敬告作者、读者

网织红细胞(Ret)计数多采用煌焦油蓝活体染色后显微镜检查法,但在实际操作中煌焦蓝法计数结果较难判断,误差较大。本实验对煌焦油蓝法进行如下改良,使制作薄片后细胞清晰易于辩认,提高了Ret目视计数的准确性。现报告如下。     

煌焦油蓝改良法计数网织红细胞

网织红细胞 (Ret)计数多采用煌焦油蓝活体染色后显微镜检查法[1] ,但在实际操作中煌焦蓝法计数结果较难判断 ,误差较大。本实验对煌焦油蓝法进行如下改良 ,使制作薄片后细胞清晰易于辩认 ,提高了Ret目视计数的准确性。现报告如下。1　材料与方法1.1　受试对象　本院健康体检者、溶血性贫血患者和再生障碍性贫血患者各 2 0例。1.2　仪器和试剂　CoulterSTKS血液分析仪 ,双目显微镜(Olympus) ;煌焦油蓝溶液 (10 g/L)。1.3　方法　采集受检者静脉血 2ml注入EDTA K2 抗凝管中 ,混匀 ,室温保存。取小试管 5支 ,编号 ,加入 1滴煌焦油蓝溶液…     

2型糖尿病患者血清中4种胰岛自身抗体检测的临床意义

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、酪氨酸磷酸酶抗体(IA2)、抗胰岛细胞抗体(ICA)和抗胰岛素抗体(IAA)4种胰岛自身抗体检测的临床价值。方法:对978例T2DM患者和80例正常对照者血清中4种胰岛自身抗体进行检测、比较。结果:GADA、IAA、IA2和ICA在T2DM患者中的阳性率分别为7.1%、7.2%、3.3%和0.5%,联合检测总阳性率为16.0%,明显高于正常对照组3.8%的阳性率。GADA和IA2两种抗体联合检测阳性率为9.2%。T2DM患者中各抗体阳性较少重叠。结论:GADA和IA2两种抗体联合检测对检出T2DM中的成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)有重要指导价值,以利于对患者尽快采取有效措施保护胰岛B细胞功能,减少进一步的损伤。     

冠心病患者外周血中sCD14水平的研究

目的分析冠心病患者外周血中sCD14的水平及其与单核细胞数量的相关关系,探讨sCD14和动脉粥样硬化之间的关系。方法ELISA法测定269例冠心病患者和24例健康人血清中的sCD14水平,血细胞分析仪检测受试者抗凝全血中单核细胞的数目和比例。结果冠心病患者与健康对照组sCD14分别为:(3 011.4±1431.4)ng/L和(1 943.8±510.2)ng/L,二者结果有显著差异(t=3.7259,P=0.002);冠心病患者血清sCD14水平(Y)与血单核细胞数量(X)和比例(X)均无相关关系,直线回归方程分别为:Y=2 969.8-95.6X,r=-0.026,P=0.668;Y=2 763.6+1581.8X,r=0.060,P=0.329。结论冠心病患者血清sCD14水平显著性增高与血单核细胞数量和比例均无相关关系,可能与单核细胞的质量改变有关。     

TECAN Freedom EVOlyzer全自动酶免分析一体机的应用体会

Freedom EVOlyzer(全自动酶免工作站)是TECAN公司推出的新一代全自动酶免分析工作站。它具备专业的酶免分析平台,可满足不同批处理量的试验要求,实现微孔板ELISA试验的自动化,并且依靠其高品质的组件来确保酶免试验高效、快速、安全地完成[1]。我科于2007     

利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性

目的 研究用戊型肝炎病毒4型(HEV4-)开放读码框架(ORF)2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性.方法 用重组HEV-4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽(459～607位氨基酸)及其截短多肽(472～607位氨基酸)为抗原分别包被ELISA板,用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗-HEV ISM,并用免疫印迹法(Western blot,WB)确认,逆转录(RT)-PCR检测HEV RNA加以比较.结果 WB检测结果显示,戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV ISM仅与459～607多肽二聚体反应,而不与其单体及472～607多肽反应.间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗-HEV IgM均能与459～607多肽反应,而不与472～607多肽反应;69名健康人血清与2种多肽都不反应.117份可疑阳性血清中,5份能同时与2种多肽反应,但450 nm吸光度(A450)值之差小于0.5.WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性;RT-PCR检测HEV RNA为阴性,说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性.结论 ORF2 459～607多肽可有效检测抗-HEV ISM,根据血清与2种多肽反应的A450差异,能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性.     

