浅谈生化实验教学中对差生的转化

导致学生学习差的原因不外乎家庭、社会、学校三个方面。但学生和教师方面的原因是主要的。这里既有学生学习方法和习惯、学习心理及智商因素，更有教师素质、教法等因素。教师的正确方向是对症下药。要做好差生的转化工作，就必须要优化家庭、社会、学校的环境，减少乃至消除各种伤害学生情绪的消极因素。要加强对差生的教育和训练，引导他们正确认识挫折，使他们懂得，古今中外的成功者，无一不是从挫折走向成功，从失败走向胜利的。只要学校、家庭和社会能够很好地配合，对差生的转化就会收到良好的效果。     

血脂水平在长时期内的生物学变异

目的：探讨我国人血脂水平的长期个体内生物学变异情况。方法：在多年从事血脂标准化研究及参加国际血脂标准化计划基础上长期测定一相对稳定人群的血脂水平，分析其中23例1年多次及100例10-15年间每年1次血脂测定结果。结果：两组病例血脂水平的个体内总变异（包括生物学变异和分析变异）大致为，总胆固醇10％，甘油三酯28％，低密度脂蛋白胆固醇18％，高密度脂蛋白胆固醇16％。结论：血脂指标，尤其是甘油三酯有较大生物学变异，临床上判断血脂水平高低时需考虑到生物学变异的存在，并采取适当措施减小生物学变异。     

血脂和脂蛋白及载脂蛋白检测的标准化

心血管病流行病学研究需要对人群的血脂水平作国际间与地区间的横向比较，同一人群的血脂纵向研究、多中心协作研究及临床疗效观察中都需要血脂测定做到标准化。临床上需要制定血脂的合适水平或异常水平的划分标准、治疗指针及治疗目标，危险因素干预建议采用统一（至少在同一国家内）血脂水平划分方案，而且不同划分水平之间的差距不是很大，这就要求血脂测定达到一定的准确度。目前临床上普遍使用生化自动分析仪和商品试剂盒测定血清总胆固醇（TC）或甘油三酯（TG），测定的精密度较过去有很大提高。但有数据表明临床实验室测定结果的可比性仍不能满足临床要求，主要原因在于不同分析系统测定的准确性问题。如何提高和保证临床检验的准确性，使不同方法、不同厂家、不同实验室的检验结果具有可比性，是迫切需要重视和解决的重要课题。血脂测定标准化并非要求统一测定方法，而是实验室之间对同一批标本的血脂测定值取得基本一致，要求测定值落入在可允许的不精密度（CV）及不准确度（偏差）范围内，表1。     

同位素稀释质谱法在美国CDC-CRMLN计划中的比对结果分析

目的总结并回顾性分析同位素稀释质谱法在美国疾病预防控制中心(CDC)胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)中的比对结果,为我国血脂测定提供质量保证。方法采用我国建立的同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的方法参加CRMLN比对。2016年之前每3个月1次,每次4种样品,测定2批。2016年之后每半年比对1次,每次4种样品,测定2批。每次测定中至少同时测定2个有证标准物质作为质控品。结果 15次TC比对结果显示,本血脂参考实验室(以下简称"本室")平均CV为0.43%,CDC各参加实验室间CV为0.42%,本室与实验室间总体均值的偏移为0.22%,与CDC靶值的偏移为0.58%。15次TG比对结果显示,本室平均CV为0.62%,本室测定TG的结果与实验室间均值的偏移为-0.98%,与CDC靶值的偏移为-0.80%。TC和TG各60个比对结果中,98%(59/60)的TC测定CV满足CDC的精密度要求,70%(42/60)的测定满足TC准确度要求(TC:CV≤1%,偏移≤1%);92%(55/60)的TG测定准确度满足CDC的要求(TG:偏移≤2.55%)。结论 ID-LC/MS/MS测定血清TC和TG的方法在CRMLN比对中数据良好,与CDC及各网络实验室测定结果一致,有望在我国血脂标准化中发挥重要作用并为参考测量比对计划提供经验和技术支持。     

血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质的研制

目的 研制与临床标本基质相似的血清总胆固醇(TC)、总甘油(TTG)、游离甘油(FG)和甘油三酯(TG)标准物质.方法 按国家标准物质技术规范的要求,制备4种血脂浓度的健康人新鲜混合血清,用酶法测定TC检测均匀性,用HPLC法检测稳定性并定值,评估不确定度.结果 4种血清均匀性检验数据方差分析P值分别为0.339、0.212、0.275、0.196(均＞0.05),说明均匀性良好;稳定性研究结果显示4种血清TC和TG在-20℃保存至少可稳定4年;4种血清的标准值和不确定度TC分别为(5.110±0.064)mmol/L、(4.761±0.062)mmol/L、(3.941±0.050)mmol/L和(3.158±0.041)mmol/L;TTG分别为(2.212±0.043)mmol/L、(1.679±0.033)mmol/L、(1.275±0.027)mmol/L和(1.067±0.023)mmol/L;FG分别为(0.142±0.005)mmol/L、(0.149±0.004)mmol/L、(0.146±0.003)mmol/L和(0.122±0.003)mmol/L;TG分别为(2.069±0.043)mmol/L、(1.530±0.033)mmol/L、(1.129±0.027)mmol/L和(0.945±0.023)mmol/L.结论 研制的血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质均匀性和稳定性良好,定值可靠,已被国家质量监督检验检疫总局发布为国家一级标准物质(GBW 09145、GBW 09146、GBW 09147、GBW 09148).     

