The oncogenic impact of RNF2 on cell proliferation,invasion and migration through EMT on mammary carcinoma

Mammary carcinoma (MC) is one of most common malignancy in women, and ring finger protein 2 (RNF2) possesses various roles in vast human tumors. In MC tissues as well as in cell lines RNF2 exhibited high expression, had significant association with tumor size, lymph node status, TNM stage, patients’ poor survival, and promoted cell proliferation, colony formation, cell migration and invasion of MC cell lines which was mediated by downregulation of E-cadherin protein. These data reveal that RNF2 protein plays a vital role in the development of MC and may be a potential therapy target of MC.     

蓝莓花青素对人胃腺癌BGC-823细胞增殖、侵袭的影响及机制研究

目的:探讨蓝莓花青素(BA)对人胃腺癌BGC-823细胞增殖、侵袭的影响及相关机制。方法:低、中、高剂量实验组与对照组人胃腺癌BGC-823细胞分别以25、50、100μg/mL BA与等量生理盐水处理,分别处理12 h、24 h、48 h。采用噻唑蓝(MTT)与流式细胞仪检测人胃腺癌BGC-823细胞增殖与凋亡;采用Transwell小室实验与免疫细胞化学法检测人胃腺癌BGC-823细胞侵袭与P53、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。结果:干预48 h时,对照组、低、中、高剂量实验组人胃腺癌BGC-823细胞P53与Caspase-3蛋白阳性细胞百分比分别为(11.12±1.01)%,(24.31±2.18)%,(47.56±2.91)%,(66.49±5.14)%与(15.04±1.23)%,(28.22±3.09)%,(69.36±5.42)%,(86.52±6.15)%。实验组胃腺癌BGC-823细胞增殖抑制率随BA浓度增大而逐渐升高;与对照组比较,低、中、高剂量实验组人胃腺癌BGC-823细胞凋亡率、P53与Caspase-3蛋白阳性细胞百分比均显著升高,侵袭率降低,呈浓度依赖性(均P0.05)。结论:BA可有效抑制胃腺癌BGC-823细胞增殖,诱导其凋亡,并降低侵袭能力,其机制可能与上调P53与Caspase-3蛋白表达有关。     

LPS对骨肉瘤细胞迁移、侵袭及TLR4/HOTAIR通路的影响

目的探讨脂多糖(LPS)对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响及其潜在的作用机制。方法将人MG-63骨肉瘤细胞随机分为2组:对照组和LPS组。LPS组细胞用10 g/ml的LPS干预24 h,对照组用生理盐水干预。ELISA检测干预后培养基中促炎因子的水平,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western Blot检测相关蛋白的表达。结果与对照组相比,LPS组培养基中促炎因子TNF-α、IL-1和IL-6的释放水平均显著增高(P<0.05),LPS组迁移细胞数和侵袭细胞数均显著增高(P<0.05),LPS组中E-cadherin的表达显著降低(P<0.05),而N-cadherin、α-SMA、波形蛋白、TLR4和HOTAIR的表达均显著增高(P<0.05)。结论LPS诱导的肿瘤微环境可促进骨肉瘤细胞的迁移和侵袭,其机制与TLR4/HOTAIR途径介导的EMT过程的发生有密切关系。     

奥沙利铂通过调控miRNA-7-5p/RAF-1促进胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的探讨奥沙利铂如何调控MAPK通路,抑制胃癌细胞的增殖。方法NCBI检索文献,利用TargetScan、StarBase和miRBase数据库,进行GO分析与KEGG通路富集,找到相关miRNAs,预测靶基因。应用Real-time PCR、MTT、Hoechst33258、流式细胞术、细胞划痕实验、Western blot等方法分析人胃癌SGC-7901细胞的增殖、细胞周期、侵袭及蛋白表达情况。结果胃癌细胞中miR-7-5p显著低表达,RAF1与miR-7-5p存在互靶关系。miR-7-5p mimics与奥沙利铂均可促进SGC-7901细胞的凋亡,提高G1期细胞百分率(P<0.05),降低侵袭、迁移速度。caspase3、caspase9蛋白表达升高,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。结论过表达miR-7-5p与奥沙利铂均可促进胃癌SGC-7901细胞的凋亡,提示奥沙利铂可能通过上调miRNA-7-5p促进SGC-7901细胞的凋亡,降低侵袭、迁移速度。     

