薯蓣皂苷元对THP-1巨噬细胞ABCA1表达及胆固醇流出的影响

目的　探讨薯蓣皂苷元（Dgn）对巨噬细胞ATP结合盒转运体A1（ABCA1）表达及其介导胆固醇流出的影响。方法　用Dgn或结合ABCA1小干扰RNA（siRNA）处理THP-1源性巨噬细胞24　h后,Western　blot检测ABCA1蛋白水平,HPLC检测胞内总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）及胆固醇酯（CE）含量,液体闪烁计数仪检测胞内胆固醇流出,油红O染色观察胞内脂滴情况。结果　Dgn呈浓度依赖性上调巨噬细胞ABCA1的表达,促进胞内胆固醇流出,降低胞内TC、FC和CE含量,抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。而ABCA1　siRNA与Dgn共处理细胞后,明显抑制Dgn促胆固醇流出作用,胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成明显加剧。结论　Dgn通过促进巨噬细胞ABCA1表达和胆固醇流出,抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。     

苦瓜抗兔动脉粥样硬化实验研究

目的：在证实苦瓜蛋白有抗炎、抗氧化作用的基础上，在兔动脉粥样硬化AS模型上，研究苦瓜是否有抗动脉粥样硬化作用。方法：新西兰兔分为3组，即正常组（正常兔饲料），AS模型组（正常兔饲料中含2％的胆固醇），苦瓜组（正常兔饲料中含2％的胆固醇和1.5％的苦瓜果肉）。90 d后处死动物，测定血脂及动脉壁总胆固醇含量，观察脂肪肝、主动脉粥样病变，综合评价苦瓜的抗动脉粥样硬化作用。结果：苦瓜组血清总胆固醇、LDL-C、血管壁总胆固醇均显著低于AS模型组，但TG水平与AS模型组差异不明显；苦瓜组HDL-C水平显著低于正常组；苦瓜组粥样病变面积、内膜厚度、I/M比值及脂肪肝程度均显著低于AS模型组。结论：苦瓜果肉有一定抗动脉粥样硬化作用。     

SDF 1α对大鼠骨髓源性内皮祖细胞克隆形成能力及增殖的影响

目的观察基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）对体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）动员和增殖的影响。方法微孔法获取大鼠骨髓EPCs并采用荧光显微镜和流式细胞术鉴定EPCs特异性标记物。不同浓度SDF-1α处理EPCs后,采用细胞培养、MTT检测EPCs的克隆形成、细胞增殖。结果通过MTT法检测,对照组与（1、10、100μg/L）SDF-1α处理组的OD值分别为0.311±0.054、0.587±0.072、0.813±0.056、1.029±0.078,通过统计学方法分析,对照组与SDF-1α处理组比较差异均有统计学意义（n=5,P〈0.05）;100μg/LSDF-1α处理组次级内皮祖细胞集落单位数目是对照组近3倍（4.67±1.577比14.33±3.055,n=5,P〈0.01）。结论SDF-1α剂量依赖性地促进EPCs增殖,并显著增强EPCs克隆形成能力。     

核因子κB通过Sortilin促进荷脂THP-1巨噬细胞泡沫化

目的探究核因子κB(NF-κB)是否通过分拣蛋白Sortilin影响荷脂THP-1巨噬细胞脂质代谢和泡沫化。方法 NF-κB激活剂PMA或其特异性抑制剂PDTC孵育荷脂THP-1巨噬细胞,qRT-PCR检测Sortilin mRNA水平,Western blot检测Sortilin蛋白表达;沉默荷脂THP-1巨噬细胞Sortilin同时加入PMA孵育,胞内胆固醇流出行液体闪烁计数器检测,胞内脂质含量行高效液相色谱法检测,胞内脂滴情况用油红O染色显示。结果 PMA孵育处理荷脂THP-1巨噬细胞后Sortilin mRNA水平及蛋白表达上调,PDTC孵育处理后Sortilin mRNA水平及蛋白表达下调;PMA孵育处理荷脂THP-1巨噬细胞内脂质流出减少,脂质蓄积程度增加,泡沫细胞形成加剧,而PMA与Sortilin shRNA共处理后,其胞内脂质流出增多,胞内脂质蓄积程度减轻,泡沫细胞形成受抑。结论 NF-κB通过促进Sortilin表达,导致巨噬细胞内脂质流出受抑,胞内脂质蓄积程度加重,从而加剧泡沫细胞形成。     

