杜仲愈伤组织与悬浮细胞中黄酮和绿原酸积累研究

目的:比较杜仲愈伤组织和悬浮细胞生长及其次生代谢产物黄酮和绿原酸的积累.方法:将杜仲无菌苗真叶诱导的愈伤组织进行悬浮培养,研究了悬浮培养物生长的动态和总黄酮类及绿原酸产量积累的动态.结果:杜仲愈伤组织中黄酮和绿原酸最高分别达到13.46,1.712 mg·g~(-1),而悬浮细胞中黄酮和绿原酸最高分别达到16.63,3.93 mg·g~(-1).结论:与愈伤组织相比,悬浮细胞具有生长周期短、速率快、黄酮和绿原酸积累量高的优势.     

高效液相色谱法测定山香圆中熊果酸含量

目的采用高效液相色谱（HPLC）测定山香圆中熊果酸的含量。方法色谱条件：Hypersi ODS C18色谱柱（4．6mm×250mm；5μm）；流动相为乙腈：甲醇（体积比为68：32），检测波长210nm，流动相流速1．0ml／min，柱温25％。结果熊果酸检测的线性范围0．50～10．05mg（R^2=0．9987），平均回收率为99．28％，相对标准偏差（RSD）为1．96％（n=5）。结论该方法准确、快捷、灵敏、重复性好，可作为山香圆药材及相关制剂质量控制的一个有效方法。     

突托蜡梅叶中挥发油成分及其抑菌活性研究

目的:研究突托蜡梅Chimonanthus grammatus 叶中挥发油的化学组成及其抑菌活性.方法:采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对水蒸气蒸馏法提取的突托蜡梅叶中挥发油进行成分分析,并采用滤纸片琼脂平板扩散法及肉汤稀释法检测该挥发油对9种常见病原菌的抑菌活性.结果:从挥发油中检出了53种成分,所鉴定成分占挥发油色谱总峰面积的99.99％,其主要成分为(E)-3-(4,8-二甲基-3,7-壬烯基)-呋喃(13.81％)、乙酸冰片酯(12.66％)、1,2,3,6-四甲基-双环[2.2.2]辛-2-烯(7.06％)等;抑菌实验表明突托蜡梅叶中挥发油对受试菌均有不同强度的抑制作用.结论:突托蜡梅叶中挥发油对革兰阴性、阳性菌均具有较强的抑菌活性,抑菌谱较广,且该挥发油含有多种生物活性成分,具有很高的药用价值及开发前景.     

蛇足石杉内生真菌分离及其抑制乙酰胆碱酯酶活性研究

目的:研究药用植物蛇足石杉内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的内生真菌.方法:采用平板分离法分离蛇足石杉内生真菌,结合形态学和ITS-rDNA序列分析鉴定内生真菌;并采用DTNB显色法,对分离获得的内生真菌进行乙酰胆碱酯酶抑制活性的筛选.结果:共分离到127株内生真菌,分属于Penicillium,Aspergillus,Podospora等19个属;根、茎、叶中内生真菌的分布存在一定的组织差异性,茎中内生真菌的分离率和定殖率最高,叶中次之,根中最少.共有来自巧个属的39株内生真菌显示出乙酰胆碱酯酶抑制活性,且11株有显著的抑制活性,其中7株来源于叶中.结论:药用植物蛇足石杉内生真菌多样性丰富,不同组织部位内生真菌的数量、种类及分布存在一定差异;同时蛇足石杉蕴含着大量抑制乙酰胆碱酷酶活性的内生真菌,为寻找和开发具有乙酰胆碱醋酶抑制活性的药用资源开辟了一条新的途径.     

高效液相色谱法测定杜仲愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸

目的建立高效液相色谱法测定杜仲愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸含量。方法利用Hypersil C18-ODS柱（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，乙腈-水-磷酸溶液（12：87．9：0．1）为流动相，检测波长为327nm，流速1．0ml／min，柱温为25％。结果绿原酸在2．216～55．4μg/ml范围内线性关系良好，r=0．9981，愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸的平均加样回收率分别为100．69％和97．62％，RSD分别为2．42％和2．71％。结论该方法快速简便，准确可靠。杜仲愈伤组织和悬浮细胞中绿原酸含量分别为1．528mg／g和3．949mg／g。     

高产绿原酸杜仲细胞悬浮培养体系优化研究

目的优化杜仲细胞悬浮培养及其产绿原酸的条件。方法研究基本培养基种类、激素质量浓度、碳源种类及质量浓度、pH值、接种量和摇床转速等因素对杜仲细胞生长和绿原酸产量的影响,建立了高产绿原酸的悬浮细胞培养体系。结果B5培养基+0.5 mg/L NAA+0.6 mg/L 6-BA、蔗糖30 g/L、初始pH 5.0~5.5、接种量20g.FW/L以及摇床转速110 r/min为杜仲细胞悬浮培养的适合条件。结论优化后的培养条件为杜仲细胞大规模悬浮培养生产天然活性成分奠定了基础。     

剪切环境对南昌链霉菌形态和代谢的影响

通过在摇瓶和发酵罐上考察不同剪切环境对南昌链霉菌的代谢过程和菌丝形态的影响 ,并对某些菌丝形态参数进行了定量分析 ,发现南昌链霉菌对剪切的敏感性。在此基础上通过改变发酵罐上搅拌桨叶类型促进了前期菌体生长 ,并使最终发酵效价提高了 5 2     

高产绿原酸杜仲细胞悬浮培养体系优化研究

目的 优化杜仲细胞悬浮培养及其产绿原酸的条件。方法 研究基本培养基种类、激素质量浓度、碳源种类及质量浓度、pH值、接种量和摇床转速等因素对杜仲细胞生长和绿原酸产量的影响,建立了高产绿原酸的悬浮细胞培养体系。结果 B5培养基+0.5 mg/L NAA+0.6 mg/L 6-BA、蔗糖30 g/L、初始pH 5.0～5.5、接种量20 g?FW/L以及摇床转速110 r/min为杜仲细胞悬浮培养的适合条件。结论 优化后的培养条件为杜仲细胞大规模悬浮培养生产天然活性成分奠定了基础。