E838等抗放药对放射损伤防治作用的比较

目的；比较研究E838，WR－2721，盐酸胱胺和炔雌醇等对放射损伤的防治作用及其相互之间的协同作用关系。方法：采用小鼠腹腔注射或灌胃的方法在致伤前或／和致伤后按常用量给药，观察30d存活率，死亡动物平活日和保护系数K的差异。结果：（1）致伤前预防给药，上述4种药物均明显提高了放射损伤的存活率，并延长了死亡动物的平均存活日，其中以E838和WR2721效果最佳；（2）致伤后给药则仅E838和茜草显示了治疗效果；（3）联合用药实验显示所研究的5种配伍用药方式均有较好的防治效果，但以WR2721（防）＋E838（治）效果最好。结论：E838和WR2721与其它抗放药相比具有较理想的辐射防护作用，且E838还有一定的治疗作用,两者合理配伍使用可发挥协同的作用效果。     

E838对放烧复合伤小鼠造血功能的保护作用

目的：研究炔雌醇衍生物E838对放烧复合造血功能保护作用,同时与公认抗放效果较好的Nilestriol进行比较。方法：采用两种给药方案,在致伤后2－32d计数外周血白 细胞和骨髓有核细胞,进行骨髓造血祖细胞CFU－E和CFU－GM培养,观察造血功能的变化。结果：在本实验用药方案条件下,E838对放烧复合伤造血功能有保护作用,部分指标效果较Nilestriol要好。结论：E838是一种有开发价值的抗放药。     

E838等5种辐射防护药对放烧复合伤防治作用的实验观察

目的 比较研究E838、WR-2721茜草、盐酸胱胺和炔雌醇等5种辐射防护药对放射损伤和放烧复合伤的防治作用及其相互间的协同作用。方法 采用小鼠腹腔注射、灌胃的方法在致伤前/或和致伤后按常用量给药,观察30d存活率,死亡动物平均存活日和保护系数K的差异。结果 （1）致伤前预防给药,5种药物均明显提高了放射损伤和放烧复合伤的存活率,并延长了死亡动物的平均存活日,其中以E838和WR-2721效果最佳;（2）致伤后给药则仅E838和茜草显示了治疗效果;（3）联合用药实验显示所研究的5种配伍用药方式均有较好的防治效果。但以WR-2721 E838治效果最好。结论 E838和WR-2721与其它辐射防护药相比具有较理想的辐射防护作用,且E838还有一定的治疗作用。两者合理配伍可发挥协同治疗作用。     

VEGF-C基因RNA干扰真核表达载体的构建及其效果鉴定

目的:构建VEGF-C基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法:以VEGF-C为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的VEGF-C基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pGenSil-VEGF-C质粒转染LOVO细胞48小时,检测其对LOVO细胞VEGF-C蛋白与mRNA表达的影响。结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低Lovo细胞VEGF-C的蛋白和mRNA表达,重组载体构建成功。结论:利用RNAi技术可成功构建抑制VEGF-C表达的小干扰RNA重组体。     

mTOR信号通路调控HK-Ⅱ表达对结肠癌细胞增殖的影响

目的：探讨mTOR信号通路是否可通过调控HK—Ⅱ蛋白表达的途径来影响结肠癌细胞增殖。方法：Western印迹检测结肠癌细胞mTOR、HK—Ⅱ蛋白表达水平，并观察抑制mTOR信号通路对HK—Ⅱ蛋白表达的影响。采用MTT法检测mTOR和HK—Ⅱ特异性抑制剂作用后结肠癌细胞增殖的变化。结果：mTOR、HK—Ⅱ蛋白在4种结肠癌细胞中均明显表达；抑制mTOR可阻断结肠癌细胞HK—Ⅱ蛋白表达；抑制mTOR和抑制HK—Ⅱ均可明显控制结肠癌细胞增殖，且两者有协同效应。结论：mTOR信号通路可能通过调控HK—Ⅱ的表达影响结肠癌细胞增殖。     

