孕酮对子宫内膜、卵细胞及胚胎发育的影响

孕酮是一种女性激素,在人类生殖中占有重要地位,可作用于卵巢及子宫,对卵细胞的发育成熟、排卵、胚胎发育、胚胎着床、维持妊娠等具有重要作用。研究认为孕酮分泌不足可能是妊娠早期流产的原因之一。孕酮通过调节子宫内膜的容受性,为胚胎的生长发育提供一个适宜的环境,同时通过调节黄体生成激素(LH)峰及其受体以及对优势卵泡发育的作用来影响卵细胞的成熟及质量。此外胚胎本身的发育也受到孕酮的作用,在体外培养胚胎时添加孕酮能提高囊胚的形成率及植入率。虽然目前对孕酮的药代学及药效学已研究得十分透彻,其人工合成制剂已经投入临床使用,但对其病理生理机制尚存在争议。综述孕酮对子宫内膜、卵细胞及胚胎发育的影响。     

外体（exosomes）对肿瘤微环境作用的研究进展

外体(exosomes)是体内来源的且能被多种类型的细胞释放到微环境的小囊泡,携带来自宿主的微小RNA(microRNA,miRNA)、mRNAs、DNA片段及蛋白质等成分。不同肿瘤微环境细胞(如免疫细胞、间充质干细胞和肿瘤自身细胞等)分泌的外体能介导肿瘤细胞与肿瘤微环境细胞间物质和信息的传递。研究表明,肿瘤细胞分泌的外体可募集和重建肿瘤微环境的相关成分,促进肿瘤的血管生成、肿瘤转移及执行免疫抑制功能。本文就目前外体对肿瘤微环境的研究进展作一综述。     

人脐带间质干细胞来源的外切体对大鼠肾小管上皮细胞缺氧损伤的干预作用

目的:观察体外缺氧损伤的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡情况以及分离纯化人脐带间质干细胞来源的外切体(hucMSCs-exosomes)对其干预作用。方法:将体外培养的NRK-52E细胞随机分为对照组、缺氧损伤模型组和hucMSCs-exosomes(0.5,1.0 mg/ml)预处理组。随后进行细胞计数,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白(Bcl-2,bax)的表达变化,流式细胞仪检测细胞周期以及凋亡率的变化。结果:与对照组相比,模型组细胞凋亡相关指标均明显升高,细胞计数下降(P<0.01),Bcl-2/bax表达下调(P<0.01),细胞周期S期阻滞以及凋亡细胞比例明显增多。而hucMSCs-exosomes预处理组可明显改善缺氧损伤时的细胞活力,上调Bcl-2/bax的表达,改善细胞周期和凋亡细胞的比例(P均<0.05)。结论:NRK-52E在缺氧损伤时有明显的细胞凋亡,而hucMSCs-exosomes预处理可能通过抗凋亡途径减轻缺氧时细胞的损伤。本实验可为进一步研究hucMSCs-exosomes在组织损伤修复中的生物学功能和相关机制提供实验基础。     

