单波长荧光分光光度计测定细胞内Ca^2＋浓度的方法探索

在使用单波长荧光分光光度计测定细胞内游离钙浓度时，通过快速（４～６ｓ）手动转换激发波长（ＥＸ），分别测定ＥＸ３４０和３８０ｎｍ时的荧光强度变化，并计算出３４０ｎｍ与３８０ｎｍ时的荧光强度比率（Ｒ），然后也采用双波长荧光分光光度计测定细胞内Ｃａ２＋浓度的计算公式计算细胞内游离钙浓度。结果显示单波长荧光分光光度计按比例法测得的细胞内游离Ｃａ２＋浓度与使用双波长荧光分光光度计测得的结果相似。     

超大剂量庆大霉素致急性肾功能衰竭并迟发性良性颅内压增高

<正> 患者张某,女,40岁,主因发冷发热3天,加重伴尿少1天于94年3月7日急诊入院。入院前3天受凉后出现发冷发热,全身不适,在当地应用抗病毒,解热药物治疗未奏效。入院前1天静脉滴注10％葡萄糖500ml加庆大霉素0.64g后出现少尿,12小时尿量<100ml,并伴头晕,恶心呕吐。既往体健,无肾脏及神经病史。体检:T39℃、P120次/分、R36次/分、Bp16/10KPa、神志清楚、颜面部及双眼睑轻度浮肿,咽部轻度充血、颈软、胸称、两肺呼吸音清晰,心率120次/分,律齐,各瓣膜听诊区未闻及杂音,腹部平坦、肝     

地西泮在两组基因型之间的代谢差异

为研究地西泮在两组基因型（ｗｔ／ｍｌ和ｍｌ／ｍｌ）的国人体内代谢的差异,采用ＰＣＲ法筛选１２位符合基因型要求的受试 ,６位为ＣＹＰ２Ｃ１９突变型纯合子（ｍｌ／ｍｌ）,６位为ＣＹＰ２Ｃ１９的杂合子（ｗｔ／ｍｌ）。每位受试者口服５ｍｇ地西泮片,然后用气相色谱法测定其血浆中地西泮的浓度,计算其药代动力学参数,结果显示两组受试者之间地西泮代谢有显著性差异。结论：遗传因素是决定地西泮代谢的重要因素。     

大承气汤稳定溶酶体膜的实验研究

用内毒素所致家兔全身性ｓｈｗａｒｔｚｍａｎ反应作为ＤＩＣ模型，以酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和β葡萄糖醛酸苷酶（βＧ）为指标，观察了大承气汤对溶酶体膜的影响。结果显示：ＤＩＣ模型组兔肝ＡＣＰ和血清βＧ活性明显升高，而大承气汤治疗组则与正常对照组相似。说明大承气汤能够稳定溶酶体膜，减少溶酶外逸，保护细胞器，减轻内毒素对机体的损害     

普外科围手术期抗菌药物应用分析

目的：探讨我院普外科围手术期抗菌药物的应用现状及合理性。方法：对132例普外科手术患者围手术期抗菌药物的应用进行回顾性分析。结果：132例患者全部使用了抗菌药物,抗菌药物涉及5类20种,其中预防用药126例,占95.5%,治疗用药6例,占4.5%。所有分析病例中单一用药、二联用药和三联用药分别占56.1%、42.4%、1.5%。联合用药基本合理,但存在预防给药时间不当,术后预防用药时间较长及频繁换药等问题。结论：应加强围手术期抗感染药物使用的管理和监督,促进临床医生合理用药。     

山麦冬总电甙对实验性心肌缺血的影响

用两个模型研究山麦冬总皂甙（ＴＳＬＳＬ）对实验性心肌缺血的影响，结果显示，ＴＳＬＳＬ（４０ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）可明显降低Ｉｓｏ所致大鼠心肌缺血模型血清ＣＰＫ水平和心电图ΣＳＴ段变化．在结扎冠脉所致心肌梗塞实验中，ＴＳＬＳＬ（６０ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）可显著抑制心肌组织ＣＰＫ的释放，同时ＴＳＬＳＬ能保护心肌ＳＯＤ活性，降低心肌ＭＤＡ水平，此外还降低心肌ＦＦＡ的生成，缩小心肌梗塞面积．实验结果表明，ＴＳＬＳＬ对实验性心肌缺血有保护作用，其作用机制可能与防止心肌细胞脂质过氧化及改善脂肪酸代谢有关。     

