大鼠肝再生终止阶段肝细胞CCAAT增强子结合蛋白αmRNA、微小RNA-144-3p和3种环状RNA的表达和作用

目的 了解大鼠肝再生终止阶段CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα) mRNA、miR-144-3p、rno-LOC100365958_0001、mo-Usp3_0010和mo-AC241873_0010调节肝细胞进入G1期的途径和方法.方法 按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切除(PH)模型,按Smedsrod等方法分离肝细胞,用大规模定量分析技术检测大鼠肝再生中肝细胞竞争性内源RNA(ceRNA)表达的变化,用Cytoscape 3.2软件构建ceRNA的相互作用网络,用ceRNA综合分析等方法解析它们表达的相关性和作用相关性.结果 PH后6h和72 h时,CEBPα mRNA的比值为1.12±0.27和2.52±0.15,miR-144-3p为2.97±0.81和0.99±0.36,rno-LOC 100365958_0001为0.16±0.05和6.78±0.62,rno-Usp3_0010为0.13±0.01和7.61±0.69,rno-AC241873_0010为0.09±0.02和7.53±0.69.CEBPα促进的G1期相关基因细胞周期蛋白G2(CCNG2)为0.25±0.06和1.10±0.22,抑制的G1期相关基因ETS变异转录因子6(ETV6)为2.22±0.68和0.99±0.27,MAPK14为2.01±0.32和0.85±0.11,信号转导子和转录激活因子3(STAT3)为2.88±0.24和1.08±0.07,肿瘤坏死因子(TNF)为2.29±0.51和0.86±0.51.CEBPα促进的G0期相关基因G0/G2期开关2(G0S2)为0.64±0.08和4.71±0.91,磷脂酶A2-IVA(PLA2G4A)为0.42±0.13和2.83±0.62.结论 PH后6h时,rno-LOC 100365958_0001、rno-Usp3_0010、rno-AC241873_0010和miR-144-3p的相互作用加强了后者对CEBPα mRNA的抑制,不利于CEBPα形成,有利于CEBPα抑制的G1期相关基因表达和肝细胞处于G1期.相反,PH后72 h时,CEBPα mRNA上调,有利于CEBPα促进G0期相关基因表达和肝细胞处于G0期.     

SP联合CBL在骨外科临床实践教学中的应用研究

目的探讨标准化病人(standard patient,SP)结合案例式教学(case-based learning,CBL)在骨外科临床实践教学中的应用效果。方法选取2018—2019学年于我院骨科实习的南京医科大学2014级临床医学专业学生50人作为研究对象。随机将其均分为试验组和对照组两组,每组各25人。试验组采用SP+CBL相结合教学方法;对照组采用传统CBL授课方法。在教学结束后,请所有参与试验的学生对课程进行评价,并从理论和操作两方面对学生进行考核。结果两组学生的理论考试成绩无明显差异,不具统计学意义(P>0.05)。但试验组学生的临床技能操作考核成绩高于对照组(P<0.01)。试验组学生对SP+CBL教学在激发学习兴趣、增强解决实际问题能力及提高骨外科实践教学质量等方面的满意度显著高于对照组(P<0.01)。结论SP+CBL教学优于传统CBL教学,可以显著提高学习的积极性,有助于提高骨外科临床实践教学的效果。     

EGCG和黄芩苷协同mTOR依赖性抑制小鼠牙周炎巨噬细胞M1向极化

目的:初步探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和黄芩苷(baicalin)是否有协同治疗小鼠牙周炎的作用及其机制.方法:将C57/BL6小鼠随机分为空白对照组、牙周炎组、EGCG组、EGCG+黄芩苷组.苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察牙周组织学改变和牙槽骨丧失量(alveolar bone loss,ABL);抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察破骨细胞数目;免疫组织化学法观察总巨噬细胞、各亚型巨噬细胞数和哺乳动物雷帕霉素靶向蛋白(mTOR)的表达.结果:丝线结扎联合局部接种牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)成功诱导小鼠实验性牙周炎.单独使用EGCG或联合使用黄芩苷减轻牙周组织炎症,减少破骨细胞数量和牙槽骨吸收量,减少牙周组织总巨噬细胞、M1型巨噬细胞数量及M1/M2比例,抑制牙周组织mTOR的表达.且EGCG和黄芩苷联合使用比单独使用EGCG效果好.结论:EGCG和黄芩苷可以协同治疗小鼠牙周炎,可能与下调mTOR信号通路抑制巨噬细胞M1向极化有关.     