外周血硫氧还蛋白还原酶与血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 在 肺癌筛查中的临床意义

目的 探讨血清细胞角蛋白 １９ 片段抗原 ２１ １（ＣＹＦＲＡ２１ １）、癌胚抗原（ＣＥＡ）及血浆硫氧还蛋白还原酶（ＴｒｘＲ）在肺癌 筛查中的临床价值。方法 选取 ２０１８ 年 ４ 月至 ２０２０ 年 １１ 月南通市肿瘤医院就诊的 １６０ 例肺癌患者（肺癌组）作为研究对 象；同期选取体检健康者 １００ 例作为健康人对照组。采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测各组血浆 ＴｒｘＲ 活性水平，电化学发 光免疫试验（ＥＣＬＩＡ）检测血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 水平；采用 ＲＯＣ 曲线评估血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平对早 期肺癌的筛查价值。结果 与健康人对照组相比，肺癌组血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平均显著升高（ｔ 分别为 １５．１８０、１３．４５３ 和 １６．０３８，Ｐ均＜０．００１）。与Ⅰ 期＋Ⅱ期肺癌患者相比，Ⅲ期＋Ⅳ期患者血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性 水平均显著升高（ｔ分别为 ５．５３８、５．７４０ 和 ３．３４２，Ｐ均＜０．００１）。ＲＯＣ 曲线结果表明，ＣＹＦＲＡ２１ １筛查早期肺癌的 ＡＵＣＲＯＣ、敏感 性和准确性均低于 ＴｒｘＲ（Ｐ＜０．０５），ＣＥＡ 筛查早期肺癌的 ＡＵＣＲＯＣ、敏感性、准确性、特异性和阴性预测值亦低于 ＴｒｘＲ（Ｐ 均 ＜０．０５）。与治疗后相比，治疗前肺癌患者血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平明显升高（ｔ 分别为 １４．８９７、７．８２６ 和 ２９．９８９，Ｐ均＜０．００１）。结论 血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平对肺癌均具有一定的筛查价值，其中 ＴｒｘＲ 的筛查 效能更好。     

长链非编码RNA ZFAS1在非小细胞肺癌患者组织中表达及作用

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS1在A549细胞中表达,细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式分析检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量RT-PCR检测Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平变化。结果 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中的平均表达水平[0.01(0.002,0.054)]较癌旁组织[0.002(0.001,0.012)]明显升高(Z=-2.638,P0.01)。ZFAS1基因敲减后,A549细胞增殖能力明显减弱(P0.01);A549细胞周期G1期比例升高,S期比例下降(P0.01);A549细胞凋亡比例明显增加(P0.01);A549细胞迁移和侵袭能力明显下降(P均0.01);A549细胞中Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平均降低(P均0.05)。结论 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中呈高表达。ZFAS1基因敲减诱导细胞周期阻滞、凋亡和抑制上皮-间质转变(EMT),减弱NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

不同标本解脲脲原体的检出率及耐药性分析

解脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）是一群无细胞壁的最小的原核细胞型微生物，可寄生于泌尿生殖道，常引起非淋菌性尿道炎、早产及新生儿脑膜炎、肺炎。Uu归类于支原体属，虽然起源于革兰阳性菌，但无细胞壁结构，临床上多采用四环素类、喹诺酮类及大环内酯类等干扰蛋白质合成的药物进行治疗。由于不规则的治疗及抗生素的滥用等诸多因素，Uu耐药株在逐年增加，这给治疗带来了困难。     

血清HE4,CA125联合ROMA指数在卵巢癌预测和诊断中的应用价值

目的 探讨血清肿瘤标志物人附睾分泌蛋白4（HE4）,CA125和ROMA指数在卵巢癌预测和诊断中的应用价值.方法 用化学发光法检测手术前卵巢癌患者96例和卵巢良性肿瘤患者60例及健康体检者75例的血清中HE4,CA125水平,并计算出卵巢癌风险预测模型（ROMA）值,联合绝经状态预测患卵巢癌的风险性.结果 卵巢癌组HE4,CA125和ROMA值三项指标的中位水平分别为222.2 pmol/L,153.9 U/ml和73.0％,与卵巢良性肿瘤组及正常对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.将HE4和CA125的cut-off值定在140 pmol/L和35 U/ml,绝经前、后妇女ROMA指数cut-off值定为11.4％和29.9％,则HE4,CA125和ROMA指数预测和诊断卵巢癌的灵敏度分别为72.9％,89.6％和87.5％;特异度分别为98.3％,55.0％和90.0％;准确度分别为87.1％,81.9％和90.5％;联合检测HE4,CA125与ROMA指数预测和诊断卵巢癌的灵敏度、特异度分别为97.0％和92.8％.结论 联合检测血清HE4和CA125并计算出ROMA指数有助于预测腹盆腔肿块患者患卵巢癌的风险性,鉴别卵巢肿瘤的良恶性,提高卵巢癌的早期诊断率.     