ERK1/2信号通路在青蒿琥酯抑制PDGF-BB诱导HSC细胞增殖中的作用

目的:观察青蒿琥酯(Artesunate,Art)对血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growthfactor-BB,PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(he-patic stellate cell,HSC)增殖,磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(phosphorylated extracellularsignal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)表达的影响,探讨Art抗肝纤维化的分子机制。方法:实验分为对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+Art组和PDGF-BB+PD98059组。以PDGF-BB诱导HSC增殖,再分别加入不同浓度的Art和ERK1/2抑制剂PD98059。CCK-8法检测各组HSC细胞的增殖情况,ELISA法测定细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量,免疫印迹(Western blot-ting)法检测各组细胞ERK1/2的表达及活化情况。结果:PDGF-BB可诱导HSC细胞增殖,p-ERK1/2表达增高,而PDGF-BB+Art组、PDGF-BB+PD98059组HSCⅠ型胶原的含量及p-ERK1/2活性均降低。结论:ERK1/2参与了PDGF-BB诱导HSC细胞增殖的作用,Art抗PDGF-BB所诱导的HSC细胞增殖作用与其抑制ERK1/2的活化有关。     

葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠抗氧化作用的研究

目的：考察葛根黄酮对衰老模型小鼠抗氧化能力的影响。方法：用D-半乳糖制备衰老模型小鼠,分为正常对照组、模型组、阳性对照组、高、低剂量组,检测各组小鼠血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）水平变化。结果：葛根黄酮能显著降低衰老小鼠血清MDA水平,同时可提高SOD和GSH-PX活力水平。结论：葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠具有抗氧化作用。     

慢病毒载体介导hTERT对肝细胞生物学特性的影响

目的：研究慢病毒介导人端粒酶逆转录酶（h-TERT）基因对人张氏肝细胞（chang liver）生物学特性的影响。方法：将表达h-TERT基因的重组慢病毒感染人张氏肝细胞,通过杀稻瘟筛选获得阳性克隆。分别采用实时荧光RT-PCR、TRAP-PCR及ELISA方法检测转染前后chang liver细胞的h-TERT-mRNA水平和端粒酶活性的变化。通过MTT法、流式细胞术（FCM）观察其形态变化及生长增殖情况。结果：转染后的chang liver细胞存在h-TERT基因过表达和端粒酶活性上调,体外培养条件下维持肝细胞原有形态,存活期显著延长,增殖能力较强。结论：外源性h-TERT基因的异位表达不仅上调chang liver细胞的端粒酶活性,而且促进其增殖。     

小檗碱对HeLa细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响

目的 研究小檗碱对人宫颈癌HeLa细胞株增殖及凋亡的影响及其发生机制.方法 采用MTT法观察小檗碱对HeLa细胞增殖的影响,DNA ladder、流式细胞仪等方法进行细胞凋亡检测,用Western blotting方法检测凋亡过程中相关蛋白Bel-2和Bax表达的变化.结果 小檗碱在体外试验中能明显抑制HeLa细胞的增殖,在一定的时间、剂量范围内呈时间-剂量依赖关系.20、40 mg/L小檗碱作用48 h后,细胞DNA片段分析可看到凋亡时降解形成的梯带,流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰,各组的凋亡率分别是(16.7±2.8)%、(29.6±4.4)%,与对照组(1.9±0.6)%和5 mg/L小檗碱组(2.3±0.8)%相比差异显著(P＜0.01).在凋亡过程中,Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下凋.结论 小檗碱体外能抑制HeLa细胞增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下调有关.