灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中3种成分含量的变化研究

目的 比较灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。方法 色谱柱：CAPCELL PAK C₁₈ MG（250 mm×4.60 mm,5 μm）;流动相：乙腈（A）-0.4%醋酸溶液（B）,梯度洗脱;流速：1.0 mL·min^-1;紫外检测波长：330 nm;蒸发光散射检测器条件：漂移管温度110℃,气体流速3.0 L·min^-1,撞击器关;柱温：30℃。收集不同发育期（幼蕾期、三青期、大白期、银花期、金花期、凋花期）花蕾样品,采用HPLC-UV-ELSD串联技术,以外标两点法计算绿原酸的含量,以外标两点法对数方程计算灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。结果 灰毡毛忍冬中绿原酸和川续断皂苷乙含量以三青期最高,分别为6.934%,1.800%;灰毡毛忍冬皂苷乙以幼蕾期最高,为9.351%,较三青期高0.227%。结论 通过对灰毡毛忍冬花蕾不同发育期的含量比较可见,最佳采收期为三青期,此时绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量高。     

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定藏药唐古特红景天中27种元素

目的：建立微波消解-电感耦合等离子体质谱技术(ICP-MS)同时测定藏药唐古特红景天中Li、 Be、Na、Mg、Al、K、Ca、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Rb、Sr、Ag、Cd、Cs、 Ba、Pb、Tl、U、V 27种元素的方法。方法：唐古特红景天样品经微波消解后采用ICP-MS法测定，射频功率为1.3 kW，采样深度为8.0 mm，等离子体气流速为15.0 L·min^-1，载气体积流量为1.17 L·min^-1， 碰撞气体流量为5.0 mL·min^-1，蠕动泵转数为30 r·min^-1，并通过加入Bi、Ce、In、Lu、Rh、Sc、Tb混合内标对照溶液消除基体干扰。结果：27种元素在0~200μg·L^-1的线性范围内线性良好(r ＞0.998)， 定量限为0.0022~34.78 μg·L^-1，检测限为0.0007~9.4μg·L^-1；精密度、稳定性、重复性试验的RSD (n =6)均小于6%；各元素平均加样回收率为73.4%~128.3%，RSD(n =6)为1.1%~9.8%。结论：该方法操作简单、灵敏度高，适用于唐古特红景天样品中多元素的同时测定。     

UPLC-MS/MS法同时测定药用及观赏芍药中15个成分

目的:建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定芍药中15个成分含量。方法:采用Waters UPLC HSS T3 (150 mm×2.1 mm, 1.8μm)色谱柱,以乙腈(A)-5 mmol·L^-1乙酸铵+0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～1.0 min, 10%A→15%A;1.0～6.0 min, 15%A→30%A;6.0～10.0 min, 30%A→90%A;10.0～12.0 min, 90%A→10%A),流速0.30 mL·min^-1,电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式下扫描,采用多重反应监测模式(MRM)。结果:15个成分在考察的浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.995),检测下限范围为0.039 08～25.45 mg·kg^-1,定量下限范围为0.130 3～84.83 mg·kg^-1,回收率为90.6%～96.0%,RSD为2.7%～5.4%。结论:所建立方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,重复性、回收率良好,可用于芍药...     

评定ICP-MS法测定黄芪中重金属含量的不确定度

目的:评定采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定黄芪中铅、镉、砷、铜含量的不确定度。方法:使用ICP-MS法测定黄芪中铅、镉、砷、铜的含量,分析测定方法流程,确定不确定度来源,并计算扩展不确定度。结果:铅、镉、砷、铜的扩展不确定度分别为Pb 0.13 mg/kg,Cd 0.052 mg/kg,As 0.21 mg/kg,Cu 0.17 mg/kg。结论:该方法适用于ICP-MS法测定黄芪中铅、镉、砷、铜的不确定度评定,能为重金属分析过程的不确定度评定提供了参考。     

