抗原负载的DC-CIK联合化疗治疗晚期恶性黑色素瘤的临床研究

目的:研究抗原负载的DC-CIK过继免疫疗法联合化疗对晚期恶性黑色素瘤的临床疗效。方法:选取郑州大学第一附属医院收治的60例晚期恶性黑色素瘤患者,28例行抗原负载的DC-CIK联合化疗(A组),32例行单纯化疗(B组),对两组患者治疗后免疫功能、生活质量、中位生存期及无进展生存期进行比较。结果:A组治疗后外周血中CD3+,CD3+/CD4+,CD3+/CD8+,CD4+/CD8+和CD16+/CD56+细胞比值无明显变化,(P>0.05);B组治疗后外周血中T细胞亚群比例较之前显著下降,(P<0.05)。A组行细胞回输结束后,QOL评分改善比例为57.1%,与B组改善率31.2%而言,(P<0.05)比较差异有统计学意义;A组患者的无进展生存期(月)较B组患者长(16vs9,P<0.05),A组与B组患者的总生存期,比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抗原负载的DC-CIK细胞联合化疗治疗晚期恶性黑色素瘤安全有效,在提高患者免疫功能、减轻化疗不良反应、延长无进展生存期和改善患者生活质量方面具有重要作用。     

盐酸川芎嗪在长波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞氧化应激中的作用

目的:探讨盐酸川芎嗪(2,3,5,6-tetramethylpyrazine,TMP)在长波紫外线(Utraviolet A,UVA)诱导人皮肤成纤维细胞(Human dermis fibroblasts,HDF)发生氧化应激反应中的保护作用。方法:原代培养HDF细胞,用不同浓度TMP分别作用未经UVA照射以及经UVA多次照射的HDF细胞24 h,48 h,72 h,CCK-8法检测TMP对HDF细胞体外增殖的作用;流式细胞术检测不同浓度TMP对多次UVA照射后HDF细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)总量的影响。结果:TMP在一定浓度范围内对HDF细胞的体外增殖无明显促进或者毒性作用,但对多次UVA照射后HDF细胞的体外增殖有一定的促进作用,且与浓度有一定的相关性,与UVA对照组比较有统计学意义(P<0.05);TMP可清除UVA多次照射引起的HDF细胞内ROS累积,与UVA对照组比较有统计学差异(P<0.05),其作用效果能达未经UVA照射的水平。结论:盐酸川芎嗪(TMP)对长波紫外线诱导HDF细胞氧化应激有一定的保护作用。     

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠BMSCs向睾丸Leydig细胞分化中的作用研究

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化为睾丸Leydig细胞过程中的作用,探讨BMSCs定向分化为Leydig细胞的适宜方法。方法:将经纯化鉴定的SD大鼠BMSCs第3代细胞接种于6孔板,随机分为对照组(A)、人绒毛膜促性腺素(h CG)+血小板源性生长因子(PDGF)诱导组(B)、h CG+PDGF+5.0 ng/ml b FGF诱导组(C)、h CG+PDGF+10.0 ng/ml b FGF诱导组(D)、h CG+PDGF+20.0 ng/ml b FGF诱导组(E),分别于第7、14、21天进行形态学观察、培养液睾酮水平及3β-羟化类固醇脱氢酶(3β-HSD)免疫荧光检测。结果:B、C、D、E组细胞诱导后体积变大,互相连接呈长梭形或不规则形,贴壁生长,核大、较圆,符合Leydig细胞的特点。随着时间和b FGF浓度的增加,B、C、D、E组睾酮水平逐渐升高,3β-HSD阳性表达细胞逐渐增多,C、D、E组与B组,D、E组与C组间差异有统计学意义(P均<0.05);D、E组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:b FGF在大鼠BMSCs向Leydig细胞体外诱导分化过程中有明显促进作用。     