microRNA-613调控CDK14来抑制老年胶质瘤患者瘤细胞的增殖和侵袭作用

目的 探讨microRNA-613调控细胞周期蛋白依赖性激酶14(CDK14)通路来抑制老年胶质瘤患者瘤细胞增殖和侵袭的机制。方法 购自上海北诺生物科技有限公司的人脑胶质瘤细胞株U251共24株,分为shNC组、shmicroRNA-613组、Vector组、microRNA-613组,每组各6株; Western Blotting法和qRT-PCR法检测敲减microRNA-613和过表达microRNA-613后的人脑胶质瘤细胞株U251中CDK14蛋白表达水平,CCK-8细胞增殖实验、Transwell小室实验验证敲除microRNA-613和过表达microRNA-613后U251细胞的增殖、侵袭能力。结果 人胶质瘤细胞株U251敲减microRNA-613后CDK14蛋白表达增加(P<0.05); 人胶质瘤细胞株U251过表达microRNA-613后CDK14蛋白表达减少(P<0.05); 转染第24、36、48 h microRNA-613组U251细胞增殖率P<0.05); microRNA-613组U251细胞侵袭能力>Vector组,shNC组>shmicroRNA-613组(P<0.05)。结论 microRNA-613可通过调控CDK14信号转导通路来抑制人脑胶质瘤细胞U251增殖、转移。     

基质金属蛋白酶与肺癌转移的关系

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)是一组锌离子依赖的蛋白水解酶，在ECM降解中起着重要作用。目前研究表明，MMPs活性异常不仅能促进肿瘤血管形成，还是人类多种肿瘤侵袭和转移的必要条件。本文就与肺癌侵袭和转移有关的MMPs研究作一综述。     

肝癌患者血清P-选择素测定及临床意义

目的：研究肝癌患血清P-selection(P-sel)在肝癌复发和转移中的作用。方法：采用ELISA法分别测定原发性肝癌患和对照组血清P-选择素的含量，同时测定AFP含量。结果：肝癌患P-sel含量显高于正常人，且与AFP含量呈线性正相关，术后2周浓度降低；P-sel含量以Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ期肝癌患显高于Ⅰ期患；且大肝癌患显高于小肝癌患，有癌栓组、有肝内转移组明显高于无癌栓组和无转移组。结论：P-选择素测定在原发性肝癌的诊断和检测术后复发方面有重要价值，联合检测AFP和sP-sel可提高诊断敏感性。     

Tiam 1与胃癌细胞侵袭转移及与裸鼠移植瘤形成的关系

摘要：目的 检测胃癌细胞中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子 1(Tiam 1)的表达，并分析其与胃癌细胞离体、在体侵袭转移能力的关系。方法 采用层粘连蛋白黏附法，由胃癌MKN 45细胞株(M0)中筛选获得高(MH)、低(ML)黏附亚株。应用RT PCR和定量细胞ELISA技术分别检测Tiam 1 mRNA与蛋白在M0，ML，MH细胞中的表达；应用Boyden小室法测定M0，ML，MH细胞的离体侵袭移行能力，并分析其与Tiam 1表达的关系。应用裸鼠接种法观察M0，ML，MH细胞的在体成瘤及转移能力。结果 MH细胞中Tiam 1 mRNA(RV=0.855±0.051)与蛋白的表达(RD=1.262±0.165)以及其离体侵袭转移能力(24.33±8.02，52.00±14.53)、在体裸鼠肺转移率(4/5=80%)均较M0细胞(RV=0.759±0.047，RD=0.911±0.104，11.67±3.79，26.00±9.54，2/5=40%)，ML细胞(RV=0.743±0.039，RD=0.892±0.101，9.67±3.06，23.67±8.50，1/5=20%)为强，统计学差异显著(P< 0.05)，但在M0，ML细胞间无统计学差异(P> 0.05)；Tiam 1表达水平与胃癌细胞的侵袭转移能力呈完全及高度正相关(P< 0.05)。结论 Tiam 1表达水平升高有可能促进胃癌细胞侵袭转移能力的增强。     

