明胶-聚乳酸载药纳米微球的制备及其体外释药研究

采用复合乳液—溶剂挥发法制得明胶—聚乳酸载五氟脲嘧啶(5—Fu)微球，以混合型乳化剂Tween—80：Span—80＝5：1—作为初乳乳化剂，O—羧甲基壳聚糖作为复乳乳化剂，考察了明胶—聚乳酸载药微球的制备条件对微球的成球性、药物包封率及体外释药的影响。结果表明乳化剂的选择、内部水相药物浓度和PLA分子量等均对载药微球的结构与性能产生影响，经优化条件得到了成球性和体外释放都比较好的载药微球。     

靶向抑制晶状体上皮细胞增殖的载药毫微球的研究

采用碳二亚胺法使抗人晶状体上皮细胞单克隆抗体与聚乳酸载 5 -氟尿嘧啶毫微球偶联 ,制备出抗人晶状体免疫毫微球。以牛血清白蛋白作乳化剂采用复乳法制备聚乳酸载 5 -氟尿嘧啶毫微球 ,使毫微球表面吸附牛血清白蛋白 ,再将抗人晶状体上皮细胞单克隆抗体与聚乳酸载 5 -氟尿嘧啶毫微球偶联。采用扫描电镜和透射电镜观察微球形貌和结构 ,用动态光散射粒径分析仪测载药毫微球粒径。ELISA法检测偶联后的抗体活性 ,MTT法检测免疫毫微球对晶状体上皮细胞的抑制作用 ,间接免疫荧光法检测该免疫毫微球与晶状体上皮细胞的特异性结合能力和细胞内化过程。结果显示载药毫微球表面光滑 ,平均粒径为 191.0± 0 .2 0 2nm ,其载药率为 8.2 % ,药物利用率为2 4 .6 %。免疫载药毫微球中的单克隆抗体HILE6保留达到原免疫活性 84 % ,2 4h对兔晶状体上皮细胞抑制率可达6 8.4 2 %。该免疫载药毫微球能与晶状体上皮细胞特异性结合 ,30min后可吸附到晶状体上皮细胞上 ,在 4h内进入细胞质最后进入细胞核。该实验为特异性抑制晶状体上皮细胞增殖 ,预防白内障术后并发症 -后囊混浊提供了重要的科学依据。     

不同透明质酸的浓度对明胶-透明质酸薄膜性能的影响

为了考察透明质酸的浓度在明胶-透明质酸共混体系中对薄膜的理化性能及生物相容性的影响,本研究将不同浓度的透明质酸溶液与明胶溶液共混,制备了不同透明质酸浓度的明胶一透明质酸薄膜.实验结果表明,透明质酸的加入明显提高了薄膜的亲水性和柔韧性,并延缓了薄膜的体外降解时间.当透明质酸的浓度在0.01%～0.1%之间时,成纤维细胞在薄膜上生长良好.当透明质酸的浓度大于0.1%时,对成纤维细胞的生长增殖有明显的抑制作用.     

介入栓塞治疗用电解脱弹簧圈的电化学研究

本文研究了用 于介入栓塞颅内 动脉瘤的不锈 钢弹簧圈在 生理盐 水中阳 极溶解 电化 学过程, 确定 了溶断弹簧圈的 电流范围。分析 了不同材料及 表面预处理 对不锈 钢孔蚀 电位的 影响, 为电解 脱离 弹簧圈的选择提 供了依据     

眼用环孢霉素A缓释超微粒的制备及眼内分布研究

目的探讨壳聚糖-胆固醇双亲性聚合物包载环孢霉素A的缓释性及超微粒制备及眼内分布.方法壳聚糖-胆固醇双亲性聚合物与环孢霉素A共溶于溶剂中,对水透析形成超微载药微粒,37℃条件下测试超微粒体外释放状态.以放射性99锝标记壳聚糖超微粒,制成滴眼剂,以SPECT测试超微粒在兔眼中的滞留时间.结果壳聚糖载药超微粒可在6小时内缓释环孢霉素A,超微粒在给药后4小时在眼表具有良好的滞留性.结论以壳聚糖双亲性聚合物包载环孢霉素A对干眼症的治疗具有潜在的应用价值.     

99mTc-EHIDA闪烁显像研究胆汁反流性胃炎胆汁排泌途径异常

目的探讨动态多时相99m Tc-EHIDA显像技术分析生理状态下胆汁反流性胃炎的胆汁排泌功能途径的变化。方法正常对照组12例,其中男性7例,女性5例;年龄38~68岁,平均年龄53.2岁。胆囊结石组12例,其中男性6例,女性6例;年龄33~67岁,平均年龄51.7岁。胆汁反流性胃炎组23例,其中男性14例,女性9例;年龄23~56岁,平均年龄42.0岁。应用动态多时相99m Tc-EHIDA闪烁显像技术,分析胆汁排泌途经。结果胆汁反流性胃炎组排胆分数(GBEF)、排胆率(GBER)与正常对照组差异无统计学意义,但高于胆囊结石组。胆汁反流性胃炎组中,与6例反流阴性和13例轻度反流患者相比,4例呈重度反流患者显像剂在肠道的放射性浓集程度明显减低,且十二指肠开始显影的时间均在35 min后。结论动态多时相99m Tc-EHIDA闪烁显像能生理(非侵入)状态下检测胆汁排泌的途径异常,其临床诊断价值肯定。     