隐丹参酮对前列腺癌DU145细胞中异黏蛋白表达的影响

目的:探讨隐丹参酮对前列腺癌DU145细胞增殖及细胞凋亡的作用,并初步探讨隐丹参酮对DU145细胞中异黏蛋白(MTDH)表达及下游PI3K/AKT信号通路的影响。方法:四氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度隐丹参酮分别作用DU145细胞24、48、72 h后对细胞的生长抑制作用;原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况;Western印迹检测不同浓度隐丹参酮及作用不同时间对DU145细胞中MTDH蛋白的表达影响;RT-PCR技术检测隐丹参酮分别作用DU145细胞12、24、48 h后细胞中MTDH mRNA的表达情况;Western印迹检测隐丹参酮作用DU145细胞48 h后细胞中MTDH、AKT、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:隐丹参酮能够明显抑制DU145细胞增殖,且抑制效应呈剂量和时间依赖性(P0.05);以10μmol/L隐丹参酮作用DU145细胞24、48、72 h后细胞凋亡率分别为(29.42±4.51)%、(55.07±5.67)%和(70.84±4.66)%,明显高于对照组(3.1±2.48)%(P0.05)。Western印迹和RT-PCR结果显示,隐丹参酮可在转录和翻译水平下调MTDH的表达(P0.05),抑制AKT信号通路和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P0.05)。结论:隐丹参酮可抑制前列腺癌DU145细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能是通过下调MTDH表达,抑制其下游PI3K/AKT信号通路。     

京尼平抑制解偶联蛋白2对激素非依赖性前列腺癌细胞能量代谢的影响

目的:探讨京尼平对线粒体解偶联蛋白2(UCP-2)的抑制作用是否参与到激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3)的能量代谢中。方法:培养PC-3细胞并分别使用40、80、160μmol/L京尼平干预48 h,MTT法检测各组细胞的增殖情况;RT-PCR检测细胞内UCP-2 mRNA的表达水平;可见分光光度法测定细胞内丙酮酸含量和线粒体琥珀酸脱氢酶活性。结果:随着京尼平浓度的升高,PC-3细胞的增殖活性、细胞内UCP-2 mRNA的表达水平、细胞内丙酮酸含量和线粒体琥珀酸脱氢酶活性均逐渐下降,即随着京尼平对UCP-2抑制的增强,细胞增殖活性逐渐降低,细胞内丙酮酸含量和线粒体琥珀酸脱氢酶活性亦随之降低。结论:京尼平可能通过降低细胞内丙酮酸含量和线粒体琥珀酸脱氢酶活性的方式参与激素非依赖性前列腺癌细胞的能量代谢中,参与方式可能与抑制UCP-2有关。     

六味地黄丸降低手机频率电磁辐射对大鼠睾丸组织的损伤

目的:观察六味地黄丸对手机频率电磁辐射雄性大鼠睾丸组织形态学、氧化损伤和细胞凋亡的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常组、辐射组、六味地黄丸组,每组各10只。正常组不辐射,辐射组和六味地黄丸组大鼠每天暴露于900 MHz手机频率辐射4 h共18 d;六味地黄丸组大鼠每日灌胃六味地黄丸悬液(1 ml/100 g体重),其他组大鼠每天灌胃等量纯净水。实验结束后腹腔麻醉取材处死大鼠,分别取睾丸组织固定和冷冻,常规HE染色观察组织形态学变化,比色法检测睾丸组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平,免疫组化法观察睾丸细胞bax,bcl-2蛋白表达的平均光度值。结果:与正常组相比,辐射组大鼠睾丸生精小管细胞结构松散,精母细胞层数减少,内有空洞出现;睾丸组织MDA水平显著升高[(0.36±0.07)μmol/g prot vs(0.25±0.06)μmol/g prot,P0.05],GSH水平显著降低[(42.10±5.08)mg/g prot vs(52.29±4.16)mg/g prot,P0.05];辐射组大鼠睾丸生精细胞bax蛋白表达显著增强(0.91±0.10 vs 0.21±0.01,P0.01),bcl-2蛋白表达显著减弱(0.18±0.07 vs 0.70±0.94,P0.01)。六味地黄丸组大鼠睾丸组织形态学接近正常,与辐射组比较,睾丸组织MDA含量显著降低[(0.30±0.05)μmol/g prot,P0.05],GSH含量无明显变化[(45.34±5.21)mg/g prot,P0.05],睾丸生精细胞bax蛋白表达(0.41±0.05)明显减弱(P0.01),bcl-2蛋白表达(0.27±0.08)明显增强(P0.01)。结论:六味地黄丸可改善手机频率电磁辐射造成的大鼠睾丸组织结构损伤,降低睾丸组织氧化损伤,减少睾丸细胞凋亡。     