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1与胃癌细胞侵袭移行能力的相关性研究

目的：检测T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiam1）在胃癌细胞株中的表达并分析其与胃癌细胞侵袭、移行能力的关系。方法：采用层黏连蛋白黏附法，从胃癌MKN-45细胞株（Mo）中筛选获得高黏附亚株（Mh）和低黏附亚株（ML）。应用RT-PCR和SABC免疫组化技术分别检测Tiam 1mRNA与蛋白在Mo、ML、Mh细胞中的表达。应用Boyden小室测定Mo、ML、Mh细胞的体外侵袭、移行能力并分析其与Tiam1表达间的关系。结果：胃癌MKN-45细胞高黏附亚株（MH）的体外侵袭、移行能力均较MKN-45细胞（Mo）及其低黏附亚株（Mo为强（P〈0.05），但Mo与ML细胞间无差异（P〉0.05）。Tiam 1mRNA和蛋白在MH细胞中的表达均较其在Mo和ML细胞中的表达为强（P〈0.05），但在Mo与ML细胞中的表达无差异（P〉0.05）。Tiam1蛋白和mRNA表达水平与胃癌细胞体外侵袭、移行能力呈正相关（P〈0.05或P〈0.01）。结论：Tiam1基因表达水平升高有可能促进胃癌细胞侵袭、移行能力的增强。     

Antimetastatic Activity of Polymeric RGDT Peptides Conjugated with Poly(ethylene glycol)

Polymeric peptides containing defined repetitive or cyclic structures of RGDT sequence, (RGDT)_n (n = 1 to 11) and cyclo(RGDT)_n (n=2 to 4), at a dose of 500 μg exhibited an inhibitory effect on experimental lung metastasis upon co-injection with tumor cells and the magnitude of the effect increased in parallel with the increase of degree of repetition of the RGDT sequence. The conjugation of (RGDT)_n (n = 1, 5, 11) with poly(ethylene glycol), PEG as a polymeric carrier led to enhanced inhibition of lung metastasis in proportion to the degree of RGDT sequence repetition and in a dose-dependent manner. Multiple i.v. administrations of PEG-(RGDT)₁₁, at 2-day and 3-day intervals before the excision of primary tumors, effectively inhibited spontaneous lung metastasis by s.c. inoculation of tumors, whereas (RGDT)₁₁ exhibited inhibition of lung metastasis only when given at 2-day intervals. This indicates that the conjugation of PEG with (RGDT)_n allowed the prolongation of administration interval, implying a sustained inhibitory effect on tumor metastasis. In support of this supposition, a decrease in the arrest of radiolabeled tumor cells in the lungs was observed when PEG-(RGDT)₁₁ was co-injected i.v. with tumor cells, or injected i.v. one day before tumor inoculation. In contrast, (RGDT)₁₁ significantly inhibited the tumor cell arrest in the lungs only upon co-injection with tumor cells. We also noted that (RGDT)_n, cyclo(RGDT)_n and PEG-(RGDT)₁₁ inhibited tumor cell invasion into Matrigel in a concentration-dependent manner and in proportion to the degree of RGDT sequence repetition, indicating that the peptide-mediated antimetastatic effect is partly associated with the anti-invasive potential. Thus, the conjugation of anti-cell adhesive and antimetastatic RGDT peptide with PEG might provide a therapeutically promising basis for the prevention of cancer metastasis (“anti adhesion therapy”).