门电路调控血池成像技术对隐匿性冠心病灌注与舒缩功能的特征研究

目的利用门电路调控血池成像技术探讨隐匿性冠心病(LCHD)患者的心脏灌注与舒缩的功能学变化特点,旨在提高早期确诊率。方法选择164例患者,分3组。LCHD组39例患者,其中男性31例,女性8例;年龄28~68岁,平均年龄50.0岁。阴性对照(NC)组46例,其中男性33例,女性13例;年龄17~72岁,平均年龄47.3岁。阳性对照组(即陈旧心肌梗死组,OMI组)79例,其中男性73例,女性6例;年龄26~83岁,平均年龄57.4岁。分别进行心肌灌注断层显像和门电路调控心室功能闪烁显像,各组参数分析比较时,将年龄作为协变量进行协方差分析,然后进行F检验。结果除最大充盈时间(TPFR)外,3组间左心室舒缩功能参数(LVEF、PFR和PER)间差异具有显著统计学意义(P0.01);两两比较,LCHD组与NC组差异无统计学意义(P0.05);但LCHD组泵功能显著高于OMI组(P0.01)。LCHD组左心室功能参数分析的结果显示,心脏充盈、收缩变化幅度未超过20%,心脏代偿掩盖其器质性变化。结论 LCHD的功能影像学特征呈现为可逆性放射性缺损或分布减低,对心脏舒缩功能的损伤程度明显低于OMI组。门电路调控的闪烁成像技术应用于LCHD早期无创诊断,可发现心脏轻度器质性变化的特点。     

磁性阳离子高分子脂质体结合野生型p53投递系统的构建

目的用合成的磁性阳离子高分子脂质体与野生型p53(WTp53)基因质粒结合,构建靶向纳米载体投递系统,为进一步行静脉内皮细胞转染奠定基础。方法应用大肠杆菌重组质粒扩增法扩增WTp53质粒DNA,合成的磁性阳离子高分子脂质体为羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐/胆固醇(OQCMC/Chol)包覆油溶性Fe3O4的载体粒子。在不同的pH值及不同的WTp53质粒DNA和载体粒子质量比的条件下,将WTp53质粒DNA与OQCMC/Chol超微磁性载体粒子进行混合,并分别进行DNA结合实验和沉淀实验。观察电泳结果,并用SPSS 13.0统计软件进行数据分析。在DNaseⅠ模仿体内酶的环境下,将其加入制备好的超微载体投递系统中,电泳后观察投递系统对DNA的保护作用。应用透析系统模拟体内环境,观察超微投递系统载体与基因分离情况,并利用紫外分光光度计测量超微载体投递系统累积缓释曲线。结果应用透射电镜观察OQCMC/Chol超微磁性载体粒子和WTp53结合后的投递粒子。在pH 7条件下,WTp53质粒DNA和载体粒子质量比为1∶0.6,p53质粒DNA与OQCMC/Chol超微磁性载体粒子经过直接静电作用几乎100%结合,并证实该投递系统对DNA具有较好的保护作用。超微载体投递系统在7～12 h左右有明显的突释波峰,到第54小时以后,超微载体释放浓度变化缓慢,并可持续释放9 d以上。结论成功构建磁性阳离子高分子脂质体结合WTp53投递系统,将为进一步行细胞转染奠定可靠的基础,并为构建血管内靶向定位基因投递新方法和新技术提供可靠理论依据。     

5-Fu纳米毫微粒的制备及体外对晶状体上皮细胞增生的抑制作用

目的制备5氟尿嘧啶(5fluorouracil,5Fu)聚乳酸纳米毫微粒并观察其表征及体外对兔晶状体上皮细胞的抑制作用。方法采用复乳法制备5Fu聚乳酸纳米毫微粒,观察毫微粒的大小、表面形态和结构,毫微粒载药率和体外药物释放曲线。取传3代晶状体上皮细胞进行对比试验,设5Fu纳米毫微粒、5Fu原药、空载纳米毫微粒组、空白对照组。设0.5～62.5mg·L-14个剂量组,作用24h、72h、120h、168h后光镜下观察细胞性状,MTT法检测抑制作用。结果(1)制备的5Fu纳米毫微粒平均粒径(191.000±0.202)nm;载药率为8.1%;首日药物突释率为38.3%,缓释时间20d;(2)5Fu纳米毫微粒和5Fu原药对兔晶状体上皮细胞均有抑制作用,并随时间和剂量的增加而增加。空载聚乳酸纳米毫微粒对细胞无抑制作用;(3)作用初期各剂量组5Fu纳米毫微粒的抑制作用低于或等于原药,随时间延长分别在不同时间点超过原药,差异有显著性。结论5Fu聚乳酸纳米毫微粒性状稳定,可长期释放药物,有效抑制兔晶状体上皮细胞的增生,随时间延长作用明显高于原药,可以作为靶向缓释药物载体。     

免疫载药毫微粒对晶状体上皮细胞的体外抑制作用

目的制备免疫载药毫微粒HILE6-PLA(5-Fu)-NP,体外评价其表征、免疫学特性及对晶状体上皮细胞(LECs)增殖的抑制作用。方法将抗人LECs膜单克隆抗体HILE6与5-Fu聚乳酸毫微粒采用碳二亚胺法相连接制备免疫毫微粒。扫描电镜观察微粒形态;间接免疫荧光法评价其免疫特异性;建立LECs、角膜基质细胞培养模型,体外检测不同质量浓度免疫微粒和单纯载药微粒对细胞作用2h后的杀伤作用。结果免疫毫微粒保持对LECs的免疫特异性,对LECs具有很强的杀伤作用,明显高于同质量浓度毫微粒,62·5μg/ml作用2h抑制率可达到92·3%,撤药后观察时间延长到7d时的抑制作用高于或不低于3d时的效果。使用药物质量浓度<12·5μg/ml对角膜细胞相对较安全。结论该免疫毫微粒可有选择性的,长时间杀伤LECs,预防后囊混浊。