滑膜间充质干细胞软骨分化能力的实验研究

目的 探讨滑膜间充质干细胞软骨分化能力.方法 无菌状态下获取兔颞下颌关节滑膜组织,酶消化法进行滑膜间充质干细胞原代培养,并进行传代扩增.第3代细胞消化后离心成为细胞团块,用软骨诱导液培养,并以鸡尾酒法添加生长因子人重组转化生长因子β1(recombined human transforming growth factorβ1,rhTGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF),即前3天2种生长因子共同使用,之后只用rhTGF-β1继续培养18d.细胞团块培养21 d后,免疫组织化学染色检测Ⅱ型胶原的表达.细胞团块培养在普通培养基中不添加rhTGF-β1和bFGF作为对照组.结果 滑膜间充质干细胞经过传代培养后,成为形态一致的梭形细胞;细胞团块经软骨诱导液、rhTGF-β1和bFGF培养后,免疫组织化学染色可见Ⅱ型胶原在细胞之间的细胞外基质中明显显色,并且细胞团块的周边要比中央浓染;原本二维培养状态下的梭形滑膜间充质干细胞变为球形的软骨样细胞形态.结论 滑膜间充质干细胞具有很强的成软骨能力,可以作为髁突软骨组织工程的种子细胞.     

乳腺导管浸润癌组织中促肝细胞再生磷酸酶蛋白的表达

目的:探讨乳腺导管浸润癌组织中促肝细胞再生磷酸酶(PRL-3)的表达及其与临床病理特征之间的关系.方法:采用免疫组化SP法检测60例乳腺浸润性导管癌、6例乳腺正常组织、15例轻中度和20例重度不典型增生组织中PRL-3的表达及其与乳腺浸润性导管痛临床病理特征之间的关系.结果:PRL-3蛋白在乳腺正常组织、乳腺导管轻中度不典型增生、重度不典型增生和乳腺导管浸润癌组织中的阳性表达率分别为0、46.7%、80.0%和95.0%,4组间比较,差异有统计学意义(P=0.008);组间两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).乳腺浸润性导管癌中PRL-3蛋白与淋巴结转移和组织学分级有关(χ2=6.494,P=0.011和0.008).结论:PRL-3蛋白可能与乳腺浸润性导管癌的发生发展及转移有关.     

早产儿血清碱性磷酸酶、钙、磷的代谢特点

目的 了解早产儿碱性磷酸酶(Alp)、钙(Ca)、磷(P)的代谢特点,为合理补充Ca、P及预防代谢性骨病提供依据.方法 将120例早产儿作为观察组,60例同期出生的健康足月儿作为对照组,检测生后72h内血清Alp、Ca、P的含量.将现察组与对照组进行比较,在观察组内对不同性别、不同出生体质量、不同胎龄间早产儿进行比较.结果 ①观察组血清Alp、P的含量较对照组高(P均<0.01),血清Ca的含量较对照组低(P<0.05);②观察组内不同性别间早产儿血清Alp、Ca、P的舍量无统计学差异(P均>0.05),血清Alp、P的含量随出生体质量的增加而降低r=-0.83,r=-0.65,P均<0.01),而血清Ca的含量随出生体质量的增加而升高(r=0.67,P<0.05).血清Alp、P的含量与胎龄呈负相关(r=-0.80,r=-0.64,P均<0.01),而血清Ca的含量与胎龄呈正相关(r=0.52,P<0.01).结论 出生体质量和胎龄是影响早产儿血清Alp、Ca、P含量的重要因素,通过对早产儿血清Alp、Ca、P含量的检测,可以合理补充Ca、P及预防代谢性骨病.     