化浊解毒活血通络法治疗脑梗死浊瘀毒损证疗效及对患者神经元特异性烯醇化酶及S100蛋白的影响

目的:研究化浊解毒活血通络法治疗脑梗死浊瘀毒损证患者疗效及对神经元特异性烯醇化酶(NSE)及S100蛋白的影响。方法:选择210例脑梗死浊瘀毒损证患者作为研究对象,利用随机数表法将其分为观察组和对照组,每组105例。对照组采用常规西医治疗,观察组在西医常规治疗的基础上使用化浊解毒活血通络法进行治疗。对比分析两组患者治疗的总有效率、日常生活活动能力(ADL)评分、Fugl-Meyer运动功能评分和血清中NSE、S100蛋白水平,另外观察治疗期间不良反应发生率。结果:观察组的总有效率94.29%高于对照组74.29%,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后2周和治疗后4周ADL评分及Fugl-Meyer运动功能评分有所提高,与治疗前比较差异有统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,观察组治疗后2周、治疗后4周ADL评分及Fugl-Meyer运动功能评分更高,差异有统计学意义(均P<0.05)。两组治疗后2周和治疗后4周血清NSE和S100蛋白水平较治疗前有所下降,差异有统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,观察组治疗后2周、治疗后4周NSE和S100蛋白水平更低,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组不良反应发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:化浊解毒活血通络法治疗脑梗死浊瘀毒损证疗效较好,可改善患者日常生活能力和运动能力,抑制NSE和S100蛋白表达水平,且安全性较好。     

正畸力调控牙周膜干细胞成骨分化的动物实验研究

目的 研究不同正畸力值对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)分化的作用及机制.方法 分别用50 g、150 g力值建立大鼠牙齿移动模型,加力7d后分离培养PDLSCs,检测其生物学功能和分子信号通路.结果 相比对照组,加力7d后,50 g力值组大鼠第一磨牙近中移动,150 g力值组移动距离大于50 g力值组.分离培养不同组PDLSCs,50 g力值组PDLSCs成骨和成脂分化能力均高于对照组;150 g力值组PDLSCs成骨分化能力小于对照组,而成脂分化能力大于对照组.机制研究显示50 g力值组PDLSCs的active-β-catenin表达水平高于对照组,而150 g力值组PDLSCs的active-β-catenin表达水平低于对照组.结论 不同正畸力值对PDLSCs作用不同,50 g力值促进PDLSCs成骨和成脂分化,而150 g力值抑制其成骨分化.     

降钙素原、超敏C-反应蛋白以及白介素-6对重型颅脑损伤患者发生肺部感染的诊断价值分析

目的:分析降钙素原(Procalcitonin,PCT)、超敏C-反应蛋白(High sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)以及白介素-6(Interleukin-6,IL-6)对重型颅脑损伤患者发生肺部感染的诊断价值.方法:选取本院2019年4月至2020年4月收治的66例重型颅脑损伤患者作为研究对象,按照是否合并肺部感染分为观察组和对照组,各33例.对比入院3 d中两组患者血清PCT、hs-CRP和IL-6表达水平,分析观察组患者预后情况与血清PCT、hs-CRP和IL-6表达水平的关系,并评价PCT、hs-CRP、IL-6对重型颅脑损伤患者合并肺部感染的诊断价值.结果:入院3d内,对照组血清PCT、hs-CRP、IL-6表达水平无明显变化(P﹥0.05),观察组PCT、hs-CRP、IL-6表达水平逐渐上升,且明显高于对照组(P﹤0.05);观察组患者预后不良者血清PCT、hs-CRP、IL-6表达水平明显高于预后良好者(P﹤0.05);PCT、hs-CRP和IL-6联合诊断重型颅脑损伤患者发生肺部感染的灵敏度、特异度和准确度明显高于单一诊断(P﹤0.05).结论:重型颅脑损伤患者发生肺部感染时血清中PCT、hs-CRP、IL-6水平明显升高,三者联合检测可提高其临床诊断价值,早期进行动态监测可了解患者的感染情况.     