白血病细胞K562来源的外体对人脐带间充质干细胞作用的研究

目的探讨白血病细胞株(K562)来源的外体(exosomes)对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stemcells,hucMSCs)的影响。方法用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心法从K562细胞的培养上清液中分离并纯化exosomes。透射电子显微镜观察其形态;将exosomes与hucMSCs共育,细胞计数板法检测exosomes对hucMSCs增殖的影响;实时荧光定量PCR检测肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)相关基因FAP、α-SMA和IL-6的表达;western blot检测exosomes标志性蛋白CD9、CD81及CAFs相关蛋白FAP,α-SMA的表达。结果透射电镜下观察分离的exosomes呈椭圆或碟状的囊泡结构,直径在30～100 nm;细胞计数板法检测结果表明,不同浓度的exosomes均能抑制hucMSCs细胞增殖且呈剂量依赖性(P均<0.05);荧光定量PCR结果表明,不同浓度的exosomes作用于hucMSCs,其FAP、α-SMA和IL-6表达量明显增加(P均<0.05);western blot结果表明,exosomes可表达标志性蛋白CD9、CD81,且exosomes作用hucMSCs后FAP、α-SMA蛋白表达量增加。结论 K562细胞来源的exosomes能抑制hucMSCs增殖,且能诱导hucMSCs向CAFs的分化。     

LncSox4在非小细胞肺癌中的表达及生物学作用

目的检测LncSox4在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平变化,初步探讨其生物学作用及机制,为NSCLC诊断和治疗提供新的生物指标。方法采用qRT-PCR检测LncSox4在NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平。通过克隆形成试验、生长曲线分析、Transwell迁移和侵袭试验检测敲除LncSox4对A549细胞生物学功能的影响;采用流式细胞术分析细胞周期情况;采用qRT-PCR和western blot检测上皮-间质转化(EMT)相关基因及蛋白质的表达水平。结果与癌旁对照相比,LncSox4在NSCLC癌组织中呈显著高表达(t=7.109,P0.01);LncSox4基因沉默后,A549细胞生长速度减缓,细胞克隆形成数量减少(P0.01),细胞迁移和侵袭能力降低(P0.01),诱导细胞发生G_1期阻滞(P0.01);LncSox4基因沉默抑制A549细胞中Cyclin D1、c-Myc、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达;LncSox4基因沉默还显著降低EMT相关转录因子Snail、Slug和Twist的表达水平。结论 LncSox4在NSCLC中高表达,通过影响细胞增殖、迁移和侵袭促进NSCLC恶性进展,有望成为NSCLC诊疗新靶点。     

LINC00978在非小细胞肺癌中的临床价值和生物学作用

目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)LINC00978在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达变化及生物学功能,并初步探讨其作用机制。方法采用qRT-PCR检测NSCLC患者肿瘤组织与血清中LINC00978的表达水平。通过CCK-8、平板克隆、Transwell迁移和侵袭实验观察LINC00978敲减和过表达对A549细胞生物学功能的影响。采用流式细胞术、qRT-PCR和western blot探究LINC00978的作用机制。结果 LINC00978在NSCLC患者肿瘤组织(t=2.465,P0.05)和血清(t=8.781,P0.01)中呈高表达。LINC00978敲减抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭能力(P均0.01),诱导G_1期阻滞以及细胞凋亡(P均0.01)。LINC00978敲减下调Cyclin D1和Bcl-2的表达而上调Bax的表达(P均0.05)。此外,LINC00978敲减抑制N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug和Twist的表达而促进E-cadherin的表达(P均0.05)。LINC00978过表达则具有相反作用。结论 LINC00978在NSCLC中高表达,并促进NSCLC发生、发展,具有成为NSCLC诊断及治疗新靶点的潜能。