CXCL16在小鼠免疫性肝损伤中的作用及意义

目的研究CXCL16的表达对小鼠免疫性肝损伤中的作用及意义。方法建立卡介苗和内毒素诱导的小鼠肝损伤模型，通过实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学分析CXCL16在肝组织中的表达变化，根据肝脏病理变化和免疫组织化学结果分析，比较CXCL16的表达水平和肝脏损伤程度的关系。从模型中各个时间点的肝损伤组织中分离浸润单核细胞，计算浸润的细胞数量变化，并进一步分析其中主要的CD4和CD8T淋巴细胞亚群的数量变化，研究CXCL16在肝脏炎症和损伤中的作用和意义。结果成功复制了小鼠免疫性肝损伤模型，发现在肝脏炎症和损伤中CXCL16表达水平显著上调，CXCL16的表达水平与肝脏损伤程度密切相关，肝脏组织浸润的单核细胞数晕明显增加，淋巴细胞尤其是CD4 、CD8 T淋巴细胞数量也有明显的增加。结论小鼠肝脏损伤过程中CXCL16表达水平的增加与肝损伤程度密切相关，CXCL16趋化淋巴细胞浸润可能是导致肝脏损伤的重要机制之。     

上海市奉贤区居民伤害死亡原因分析

伤害死亡已成为严重威胁人类健康与生命的重要公共卫生问题,同时也是一个社会问题,为了解奉贤区居民伤害死亡情况,以便行政主管部门采取相应措施,笔者对奉贤区2003—2007年居民伤害死亡资料进行了分析。     

上海市奉贤区1991-2007年糖尿病死亡率趋势

目的 分析1991-2007年上海市奉贤区居民糖尿病死亡率的变化趋势.方法 采用1991-2007年奉贤区居民病伤死亡原因报表资料,对奉贤区1991-2007年糖尿病死亡资料进行分析,并用直线回归方程进行预测糖尿病死亡趋势.结果 2007年上海市奉贤区居民糖尿病死亡率13.41/10万,较1991年(4.42/10万死亡率)上升3倍;其中男性上升3.2倍,女性上升2.9倍,但女性糖尿病死亡率高于男性;糖尿病死亡率占总死亡率构成比上升2.6倍.结论 上海市奉贤区1991-2007年糖尿病患者死亡率上升趋势明显,标化死亡率上升趋势相同.提示应加强防治力度,提高生存质量.     

原发性胆汁性肝硬化模型中淋巴细胞增殖及活化诱导凋亡机制研究

目的 通过检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)动物模型肝脏和脾脏淋巴细胞增殖及活化诱导凋亡(AICD),了解PBC模型小鼠的免疫耐受情况.方法 聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸(polyI:C)5 mg/kg剂量注射C57BL/6小鼠建立PBC模型,分离肝、脾淋巴细胞并纯化CD4~+T淋巴细胞,然后以M2蛋白及刀豆蛋白A(ConA)结合抗-CD3刺激细胞增殖及AICD,定量PCR和免疫印迹技术检测凋亡相关基因及信号蛋白.结果 ①M2蛋白刺激后,空白对照组和PBS组的细胞增殖能力(分别为0.1988±0.0111和0.2068±0.0115)差异无统计学意义(P>0.05),但是PBC组小鼠细胞增殖能力(0.358±0.022)与以上两组相比显著增强,且PBC组小鼠肝内淋巴细胞增殖能力强于脾淋巴细胞(P<0.01).②空白对照组和PBS组之间AICD情况差异无统计学意义(74.70%±4.58%比74.20%±4.44%,P>0.05),但均显著高于PBC组(44.85%±6.47%,P<0.01),同时PBC组小鼠肝内CD4~+T细胞的凋亡率显著低于脾脏(P<0.01).③PBC组小鼠肝脾淋巴细胞FasL、TRAIL基因的表达较PBS组均明显降低(P<0.01),而Fas表达无明显改变.④PBC组小鼠CD4~+T细胞长构型Fas相关死亡区域样白细胞介素-1β转化酶抑制蛋白(FLIP_L)表达明显升高,且肝内T细胞表达较脾脏显著增加(P<0.01).结论 FLIP_L表达增高可能是AICD受到抑制的重要原因,同时FasL和TRAIL mRNA表达降低可能也起到一定的作用.     

CXCL16抗体可阻断BCG和LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤

目的研究CXCL16抗体体内阻断对小鼠免疫性肝损伤的影响。方法克隆、表达和纯化小鼠趋化因子CXCL16活性蛋白，免疫动物制备特异性抗体。抗体体内注射免疫性肝损伤模型小鼠，观察CXCL16抗体对肝脏损伤、ALT水平及小鼠生存率的影响。结果获得了高纯度的活性CXCL16重组蛋白及其特异性抗体，特异性抗体阻断明显改善肝脏的病理损伤，降低血清中ALT水平、延长模型组小鼠的存活时间。结论获得了具有趋化活性的CXCL16蛋白和特异性抗体，CXCL16抗体对卡介苗和脂多糖诱导的小鼠肝损伤具有显著保护作用。     