甘油标准物质的研制

目的 研制浓度适宜、便于保存和使用的甘油水溶液标准物质.方法 参照一级标准物质技术规范(JJG 1006-1994)及有关技术文件,制备适当浓度的甘油水溶液,HPLC法进行均匀性和稳定性检验,滴定法测定该溶液的甘油含量.结果 (1)甘油溶液均匀性检验:3次测量结果的x-±s分别为1.297 5±0.014 3、1.302 0±0.008 9、1.313 7±0.007 8,经方差分析,差异无统计学意义(F=11.462,P=0.166),说明甘油溶液分装均匀.(2)4℃保存至少稳定4年,定值为0.103 6 g/g,不确定度为0.000 4 g/g.结论 研制的甘油标准物质符合国家一级标准技术要求.已于2006年5月被国家质量监督检验检疫总局批准为国家一级标准物质(GBW 09149).     

丹参红花提取物保护内皮细胞免受氧化损伤的体外实验

目的：观察低密度脂蛋白和无血清培养刺激下人脐静脉内皮细胞内活性氧、NOX4mRNA水平和细胞凋亡的变化，以及丹参红花提取物的干预作用。 方法：实验于2005-11／2006—05在卫生部老年医学重点实验室完成。取人新鲜脐带分离培养人脐静脉内皮细胞，分为：①正常对照组。②无血清培养组：用无血清培养基培养24h。③低密度脂蛋白处理组：以含有800mg／L低密度脂蛋白的培养基培养16h。④丹参红花提取物预处理组：用丹参红花提取物（商品名丹红滴注液，由陕西步长集团提供浓缩液，国药准字号Z 20026866／Z 20026867）预处理24h后加入800mg／L低密度脂蛋白继续培养16h或在无血清培养基中培养24h。以MTT法观察丹参红花提取物对人脐静脉内皮细胞生长的影响；应用反转录-聚合酶链反应检测NOX4mRNA水平；用流式细胞仪分析细胞凋亡率；并以DCFH-DA法检测细胞内活性氧生成量。 结果：①低密度脂蛋白处理组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡为正常对照组的1.3倍，1.2倍和4倍。②无血清培养组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为正常对照组的1．4倍、1．6倍和3倍。③丹参红花提取物预处理组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为低密度脂蛋白处理组的0．4倍，0．5倍和0．2倍。④丹参红花提取物组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为无血清培养组的0．2倍、0．5倍和0．6倍。 结论：丹参红花提取物能够有效抑制高脂及缺血状态下NOX4 mRNA表达水平，从而抑制人脐静脉内皮细胞内活性氧的产生及细胞凋亡，对内皮细胞起到很好的保护作用。     

单纯性肥胖青少年血清脂蛋白亚组分水平分析

目的探讨青少年单纯性肥胖与血清脂蛋白及其亚组分水平的关系。方法采用超速离心-高效液相色谱法测定60例肥胖青少年和19例体重指数正常者血清脂蛋白及其亚型水平。使用双能量X线吸收仪检测所有受试者全身及躯干部体脂比率。结果与正常对照组相比,肥胖组血清TC(4.47±0.90)比(3.79±0.50)mmol/L、TG(1.02±0.41)比(0.72±0.34)mmol/L、LDL-C(2.56±0.81)比(1.95±0.35)mmol/L、LDLa-C(2.39±0.83)比(1.74±0.37)mmol/L平均水平显著增高,而HDL-C(1.18±0.23)比(1.35±0.16)mmol/L、HDL2-C(0.73±0.21)比(0.91±0.16)mmol/L平均水平明显降低(P<0.01)。BMI、腰围、全身体脂及躯干体脂比率分别与TC、TG、LDL-C、LDLa-C水平呈显著正相关,与HDL-C、HDL2-C水平呈显著负相关(P<0.05,P<0.01)。结论单纯性肥胖青少年存在与肥胖相关的早期脂质代谢紊乱的趋势。     

同型半胱氨酸水平与冠心病的关系

目的观察同型半胱氨酸(Hey)水平与冠心病(CHD)的关系,并探讨蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G基因多态性、叶酸、维生素B12(VitB12)与Hcy水平及CHD的关系。方法 选择190例经冠状动脉造影证实的CHD患者(CHD组)和100例冠状动脉造影正常者为对照组。应用荧光偏振免疫分析法测定Hey水平,离子捕获分析法测定叶酸水平,微粒酶免疫分析法测定VitB12水平。聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析MTRRA66G基因多态性。结果 CHD组血Hcy水平显著高于对照组(15.8±8.8)μmol/L与(12.9±6.3)μmol/L,P=0.002。叶酸、VitB12水平与血Hcy水平呈负相关。叶酸、VitB12与CFD无关。MTRR A66G基因多态性GG纯合子、AG杂合子和AA野生型3种基因型组间血Hcy水平差异无显著性意义。(P=0.908)。MTRR A66G各基因型在CHD组和对照组的分布差异无显著性意义(P=0.198)。结论CHD患者血Hcy水平升高,叶酸、VitB12水平与血Hcy水平呈负相关。MTRR A66G基因多态性与血Hcy水平及与CHD均无关。