FKBP8负调控RNA病毒早期诱导的Ⅰ型IFN信号通路

目的进一步探究VISA介导的抗病毒信号通路。方法利用免疫共沉淀、免疫印迹、双荧光素报告、qPCR等实验技术检测FKBP8在RLRs信号通路中的作用。结果我们的实验证实FKBP8与VISA、TRAF3都存在互作,且FKBP8显著地抑制RNA病毒早期诱导的干扰素启动子IFN-β和核调节因子-κB (nuclear factor kappa-B, NF-κB)的活性,并增强病毒的复制。进一步的研究表明FKBP8通过作用于VISA和TBK1而负调控RLR-VISA信号转导;此外,FKBP8通过干扰VISA-TRAF3的结合而负调节病毒诱导的信号通路。结论 FKBP8是RLR抗病毒先天免疫信号通路中的负调控因子。     

中药小分子物质非线性分离原理与实验研究

概述了非线性色谱理论(NLCT)在中药小分子有机化合物分离纯化中的应用。以本实验室进行的杜仲叶黄酮类活性物质非线性分离实验研究为例,简要介绍了建立中药小分子物质非线性分离纯化系统的理论与方法。NLCT应用于中药小分子物质的规模化生产,可超量上样,最大限度利用色谱柱效应,获得理想的目的物纯品。这一理论与技术的应用,可突破线性放大的传统理念,加快实验室研究成果产业化进程,有利于中药制药现代化的实现。     

氧浓度对关节软骨细胞体外培养的影响

关节软骨在体内属缺氧组织,且组织内氧浓度水平呈现梯度,表现为软骨组织表层为10%,而至深层则下降到1%,因此采用空气中20%氧浓度对软骨细胞进行体外培养,显然不适宜。通过对关节软骨组织的生物学特性、生存环境以及不同氧浓度下软骨细胞体外培养的实验研究分析,认为5%氧浓度是体外培养关节软骨细胞的适宜浓度,同时在软骨细胞的不同生长时期对培养基氧浓度进行控制,可将软骨细胞处于较好的生长增殖状态。     

杜仲愈伤组织与悬浮细胞中黄酮和绿原酸积累研究

目的:比较杜仲愈伤组织和悬浮细胞生长及其次生代谢产物黄酮和绿原酸的积累.方法:将杜仲无菌苗真叶诱导的愈伤组织进行悬浮培养,研究了悬浮培养物生长的动态和总黄酮类及绿原酸产量积累的动态.结果:杜仲愈伤组织中黄酮和绿原酸最高分别达到13.46,1.712 mg·g~(-1),而悬浮细胞中黄酮和绿原酸最高分别达到16.63,3.93 mg·g~(-1).结论:与愈伤组织相比,悬浮细胞具有生长周期短、速率快、黄酮和绿原酸积累量高的优势.     

运动结合补充葛根素干预糖尿病大鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的:分析有氧运动结合补充葛根素对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血清及肝脏中的一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响。方法:实验于2005-08/2006-01在江西师范大学体育学院完成。①选取8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机数字表法分为5组:正常对照组、模型对照组、运动组、葛根素组、运动 葛根素组,12只/组。②除正常对照组外,其余各组均喂以高脂饲料,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。血糖值≥14.7mmol/L且尿糖为～者确定为造模成功。正常对照组仅以普通饲料喂养,腹腔注射等体积0.1mmol/L的枸椽酸盐缓冲液。③造模后,运动组进行跑台训练,跑台坡度为0°,每天以10～15m/s的速度运动30min,共训练8周。葛根素组每天按500mg/kg体质量给予葛根素灌胃,共8周。运动 葛根素组跑台训练的同时给予葛根素灌胃。正常对照组、模型对照组不进行任何干预。各组均以普通饲料喂养。④分别于造模后第3天、造模后第8周末对各组大鼠尾静脉取血测定空腹血糖。造模后第8周末,各组大鼠乙醚麻醉,心脏取血,离心取上层无溶血血清,硝酸还原酶法测定一氧化氮含量。取新鲜肝脏组织1g,用40mmol/L的磷酸钾缓冲液制成匀浆,离心取上清检测一氧化氮合酶活性。结果:共54只大鼠进入结果分析。①空腹血糖检测结果:造模后第3天～第8周末,各模型组空腹血糖值均明显高于正常对照组(P<0.01)。与模型对照组比较,造模后第3天葛根素组、运动组、运动 葛根素组空腹血糖值无明显变化[(18.3±4.7),(18.6±3.0),(18.9±4.6),(19.1±2.9)mmol/L,P>0.05],第8周末均不同程度下降,尤以运动 葛根素组明显[(22.3±4.2),(9.4±2.0)mmol/L,P<0.01]。②造模后各组大鼠血清中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较:与模型对照组比较,运动组、葛根素组一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性均明显降低(P<0.01或0.05),运动 葛根素组降低的幅度尤为显著[(58.58±8.97),(30.80±14.80)μmol/L;(2.0±0.23),(0.92±0.13)μkat/L;P均<0.01]。③造模后各组大鼠肝脏组织中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较:与模型对照组比较,运动组、葛根素组、运动 葛根素组一氧化氮合酶活性略有下降,但差异无显著性意义[(0.26±0.02),(0.23±0.03),(0.21±0.01),(0.19±0.03)μkat/L,P>0.05];运动组、葛根素组一氧化氮含量均明显降低[(4.21±0.83),(2.86±0.64),(3.39±0.86)μmol/L,P<0.05],运动 葛根素组降低至(1.75±0.31)μmol/L,差异尤为显著(P<0.01)。结论:有氧运动结合补充葛根素,能够有效降低糖尿病大鼠血清及脏肝中一氧化氮含量及一氧化氮合酶的活性。     

