧ活性成分是应用ＥＬＩＳＡ法检测ＵＣ血清ＡＣＡ－ＩｇＧ的非特异性干扰物，需进一步纯化     

人白细胞介素12在哺乳动物细胞中的稳定表达及其生物活性的研究

目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切入位点(IRES)完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHODHFR缺陷细胞,双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆,MTX加压扩增,PCR检测其基因整合,T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性。结果获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系,表达产物为70×103左右的糖蛋白。结论本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性,有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。     

散发性戊型肝炎病毒感染的诊断

用基因工程重组的戊型肝炎病毒基因结构区第二码框架和第二读码框架具有免疫表位的嵌合抗原，建立了间接酶联免疫法，检测散发性急性肝炎病人血清中抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。在４６例急性肝炎病人中出抗－ＨＥＶＩｇＧ抗体阳性７例，阳性率为１５．２２％，７例ＩｇＧ抗体阳性中，有５例ＩｇＭ抗体也阳性，占７１．４％。     

耐热可溶性戊型肝炎病毒基因工程抗原的表达

目的 利用硫氧还蛋白融合表达系统表达戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV)结构基因片段，获得耐热，可溶、具有生物活性的HEV基因工程抗原。方法 将HEVORF26964-7126nt基因片段插入硫氧还蛋白融合表达载体pThioHisA，转化大肠埃希菌BL21，经IPTG诱导，表达融合蛋白。裂解细菌后，离心，取上清置于80℃处理10min，再次离心，取上清用ELISA方法测定表达产物的生物活性。结果 SDS-PAGE分析表明，HEV结构基因获得高效表达，相对分子质量约为20000，耐热，水溶性好，ELISA证实具有HEV特异抗原性。结论 应用硫氧还蛋白融合表达系统成功表达了耐热，可溶，具有生物活性的HEV基因工程抗原。     

树应用于疾病动物模型的研究进展

树(tupaia,tree shrew)是最低等的灵长类哺乳动物,主要分布于亚洲东南部的热带和亚热带地区。由于具有体小、比较容易饲养、价廉及新陈代谢和大体解剖远比啮齿类动物更接近人类等优点,树已广泛用于病毒、细菌、寄生虫和神经、内分泌、泌尿、肿瘤等方面的研究。疾病动物模型为研究疾病的发病机理、治疗及防治提供了平台。本文对树作为疾病动物模型的研究作一概述。1病毒1·1甲型肝炎病毒(HAV)詹美云等[1]用甲肝病毒感染9只成年健康树。78%的树血清中测出了HAV抗体,转阳率75%。感染后7~13d由粪便中开始排毒。部分动物转氨酶升高,…     

国产甲乙型肝炎联合疫苗的安全性和免疫原性初步研究

目的评价国产甲、乙肝联合疫苗的安全性和免疫原性。方法对278名健康儿童和312名健康成人接种国产甲、乙肝联合疫苗，并与单价甲肝灭活疫苗和乙肝灭活疫苗进行对照，观察其免疫后的副反应和检测抗体阳转率。结果接种国产甲、乙肝联合疫苗成人和儿童中均未观察到严重全身反应和局部反应。首针免疫后7个月，儿童组甲肝抗体和乙肝抗体阳转率分别达到100％和96．88％，GMT达到29144mIU／ml和102mlU／ml；成人组甲肝抗体和乙肝抗体阳转率也达到100％和98．84％，GMT达到21891mIU／ml和112mlU／ml。儿童和成人接种甲乙肝联合疫苗后，甲肝和乙肝抗体阳转率和GMT均高于单价疫苗。结论国产甲、乙型肝炎联合疫苗是安全的，并可诱导较高的甲肝抗体和乙肝抗体应答。     

乙型肝炎血源疫苗免疫后16～18年的长期免疫效果定群研究

目的 评价新生儿乙肝疫苗普种预防乙型肝炎病毒(HBV)感染的长期免疫效果,探讨乙肝血源疫苗免疫持久性.方法 出生队列定群研究结合横断面调查的方法,对象为1987-1989年出生并接种乙肝血源疫苗的人群,用固相放射免疫法(SPRIA)法检测HBV感染标志,结果与前期数据比较分析.结果 (1)1987-1989队列的免疫人群在免疫7年、14年、18年后的疫苗保护效果分别为89.7%,94.8%和87.8%,差别无统计学意义;保护性抗体水平分别为57.37%,32.80%,36.67%,免后14、18年的抗体保持在一致水平;(2)乙肝血源疫苗接种16～18年后,平均HBsAg阳性率为1.99%;保护性抗体水平为36.67%,总表面抗体阳性率为62.91%.结论 新生儿普种乙肝血源疫苗可有效预防HBV感染,疫苗免疫18年后保护效果稳定,不必进行人群加强免疫.     

国产抗乙型肝炎病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M检测试剂的比较

目的为中国急性乙型病毒性肝炎（乙肝）监测,筛选合适的抗乙肝病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M（Immunoglobulin M Antibody to Hepatitis B Virus Core Antigen,Anti-HBc-IgM）检测试剂。方法选择市场销量较大的三种酶联免疫吸附试验Anti-HBc-IgM检测试剂,平行检测参比系统各3次,比较各试剂的组内相关系数（Intraclass Correlation Coefficient,ICC）、变异系数,以评价试剂的可靠性,绘制受试者工作特征曲线（Receiver Operating Characteristic,ROC）,计算ROC下面积（Area Under Curve,AUC）、部分（Partial）AUC（pAUC）、固定特异度下灵敏度[Sensitivity at a Fix Specificity,Se（FPR=e）],以评价试剂的真实性。结果三种试剂的ICC均接近于1,一致性均好,两两比较中A试剂稳定性最好,变异性最小（Bootstrap法,P〈0.05）。B试剂ROC位于最上方,AUC中位数最大,和A、C比较均有统计学意义（Bootstrap法,P〈0.05）;B和C、A试剂的pAUC中位数和Se（FPR=0.05）中位数差异无统计学意义。结论符合国家标准的三种试剂,以雅培试剂作为参照相比,综合评价结果,B试剂较好。