基质细胞衍生因子1对低密度脂蛋白诱导单核—内皮细胞粘附的影响

目的观察基质细胞衍生因子1对低密度脂蛋白诱导的单核细胞-内皮细胞粘附的调节作用,以进一步探讨基质细胞衍生因子1在动脉粥样硬化中的作用。方法密度梯度离心法分离人低密度脂蛋白;逆转录聚合酶反应检测内皮细胞基质细胞衍生因子1mRNA表达,Westernblot检测基质细胞衍生因子1蛋白质的表达;细胞记数法观察低密度脂蛋白及基质细胞衍生因子1抗体干预对内皮细胞单核细胞粘附的影响。结果对照组几乎没有基质细胞衍生因子mRNA以及蛋白质的表达,随着低密度脂蛋白浓度增加,基质细胞衍生因子1mRNA以及蛋白质的表达水平明显增加。低密度脂蛋白浓度为50mgL、100mgL和150mgL时,每个视野粘附的单核细胞数分别为60±20、97±26和170±32,而正常对照组为20±5,差异有极显著性意义(P<0.01)。终浓度为0.1mgL、0.5mgL和1mgL基质细胞衍生因子1抗体干预后,粘附的单核细胞数分别为113±23、53±21和41±10,均低于低密度脂蛋白对照组的186±31,与低密度脂蛋白对照组差异有显著性意义(P<0.05)。结论低密度脂蛋白促进内皮细胞与单核细胞的粘附,其机制与促进内皮细胞表达基质细胞衍生因子1密切相关。     

暗饲养对视神经横断后SD大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶表达的影响

目的探讨视神经横断后Müller细胞在改善视网膜节细胞轴突再生微环境及其对光信号传递突触的保护作用。方法实验建立视神经横断模型,随机分成正常昼夜循环组及黑暗饲养组,用免疫组织化学及Western blot法检测视神经横断后,SD大鼠在正常昼夜循环条件及黑暗条件下饲养时视网膜谷氨酰胺合成酶随饲养时间延长的表达变化;Nissl染色法观察相应视网膜节细胞的形态结构改变。结果正常昼夜循环饲养的大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶的表达于视神经横断后持续减少,5 d时达最低值;暗饲养的大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶的表达于视神经横断后3 d时最低,5~7 d时持续增加。Nissl染色显示暗饲养组大鼠视网膜节细胞14d时存活较多。结论正常昼夜循环条件视神经横断后Müller细胞谷氨酰胺合成酶的表达呈应激性反应,暗饲养能在突触溃变关键期维持视网膜内谷氨酰胺合成酶的表达强度。     

人体解剖学神经系统教学探讨

神经系统是解剖学教学的重点和难点,文章从强调神经系统总论的教学,营造学生良好开端的学习氛围;应用多种教学方法授课,提高学生学习的兴趣和效率;加强实验教学,提高学生对知识的理解和掌握;联系临床病例,培养学生分析问题和解决问题的能力等方面对神经系统的教学进行探讨。     

分拣受体Sortilin促进巨噬细胞内脂质蓄积

目的探讨分拣受体Sortilin对THP-1巨噬细胞内脂质代谢的影响。方法用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育THP-1巨噬细胞。Western blot检测荷脂后THP-1巨噬细胞中Sortilin表达变化;THP-1巨噬细胞Sortilin高表达和沉默后,液体闪烁计数仪检测胞内胆固醇流出,高效液相色谱法检测细胞内脂质含量,油红O染色观察胞内脂滴情况。结果 THP-1巨噬细胞Sortilin表达呈ox-LDL剂量和时间依赖性增加;以50 mg/L ox-LDL处理24 h后THP-1巨噬细胞Sortilin表达水平达到高峰。与对照组相比,Sortilin过表达后巨噬细胞胆固醇流出减少,胞内脂质含量增加且脂滴明显增多,而Sortilin沉默后则刚好出现相反的结果。结论 Sortilin抑制巨噬细胞内胆固醇流出,促进胞内脂质蓄积。     

miR-19b靶向沉默ABCA1调控巨噬细胞胆固醇流出

目的 探讨miR-19b对三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制。方法 将miR-19b mimic或miR-19b inhibitor转染入THP-1源性巨噬细胞,液体闪烁计数仪检测细胞内胆固醇流出,油红O染色观察细胞内脂滴情况,生物信息学分析miR-19b与ABCA1 3′UTR的结合关系,荧光素酶报告基因检测miR-19b与ABCA1的结合情况,Western blot检测ABCA1 蛋白水平。结果 miR-19b抑制巨噬细胞胆固醇流出,增加胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成,而anti-miR-19b则刚好出现相反的结果。miR-19b与ABCA1 3′UTR的3110-3116位结合,且二者结合的自由能较低。miR-19b显著抑制荧光素酶活性及其巨噬细胞中ABCA1蛋白的表达。结论 miR-19b靶向沉默ABCA1进而抑制其介导的胆固醇流出,增加巨噬细胞内脂质蓄积。     

中国人体膝关节三维重建研究现状及其临床意义

目前国内外开展了大量膝关节损伤相关的基础与临床的虚拟仿真研究。而国外文献报道针对膝关节开展虚拟重建已集中在关节软骨、韧带、半月板等结构上,但在国内膝关节的虚拟重建仍大都集中在膝关节的骨性结构中,很少文献报道关节内韧带、软骨等结构的研究。但由于膝关节结构的复杂性以及受影像技术的限制,目前膝关节的重建还不令人满意,许多方面亟待改进。本文就目前膝关节的骨性结构、关节软骨、半月板、韧带及周围血管的重建情况,进行膝关节三维重建的模型构建及应用等方面的探讨。