高效液相色谱法测定山香圆中熊果酸含量

目的采用高效液相色谱（HPLC）测定山香圆中熊果酸的含量。方法色谱条件：Hypersi ODS C18色谱柱（4．6mm&#215;250mm；5μm）；流动相为乙腈：甲醇（体积比为68：32），检测波长210nm，流动相流速1．0ml／min，柱温25％。结果熊果酸检测的线性范围0．50～10．05mg（R^2=0．9987），平均回收率为99．28％，相对标准偏差（RSD）为1．96％（n=5）。结论该方法准确、快捷、灵敏、重复性好，可作为山香圆药材及相关制剂质量控制的一个有效方法。     

稳定表达GHR基因和突变体的CHO细胞株的构建及其功能分析

目的构建稳定表达先天性生长激素不敏感综合征相关基因-hGHR及突变体(hGHR-E42K、hGHR-H56R)的CHO细胞株,测定野生株和突变株的STAT5-磷酸化水平。方法利用已有的PUC-hGHR质粒,定点突变获得2个hGHR突变体(hGHR-E42K、hGHR-H56R),限制性酶切法将目的基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1/(zeo+);然后用Lipofectamine2000将重组子转染至CHO细胞,通过Zeocin抗性筛选稳定表达hGHR及突变体的细胞群;并用RT-PCR和Western blot证实hGHR、STAT5-P表达水平。结果测序验证hGHR的E42K和H56R错义突变成功引入,并克隆到真核表达载体;转染后在CHO细胞株中成功检测到hGHR和突变体的mRNA和蛋白;突变细胞株(E42K、H56R)的磷酸化STAT5蛋白表达量低于野生株。结论成功构建携带稳定表达hGHR及突变体的CHO细胞株,E42K、H56R突变部分阻碍STAT5蛋白进行磷酸化。     

植物来源的生物碱类乙酰胆碱酯酶抑制剂研究进展

乙酰胆碱酯酶抑制剂是阿尔茨海默病治疗药物的研究热点。根据类胆碱学说,乙酰胆碱酯酶抑制剂可提高脑部神经递质乙酰胆碱的水平从而改善阿尔茨海默病患者的胆碱功能,并缓解神经性紊乱的症状。植物天然产物是乙酰胆碱酯酶抑制剂先导化合物的重要来源,其中生物碱为此类天然产物的重要组成部分。综述植物来源且具有抗乙酰胆碱酯酶活性生物碱的结构类型、作用机制及其构效关系。     

突托蜡梅叶中挥发油成分及其抑菌活性研究

目的:研究突托蜡梅Chimonanthus grammatus 叶中挥发油的化学组成及其抑菌活性.方法:采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对水蒸气蒸馏法提取的突托蜡梅叶中挥发油进行成分分析,并采用滤纸片琼脂平板扩散法及肉汤稀释法检测该挥发油对9种常见病原菌的抑菌活性.结果:从挥发油中检出了53种成分,所鉴定成分占挥发油色谱总峰面积的99.99％,其主要成分为(E)-3-(4,8-二甲基-3,7-壬烯基)-呋喃(13.81％)、乙酸冰片酯(12.66％)、1,2,3,6-四甲基-双环[2.2.2]辛-2-烯(7.06％)等;抑菌实验表明突托蜡梅叶中挥发油对受试菌均有不同强度的抑制作用.结论:突托蜡梅叶中挥发油对革兰阴性、阳性菌均具有较强的抑菌活性,抑菌谱较广,且该挥发油含有多种生物活性成分,具有很高的药用价值及开发前景.     

以“血瘀”立论辨证论治糖尿病肾病的研究进展

瘀血是导致糖尿病肾病的重要因素,且贯穿于病程始终,活血化瘀法的应用越显重要。文章就近10年来各医家从瘀血角度论治糖尿病肾病的研究情况作一综述。