Tiam1和Rac1在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：观察人大肠癌和正常大肠黏膜组织中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，Tiam1）和RacGTP酶激活蛋白1（Rac GT Pase activating protein1，Rac1）的表达情况并探讨其临床意义。方法：应用SP免疫组化法检测50例经4％中性甲醛固定和石蜡包埋的大肠癌及50例正常大肠黏膜组织标本中Tiam1和Rac1蛋白的表达情况并分析其与大肠癌临床病理参数间的关系。结果：Tiam1和Rac1蛋白在正常大肠黏膜组织中均呈阴性染色（0／50，0），但在大肠癌组织中则呈阳性染色（42／50，84．00％），两者间差异有统计学意义，P=0．003。Tiam1和Rac1蛋白染色阳性率在高分化（9／13，69．23％）和低分化（14／14，100．00％）之间、T1＋T2或Ⅰ＋Ⅱ期（8／13，61．54％）和T3＋T4或Ⅲ＋Ⅳ期（34／37，91．89％）之间、无淋巴结转移（15／22，68．18％）和有淋巴结转移（27／28，96．43％）之间的差异均有统计学意义（P值分别为0．025，0．01，0．007），但Tiam1和Rac1蛋白表达水平与大肠癌患者的性别、年龄、癌变原发部位及癌肿大小无关（P值分别为0．686，0．975，0．791，0．709），差异无统计学意义。结论：Tiam1和Rac1蛋白的表达与人大肠癌浸润和转移密切相关。     

抑制HK-Ⅱ对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响及机制

目的：探讨抑制HK-Ⅱ对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响及可能机制.方法：应用免疫组织化学法检测HK-Ⅱ在人结肠癌细胞中的表达;采用MTT法观察HK-Ⅱ抑制剂（3-BrPA）对人结肠癌细胞增殖的影响和化疗增敏效应;通过Hoechst 33258染色,用共聚焦激光扫描显微镜观察3-BrPA诱导的细胞凋亡;用流式细胞术、紫外分光光度计分别检测细胞死亡率、线粒体膜电位和线粒体膜通透转换孔（PTP）开放的变化.结果：HK-Ⅱ在人结肠癌细胞中阳性表达.3-BrPA能明显抑制人结肠癌细胞增殖,小剂量3-BrPA增加化疗敏感性.3-BrPA可诱导结肠癌细胞凋亡,引起线粒体膜电位下降和PTP开放.结论：抑制HK-Ⅱ可能是通过影响线粒体膜电位和PTP来发挥抗肿瘤作用.     

结肠癌组织中Tiam1的表达与淋巴管生成之间的关系

目的:我们的实验旨在探讨T淋巴瘤侵袭转移基因1(T-cell lymphoma invasion and metastasis1,Tiam1)与结肠癌淋巴管生成的关系。方法:应用SP免疫组化法检测50例经4%甲醛固定、石蜡包埋结肠癌组织中Ti-am1、VEGF-C/D以及淋巴管密度(LMVD)的表达情况。结果:Tiam1阳性表达组VEGF-C阳性率为64.3%,Ti-am1阴性表达组VEGF-C阳性率为25.0%,二者差异有统计学意义,P=0.039;Tiam1阳性表达组LMVD为11.35±3.34,Tiam1阴性表达组LMVD为7.38±2.27,二者差异有统计学意义,P=0.002。结论:Tiam1过量表达可能与结肠癌淋巴管生成有关。     

糖皮质激素受体在结肠癌中的表达及临床意义

目的:研究糖皮质激素受体(GR)在结肠癌组织中的表达及其与核转录因子(NF-κB)和临床病理参数的关系。方法:运用免疫组化染色法检测61例结肠癌(包括42例不伴、19例伴淋巴结转移的原发灶)GR和NF-κB的表达情况。结果:在61例结肠癌组织中GR表达阳性率为57.4%(35/61),在高、中分化的结肠癌GR阳性率64.6%(31/48),明显高于低分化的30.8%(4/13);NF-κB在结肠癌中的阳性率为65.6%(40/61),与GR表达呈正相关(r=0.352,P=0.005)。结论:GR在结肠癌中表达可能与肿瘤的分化相关,与患者性别、年龄、肿瘤部位、Dukes分期及淋巴转移无关。GR将可能作为结肠癌病情发展和指导临床药物治疗的标记物之一。     

RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定

目的 构建Neuropilins-2(NRP2)基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法 以NRP2为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构件重组体,根据GenBank数据库提供的NRP2基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析.重组pGenSil-NRP2载体转染LOVO细胞48 h,收获细胞,采用Western blotting检测其NRP2蛋白表达.结果 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功.重组体pGenSil-NRP2转染LOVO细胞48 h后NRP2蛋白表达显著降低.结论 利用RNAi技术可成功构建抑制NRP2表达的小干扰RNA重组体.