重组人表皮生长因子衍生物对准分子激光上皮下角膜磨镶术后角膜上皮修复临床观察

目的 准分子激光上皮下角膜磨镶术(LASEK)后早期使用重组牛碱性成纤维细胞人生长因子(金因舒rhEGF),通过临床观察术后反应,评价外源兴表皮生长因子促进角膜上皮修复的作用.方法 采用随机、双盲、对照的原则,治疗组50例(50眼)均为左眼,采用金因舒+0.1%氟美瞳+0.3%泰利必妥,对照组50例(50眼)均为左眼,单用0.1%氟美瞳+0.3%泰利必.术后观察疼痛、畏光、流泪、异物感、球结膜充血、角膜上皮混浊6项指标.按无、轻、中、重分别记为0、1、2、3分.术后1、2、3、5 d观察术后反应并评分,术后1、2、3周检查视力,术后1、2、3个月观察角膜雾状混浊(Haze)发生情况.第5天开始根据指征尽早取镜.结果 术后第1天和第2天治疗组术后反应较轻,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗组平均取镜时间为5.5 d,对照组为6.12 d,治疗组早于对照组.两组恢复最佳视力的时间比较差异无统计学意义,术后Haze的发生率和严重程度比较差异无统计学意义.结论 重组人表皮生长因子衍生物能减轻术后早期反应,缩短术后绷带镜片的佩戴时间,安全、无不良反应,有助于LASEK术后角膜上皮化学性和机械性损伤的修复. Abstract： Objective To evaluate the effect of ectogenous recombinant human growth factor eye drops(rhEGF) on cutting section corncal epithelium recovery after laser epithelial keratomileusis(LASEK)by observing postoperative inflammation clinically. Methods A randomized, double-blindly,comparison group controlled study enrolled 50 pstients(50eyes,all left eyes) for rhEGF group with therapy of rhEGF+0.1% fluorometholone+0.3% ofloxacin and 50 patients(50eyes,all left eyes) for controlled group with therapy of 0.1% florometholone+0.3% ofloxacin.Observeing pain,photophobia, tearing, foreign body sensation, conjunctival congest and corneal epithelial opacity were observed at 1, 2, 3 and 5 days postoperatively and scored as 0, 1, 2 or 3 respectively according to negative, slight, moderate or severe degree. Visual acuity was measured at 1, 2 and 3 weeks postoperatively. The corneal haze was exanined at 1,2 and 3months postoperatively. The band contact lenses were removed as early as possible from 5 days postoperatively. Results Postoperative inflammation of rhEGF group was significantly slighter than comparison group at 1 and 2 days postoperatively (P<0.05) Average time of removing contact lens was 5.5 days and 6.12 days for treated two group respectively. There was no difference on the time of achieving best visual acuity and haze between two groups. Conclusions rhEGF may relieve early inflammation postoperatively after LASEK and shorten the time of wearing contact lenses, beneficial to epithelium recovery from chemical and machinical injury.     

解脲支原体感染与精浆生化指标相关性的研究

目的:探讨不育病人解脲支原体感染与精浆生化指标的相关性。方法:对44例解脲支原体感染者和40例未感染者的精浆α-葡糖苷酶、精浆酸性磷酸酶、精浆果糖的结果进行比较,发现感染者和未感染者有显著差异(P<0.01)。结论:解脲支原体感染引起精浆生化指标发生异常改变。     

bFGF在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在非小细胞肺癌中的表达及意义,为肺癌的生物学治疗提供理论依据.方法 应用免疫组化SP法检测bFGF在60例非小细胞肺癌石蜡组织标本中的表达水平并分析其与肺癌临床病理特征的关系.结果 bFGF在肿瘤细胞的阳性表达率明显高于癌旁正常肺组织(P<0.05).肺癌组织中,bFGF的表达强度与临床分期及有无淋巴结转移有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、病理类型及组织学分级无关(P>0.05).结论 bFGF在肺癌的发生、发展过程中起不同程度的作用,其检测可为肺癌的诊断、治疗提供帮助.     