TLR在小鼠胸腺中的表达及其在胸腺细胞发育中的可能作用

检测体外培养和体内发育过程中,胎鼠胸腺处于不同发育阶段时Toll样受体(TLR)的表达,阐明TLR表达量与胸腺细胞发育相关性,为TLR和胸腺细胞发育分化相关研究提供基础数据。无菌取15d胎龄胎鼠胸腺进行体外培养(FTOC),在培养不同时间点(2d,4d,6d),检测处于不同发育期胸腺TLR的表达;同时在孕期不同天数(15~19d),分别取胎鼠胸腺,检测在体内发育过程中胸腺TLR的表达;在FTOC中加入二脱氧鸟苷培养6d以制备胸腺基质细胞,检测基质细胞与胸腺细胞TLR表达情况。结果:小鼠胸腺中检测到多种TLR。FTOC培养中:培养第2天(F2)开始检测到各种TLR,到培养第6天(F6),TLR1,TLR3,TLR6,TLR7,TLR8明显上调,而TLR4,TLR5保持低水平,TLR4在培养第6天又下降;体内发育过程中:TLR6表达量随胎龄增加有较明显上调,TLR1,TLR3-8保持低水平表达;TLR2,TLR9体内体外都未检测到明显表达。在对胸腺细胞与基质细胞TLR表达比较中发现TLR1,TLR5,TLR6,TLR7高表达于胸腺细胞。胎鼠胸腺表达某些TLR,并且在发育不同阶段表达量有所改变,提示TLR可能参与胸腺细胞的发育过程。     

细胞外基质受体α-Dystroglycan影响胸腺细胞分化发育的可能机制

目的研究细胞外基质受体alpha-Dystroglycan(α-DG)对胸腺细胞分化的影响及机制。方法摘取15日胚龄鼠胸腺小叶进行体外器官培养。将α-DG抗体、对照抗体或培养液滴加在胸腺小叶上。FACS(Fluorescence-activated cell sorting)分析胸腺细胞表面分子CD4、CD8、CD95和CD69等的表达。结果α-DG中和抗体能明显抑制胸腺细胞分化，显示胸腺双阴性细胞比例从对照组的26．5％增高到实验组的71．6％，双阳性细胞和CD8单阳性细胞比例则显著下降，分别从39．8％和20．7％下降到7．5％和6．8％，CD4单阳性细胞比例则无明显变化；同时胸腺细胞数目明显减少；CD95、CD69的表达水平随α-DG中和抗体的持续存在呈现显著升高。结论α-DG通过参与胸腺细胞的活化和凋亡活动影响胸腺细胞的发育。     

TRAb检测作为Graves病患者停药指征及预后判断依据的临床研究

目的探讨促甲状腺素受体抗体（TRAb）对于判断毒性弥漫性甲状腺肿（Graves病）患者顸后的价值及其作为患者停药指征的可行性。方法选取2011年1月至2012年12月在市属三家医院治疗的264例Graves病患者,将其分为未治疗组（57例）、治疗控制组（53例）、治疗未控制组（46例）、停药复发组（49例）、停药未复发组（59例）,另选50例正常体检者作为正常对照组。检测各组患者平均TRAb值,比较其差异。结果正常对照组TRAb平均水平为（1．49±0．31）IU／L,未治疗组为（34．87±5．38）IU／L,治疗控制组为（7．63±1．32）IU／L,治疗未控制组为（20．01±4．28）IU／L,停药复发组为（27．02±4．14）IU／L,停药未复发组为（2．38±0．41）。除停药未复发组以外,其他各组平均TRAb水平均显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P〈0．01）;治疗未控制组平均TRAb水平显著高于治疗控制组．差异具有统计学意义（P〈0．01）;停药复发组的平均TRAb水平显著高于停药未复发组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论TRAb是评价Graves病控制情况和是否复发的重要指标,TRAb降至正常水平可作为Graves病患者停药的指征之     

强直性脊柱炎患者外周血TH细胞亚群和细胞因子的检测及其临床意义

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血辅助性T细胞(TH)亚群和细胞因子的变化水平及其临床意义。方法用流式细胞术分析27例AS患者及30例体检健康者外周血TH1、TH2和TH17细胞亚群的比例;流式微球阵列技术(cytometric beadarray,CBA)检测血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ和IL-17A的水平。结果 AS组TH1和TH17细胞的百分率显著高于健康人对照组(P均<0.01),而TH2细胞差异无统计学意义(P>0.05)。AS患者血清IL-2、IL-6、TNF和IFN-γ表达水平也明显高于健康人对照组(P均<0.01),但IL-4、IL-10和IL-17A无显著性差异(P均>0.05)。结论 AS患者TH细胞亚群失衡,表现为TH1和TH17细胞比例及IFN-γ、TNF、IL-2和IL-6水平升高。     

调节性B细胞在类风湿性关节炎中的表达及其与疾病严重程度的相关性分析

目的检测类风湿关节炎(RA)患者外周血IL-10~+CD19~+调节性B细胞(Breg)的表达情况,并分析其与患者疾病活动程度的相关性。方法选择40例活动期RA患者为RA组,30例体检健康者作为对照组(HCs),抽取外周血并分离单个核细胞(PBMC),以CpG寡脱氧核苷酸2006(CpG ODN 2006)和佛波醇酯(PMA)进行体外共培养,流式细胞术分析作用前后Breg的表达情况,并与疾病严重程度指标血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)和关节活动度评分(DAS28)作相关性分析。结果体外诱导前RA组和HCs组PBMC中Breg的表达比例分别为1.92%(1.58%,2.56%)和2.04%(1.73%,2.93%),差异无统计学意义(P=0.258);经体外培养诱导后,Breg表达显著升高,RA组为13.00%(9.75%,14.85%),HCs组为9.12%(6.83%,10.22%),差异有统计学意义(P0.001)。对RA组Breg与ESR、CRP、DAS28进行Spearman相关性分析发现,Breg与DAS28呈负相关关系(P=0.002),而与ESR和CRP无显著相关(P0.05)。结论诱导后Breg在RA患者中显著升高,并且与RA活动性呈负相关关系,可能在RA的发生、发展中具有重要的免疫调节作用。