肾脏嗜酸性细胞腺瘤1例

患者女 ,5 9岁。查体 :双肾未触及 ,无叩痛 ,血压 15 .0 /11.0ｋＰａ。ＣＴ :右肾上极见直径约 2 .0ｃｍ突向肾外的低密度影 ,边缘较光滑 ,肾周脂肪清晰 ,增强扫描可见均一强化。考虑右肾上极实性占位 ,新生物不除外 (图 1,2 )。ＭＲＩ:右肾上极背侧皮质内见类圆形低Ｔ1、高Ｔ2     

不同来源前列腺基质细胞对前列腺癌细胞IGF-1和p-AKT表达的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子在前列腺癌肿瘤-基质交互作用中的地位及其作用机制.方法 将前列腺癌旁基质细胞和良性前列腺基质细胞分别与前列腺癌细胞系PC-3细胞分隔共培养(并设空白对照),之后检测前列腺癌细胞中IGF-1 mRNA(半定量RT-PCR)和p-AKT蛋白表达(Western blot).结果 与空白对照组相比较,癌旁基质细胞共培养组IGF-1 mRNA表达有所上调、p-AKT蛋白表达有所上调,但无统计学意义(P＞0.05);良性基质细胞共培养组IGF-1 mRNA和p-AKT蛋白表达显著下调(P＜0.05).相关性分析显示各组前列腺癌细胞IGF-1 mRNA与p-AKT蛋白表达呈正相关.结论 良性前列腺基质细胞通过水溶性因子抑制前列腺癌细胞中IGF-1及其下游因子表达,前列腺癌旁基质细胞则丧失了该抑制作用.     

脑星形细胞肿瘤周围区域MRI弥散张量成像研究

目的探讨MRI弥散张量成像(DTI)在确定星形细胞肿瘤边界方面的应用价值。方法低、高级别组脑星形细胞肿瘤各16例和14例行DTI检查,测量肿瘤周围区域表观弥散系数(ADC)和部分各向异性值(FA),比较其均值差异。结果脑星形细胞肿瘤周围区域高、低级别星形细胞肿瘤之间ADC、FA均值的差异有统计学意义(t值分别为-10.02,9.94;P值均&lt;0.0001);FA图在高、低级别组表现不同;6例星形细胞肿瘤周围区域FA图表现异常者,活检证实有肿瘤细胞生长。结论DTI在肿瘤周围区域的测量有助于脑星形细胞肿瘤的分级,对确定肿瘤边界有重大的意义。     

鼠神经生长因子对癫痫幼鼠脑保护作用的研究

目的探讨鼠神经生长因子(m NGF)对癫痫(EP)幼鼠海马金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ(MTⅠ/Ⅱ)和细胞色素C(Cyt C)表达的影响。方法 50只日龄19 d的SD大鼠,随机分为对照组,EP组,m NGF低、中、高剂量组,每组10只。对照组每日予生理盐水注射;EP组腹腔注射戊四氮40 mg/(kg·d),连续21 d;m NGF低、中、高剂量组给予等剂量戊四氮21 d后,分别予m NGF 500 AU/(kg·d)、1 000 AU/(kg·d)、2 000 AU/(kg·d)肌肉注射,连续7 d。观察幼鼠体质量及行为学表现,免疫组织化学法检测海马MTⅠ/Ⅱ和Cyt C阳性细胞表达,实时荧光定量PCR法检测MTⅠ和Cyt C m RNA表达。结果对照组、EP组以及m NGF低、中、高剂量组幼鼠海马的MTⅠ和Cyt C m RNA表达以及MTⅠ/Ⅱ和Cyt C阳性细胞数的差异有统计学意义(F=15.98~105.76,P均=0.000)。两两比较发现,EP组的MTⅠ和Cyt C m RNA表达明显升高,MTⅠ/Ⅱ和Cyt C阳性细胞数明显增多,均分别高于对照组和m NGF低、中、高剂量组,差异有统计学意义(P均0.05);低剂量组的MTⅠ和Cyt C m RNA表达高于中、高剂量组,而MTⅠ/Ⅱ和Cyt C阳性细胞数高于高剂量组,差异有统计学意义(P均0.05);中剂量与高剂量组间MTⅠ和Cyt C m RNA表达以及MTⅠ/Ⅱ和Cyt C阳性细胞数的差异无统计学意义(P均0.05)。结论 MTⅠ/Ⅱ作为一种应激性蛋白,与Cyt C共同参与了癫痫的过程。m NGF对癫痫后的海马有保护作用,且有剂量依赖。