祖师麻皮肤刺激性观察和基于生物信息学的机制预测

目的：观察祖师麻干浸膏粉及不同萃取部位的皮肤刺激性,并基于生物信息学预测其刺激性成分及作用机制。方法：将斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为完整皮肤组和破损皮肤组,观察连续给药7 d和停药后3 d皮肤状况。运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)查询祖师麻刺激性成分和作用靶点。通过GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)等数据库收集疾病靶点。运用Metascape平台进行基因本体(GO)富集以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,将核心靶点与祖师麻刺激性成分进行分子对接。结果：祖师麻干浸膏粉低、中剂量组对破损皮肤有轻微红斑、水肿反应;祖师麻干浸膏粉高剂量组、石油醚部位和二氯甲烷部位对完整皮肤和破损皮肤均有轻微红斑、水肿反应;乙酸乙酯部位和水层部位均无红斑、水肿反应。2)从祖师麻活性成分中筛选出7种刺激性成分,通路富集的主要通路为磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路、细胞增殖的肉瘤基因(Ras)信号通路、促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路、端粒结合蛋白(Rap1)信号通路和松弛素(Relaxin)信号通路等。分子对接结果...     

UPLC-Q-TOF/MS结合化学计量学对不同产地香圆主要成分的研究

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)快速分析香圆化学成分的方法。利用UPLC-Q-TOF/MS联用技术，通过一级质谱精确质量数和高分辨二级碎片离子谱图库信息，参照标准品比对及相关文献对化合物结构信息进行鉴定；采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对不同产地香圆样品进行数据分析及质量评价。结果显示：经UPLC-Q-TOF/MS分析指认出29个成分；采自5个产地的25批香圆的PCA和OPLS-DA分析结果一致，样本群处于不同的空间聚落，可以较好地区分且被明显分成了5组，其中广西样品离散性较大，说明同一产地样品的内部差异性较大；安徽、四川、云南、浙江样品分布较为集中；进一步采用VIP值法进行分析，本实验筛选出VIP值>1的8个化学成分作为不同产地香圆差异性的主要化学标记物。所建立的香圆高分辨谱图方法稳定、可靠，可为其质量控制提供参考依据。     

经典名方芍药甘草汤解痉功效的关键质量属性研究

目的 基于血清药物化学、网络药理学和体外实验验证，阐明芍药甘草汤(Shaoyao-Gancao decoction，SGD)治疗痉挛性疾病的关键质量属性。方法 采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术对SGD体内入血移行成分进行分析鉴定；利用Cytoscape构建“入血成分-解痉靶点-通路”网络图，筛选SGD解痉核心功效成分；通过离体肠平滑肌实验对核心成分进行验证，明确SGD解痉功效的关键质量属性。结果 据高分辨质谱提供的精确分子量和碎片离子信息，结合对照品比对和相关文献报道，共鉴定出17个SGD入血原型成分，分别为氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、异甘草苷、甘草苷、甘草酸、苯甲酰芍药苷、甘草查尔酮B、芒柄花苷、异甘草素、甘草素、甘草查尔酮A、甘草查尔酮C、光甘草定、甘草次酸、没食子酸。网络药理学预测SGD中光甘草定、甘草素、芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷度值较高，可能通过GRIN2A、VCP、ABCB1、CYP2C9、CYP3A4、CHRNB2、SNCA等靶点，作用于药物代谢-细胞色素P450、神经活性配体-受体相互作用、cAMP、钙信号通路等发挥解痉作用。生物活性测定结果表明，芍药苷、甘草素、芍药内酯苷、光甘草定和苯甲酰芍药苷均可降低乙酰胆碱(acetylcholine，Ach)引起的离体肠平滑肌收缩张力，是SGD解痉功效的关键质量属性，其中芍药苷和甘草素解痉效果较强，与Ach模型组比较，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 本实验构建经典名方芍药甘草汤关键质量属性筛选方法，明确SGD解痉功效的关键质量属性，为SGD的精准质量控制及其产品二次开发提供实验依据。