细胞外基质PDMS硬度对牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响

目的: 研究细胞外基质聚二甲基硅氧烷（polydimethylsiloxane,PDMS）硬度对牙髓干细胞（DPSCs）增殖和成骨分化的影响及其机制。方法: 收集南京医科大学附属常州市第二人民医院因正畸而拔除的前磨牙作为实验材料,分离、培养DPSCs,制作PDMS基质。根据不同硬度,将PDMS基质分为A组（基料/固化剂=10∶1,硬度135 kPa）、B组（基料/固化剂= 20∶1,硬度54 kPa）和C组（基料/固化剂= 30∶1,硬度16 kPa）,另设不含PDMS基质的对照组,在各组基质上培养DPSCs细胞,采用CCK-8法检测各组DPSCs细胞培养至1、3、5、7天时的增殖率,采用茜素红染色鉴定各组DPSCs细胞成骨效果,采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组DPSCs细胞中骨钙素（OCN）、RUNX2、细胞外因子1（Wnt1）、β连环素（β-catenin）蛋白表达量。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 茜素红染色结果显示,A组DPSCs细胞形态发生明显变化,排列具有明显方向性,由多角形、梭形逐渐变为方形,出现钙化小结节,B组钙化小结节明显少于A组,C组钙化小结节明显少于B组,对照组钙化小结节极少。B组DPSCs细胞各时刻增殖率及OCN、RUNX2、Wnt1、β-catenin蛋白表达量均显著低于A组（P<0.05）,C组DPSCs细胞各时刻增殖率及OCN、RUNX2、Wnt1、β-catenin蛋白表达量显著低于B组（P<0.05）,对照组DPSCs细胞各时刻增殖率及OCN、RUNX2、Wnt1、β-catenin蛋白表达量显著低于C组（P<0.05）。结论: 较硬细胞外基质可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,促进牙髓干细胞增殖和成骨分化,这可为牙周组织工程新材料的研发提供理论基础。     

hsa_circ_0003188对人骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响

目的:探讨hsa_circ_0003188对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成骨分化能力的影响。方法:Human Circular RNA Micro-array Version 2.0芯片检测正常环境与炎性环境(10 ng/mL TNF-α)培养的hBMSCs差异表达circRNAs,并筛选出目的circRNA-hsa_circ_0003188;构建hsa_circ_0003188过表达慢病毒,转染hBMSCs并成骨诱导培养后,通过碱性磷酸酶染色等方法检测hsa_circ_0003188高表达对BMSCs成骨分化能力的影响;利用TargetScan等生物学软件预测hsa_circ_0003188的生物学功能。结果:hsa_circ_0003188在炎性环境hBMSCs中高表达(P<0.05)并抑制其成骨分化;生物学软件预测出hsa_circ_0003188的ceRNA机制。结论:hsa_circ_0003188抑制hBMSCs成骨分化能力,可能成为hBMSCs在骨再生过程中的调控新靶点。     

低强度脉冲超声在正畸骨改建中的研究进展

低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)是强度介于30～100 mW/cm2、频率低于3 MHz的脉冲式超声波,其广泛参与调控成骨细胞、牙周膜细胞及牙骨质细胞的增殖、分化等多项生理功能,最终发挥加快牙移动速度、保护牙根组织的效应.本文就近年来LIPUS对正畸中骨改建调控作用的研究进展进行综述,以进一步加深对LIPUS生物学功能的理解.     

H3.3 K36M突变蛋白表达在软骨母细胞瘤诊断及鉴别诊断中的价值

目的探讨组蛋白H3.3的36位赖氨酸至甲硫氨酸(K36M)突变蛋白表达在软骨母细胞瘤中的诊断及鉴别诊断价值。方法收集2016年1月至2019年12月就诊于北京积水潭医院的软骨母细胞瘤及其他骨肿瘤病例,光镜观察并结合临床影像学明确诊断。EnVision法免疫组织化学检测H3.3 K36M突变蛋白的表达。结果骨肿瘤共计196例:软骨母细胞瘤68例(包括6例复发病例),骨巨细胞瘤59例,内生软骨瘤9例,透明细胞软骨肉瘤3例,软骨肉瘤Ⅰ级9例,软骨肉瘤Ⅱ级9例,软骨肉瘤Ⅲ级2例,去分化软骨肉瘤11例,软骨黏液样纤维瘤6例,动脉瘤样骨囊肿9例,非骨化性纤维瘤9例,成软骨为主型骨肉瘤2例。免疫组织化学显示95.6%(65/68)的软骨母细胞瘤呈H3.3 K36M突变蛋白阳性表达,其余128例皆为阴性。诊断的灵敏度为95.6%,特异度为100.0%。结论免疫组织化学H3.3 K36M突变蛋白检测在软骨母细胞瘤中显示较高的特异度和灵敏度,在临床实践中具有较高的诊断及鉴别诊断价值。