丙型肝炎病毒抗体联合核酸定量检测对丙型肝炎患者的早期诊断价值研究

目的：探讨在丙型肝炎患者早期诊断中丙型肝炎病毒抗体联合丙型肝炎病毒核酸（HCV RNA）检测的临床价值。方法对116例鼓楼医院住院及门诊丙型肝炎患者采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定HCV RNA、酶联免疫吸附试验（ELISA）和金标法测 HCV抗体、速率法测丙氨酸氨基转移酶（ALT ）。结果116例丙型肝炎患者中,ELISA HCV抗体阳性97例（占83．6％）,HCV RNA阳性85例（占73．3％）,HCV 金标阳性77例（占66．4％）,ALT阳性69例（占59．5％）,HCV抗体和 HCV RNA联合检测总阳性率（指任-指标阳性即为阳性）为100．0％。结论 HCV抗体和HCV RNA联合检测扩大了丙型肝炎检测范围,降低了丙型肝炎的漏诊率,有利于丙型肝炎的早期诊断。     

利用哺乳动物细胞表达外源蛋白的研究进展

利用哺乳动物细胞表达外源蛋白已广泛应用于生物产品的制备。哺乳动物细胞是表达具有天然活性蛋白的最佳宿主 ,且具有易被转染 ,遗传稳定 ,产物可分泌表达 ,并易于纯化和大规模生产等方面的优势。本文对选择载体类型、载体元件 (包括启动子、增强子、选择标记等 )以及在哺乳动物细胞大规模培养过程中培养环境、细胞凋亡的抑制和控制细胞增殖和基因表达的Tet switch系统等方面的进展作一综述 ,以探讨提高该系统表达产量的有效方法 ,更好地应用于生物制品的生产。     

肾衰患者T细胞亚群CD30表达检测及其临床意义

目的 检测慢性肾衰患者(CRF)外周血CD30 T淋巴细胞的表达,以探讨肾衰患者的免疫功能状态.方法 采用流式细胞术检测24例慢性肾衰患者及15例正常对照外周血Th1和Th2的变化.结果 慢性肾衰患者不仅血清中sCD30的表达水平显著增高,外周血循环中CD4 CD30 和CD8 CD30 细胞数亦明显增高,CD4 CD30-和CD8 CD30-细胞均明显下降.但外周血CD4 CD30 和CD8 CD30 细胞的升高与sCD30表达水平的升高并没有明显的相关性,亦未发现CD30 细胞数的增加与急性移植排斥的发生有关.结论 CRF患者CD30 细胞数显著增加,CRF为Th2免疫反应占优势的疾病.CRF患者体内存在着Th2/Te2型细胞的活化和Th1/Th2的失衡.     

不明原因不育症患者生殖免疫检测的分析

目的分析不孕不育患者血清中抗精子抗体、抗弓形虫抗体和抗子宫内膜抗体的发生率.方法应用ELISA法检测813例不孕不育患者的血清.结果各抗体的阳性率较多数文献报道的低,尤其是抗精子抗体和抗弓形虫抗体.女性患者这三种抗体的阳性率均高于男性,在女性中抗子宫内膜抗体阳性率较抗精子抗体和抗弓形虫抗体高.结论不孕不育患者血清中抗精子抗体、抗弓形虫抗体的阳性率较多数文献报道的低,这可能与所选用的试剂盒不同所致.