含氧化钛纳米管的微米纳米梯度形貌对成骨细胞功能的影响

我们通过简单的酸蚀加阳极氧化的方法制备了含氧化钛纳米管的微米纳米梯度形貌以模拟骨组织的梯度结构采用大鼠原代成骨细胞体外培养的方法来评价它们的生物活性。通过酸蚀方法制备的微米形貌对成骨细胞功能的影响作用不一致。虽然早期细胞黏附和成骨相关功能基因的表达受到明显促进,但其他的细胞功能如增殖、细胞内总蛋白合成及碱性磷酸酶活性、胶原分泌和细胞外基质矿化都受到明显抑制。     

重组大鼠胰岛素样生长因子-1聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物缓释微球对2型糖尿病GK大鼠种植体周围骨形成的影响

目的 评估重组大鼠胰岛素样生长因子-1(rrIGF-1)聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物(PLGA)缓释微球对2型糖尿病GK大鼠种植体周围骨形成的影响.方法 将20只雄性GK大鼠进行糖尿病造模成功后随机分为2组,分别给予加载包裹rrIGF-1的PLGA缓释微球(治疗组,n=10)和加载包裹与rrIGF-1等量安慰剂的PLGA缓释微球(糖尿病组,n=10)处理,再以10只未做处理的SD大鼠作为对照组.在所有大鼠胫骨内植人种植体,治疗组和糖尿病组大鼠同时分别加载等量相应种类的PLGA缓释微球.术后4、5、8周在种植体周围局部采血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清骨钙素(OCN)、骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)及Ⅰ型前胶原羧基前肽(PICP)含量.结果 种植体植入术后4周,糖尿病组和治疗组的血清OCN、B-ALP和PICP水平均明显低于对照组(P均＜0.05);术后5周,糖尿病组的OCN和B-ALP水平明显低于对照组和治疗组(P均＜0.05),糖尿病组和治疗组的PICP水平也均明显低于对照组(P＜0.05),治疗组的OCN水平明显高于术后4周(P＜0.05),对照组的PICP水平则明显低于术后4周(P＜0.05);术后8周,糖尿病组大鼠的OCN和B-ALP水平明显低于对照组和治疗组(P均＜0.05),糖尿病组和治疗组大鼠的血清PICP水平均明显低于对照组(P均＜0.05).结论 rrIGF-1 PLGA缓释微球局部加载可促进GK大鼠种植体周围骨形成.     

不同剂量碱性成纤维细胞因子对人类胚胎干细胞生长、凋亡和DNA完整性的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)浓度对人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)特性的影响.方法 建立化学限定性hESCs培养体系,以有饲养细胞培养体系作为参照,比较4、40 ng/ml和100 ng/ml bFGF对hESCs多能性标记、细胞周期、细胞凋亡和DNA完整性的影响.结果 ①低浓度bFGF(4 ng/ml)足以维持hESCs在化学限定性培养基(基础培养基DMEM/F12,N2,B27, 简称 NB 体系)中培养;②bFGF可以抑制hESCs细胞凋亡,且具有剂量依赖性,而对hESCs细胞周期没有影响;③bFGF有助于hESCs DNA完整性维持,在NB体系加入4 ng/ml bFGF时,hESCs在DNA水平上存在75个异常区域,而在加入40 ng/ml bFGF时,只存在1个异常区域.结论 高剂量bFGF有助于hESCs体外快速扩增和hESCs DNA完整性维持.提高bFGF浓度为hESCs体外培养所必需.     

子宫上皮样滋养细胞肿瘤临床病理分析

为了探讨子宫上皮样滋养细胞肿瘤（ETT）的临床病理特征、鉴别诊断及预后相关因素,浙江大学医学院附属妇产医院病理科梁云等回顾了该院2000—2007年间共5例ETT病例,分析其临床病理及CK18、P63、α-抑制素、人绒毛膜促性腺激素（HCG）、人胎盘泌乳素（HPL）、胎盘碱性磷酸酶（PLAP）、Ki-67等免疫表型特征。对所有病例随访11—50个月,