莲必治注射液联合头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗老年肺炎的临床研究

目的探讨莲必治注射液联合头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗老年肺炎患者的有效性和安全性。方法选取2016年1月—2017年12月石家庄市第三医院收治的老年肺炎患者110例,随机分成对照组和治疗组,每组各55例。对照组静脉滴注注射用头孢曲松钠他唑巴坦钠,3 g加入250 mL生理盐水,2次/d;治疗组在对照组基础上静脉滴注莲必治注射液,10 mL加入250m L生理盐水,2次/d。两组患者均连续治疗14d。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者临床体征消失时间和血清学指标。结果治疗后,对照组和治疗组临床有效率分别为80.00%和94.55%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组患者咳嗽消失时间、退热时间、肺啰音消失时间及X线胸片炎症完全吸收时间均要显著早短于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者血清C-反应蛋白(CRP)、可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)和脑钠肽(BNP)水平显著降低(P0.05),且治疗组患者CRP、sTREM-1和BNP水平较对照组降低更明显,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论莲必治注射液联合头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗老年肺炎疗效好、安全性高,可显著改善患者血清学生化指标,具有一定的临床推广应用价值。     

丙酮酸乙酯对宫内感染致脑损伤新生仔鼠AQP4表达和脑组织超微结构的影响

目的 研究丙酮酸乙酯(EP)对宫内感染致新生仔鼠脑损伤水通道蛋白4(AQP4)表达和脑组织超微结构的影响。方法 选取36只孕鼠随机分为 LPS组(n=12)、EP组(n=12)、NS组(n=12)。LPS组:孕17 d、18 d连续两天腹腔注射 LPS 380 μg/kg;EP组:同法制备孕鼠宫内感染模型,并在注射LPS后立即给予孕鼠腹腔注射 EP 40 mg/kg;NS组:腹腔注射同等量生理盐水。对孕鼠分娩后的胎盘和新生仔鼠脑组织进行HE染色观察宫内感染和脑损伤情况。剔除早产鼠,各组随机选取新生仔鼠36只,于生后12、24、48 h对脑组织进行免疫组织化学染色,观察AQP4的表达;电镜观察脑组织超微结构的变化。结果 与NS组比较,LPS组孕鼠胎盘组织可见大量的炎性细胞浸润,有宫内感染,LPS组仔鼠HE染色提示有脑损伤;与LPS组相比较,EP组仔鼠出生后24 h、48 h脑组织AQP4的表达量均低于LPS组(P<0.05);电镜下LPS组神经细胞超微结构显示损伤严重。结论 丙酮酸乙酯对宫内感染致脑损伤新生仔鼠的脑组织具有一定的神经保护作用,可能与AQP4表达水平有关。     

干扰素调节因子4在Toll样受体3介导的小鼠流产过程中的作用及机制

目的研究干扰素调节因子4(IRF-4)在Toll样受体3(TLR-3)介导的小鼠流产过程中的作用机制。方法选取SPF级近交系Balb/C雌鼠、C57BL/6雄鼠,将孕鼠随机分为TLR-3抗体阻断组、CXCL12抗体阻断组、血清对照组,于孕4.5、5.5、6.5 d连续腹腔注射TLR-3抗体/CXCL12抗体/血清,孕6.5、7.5 d连续腹腔注射多聚次黄苷酸胞苷酸Poly(I∶C)或PBS。孕9.5、13.5、17.5 d时处死小鼠,计算胚胎吸收率,收集外周血、脾脏、子宫胎盘组织。利用小鼠淋巴细胞分离液分离外周血、脾脏、子宫胎盘来源的小鼠淋巴细胞,实时PCR法检测外周血、子宫胎盘来源的小鼠淋巴细胞中IRF-4 mRNA转录水平,流式细胞法检测外周血、脾脏来源的小鼠淋巴细胞中Th17细胞比例及子宫胎盘淋巴细胞中CXCR4阳性细胞比例,免疫组化法检测子宫胎盘组织中IRF-4蛋白表达水平。结果在外周血淋巴细胞中,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平在孕9.5、13.5、17.5 d时显著高于对照组(P0.05),且孕13.5 d时两组转录水平差异达到最高;给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平与对照组相比无明显差异(P=0.867、0.931、0.953)。在子宫胎盘来源的淋巴细胞中,IRF-4 mRNA转录水平的变化趋势与PBMCs类似,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平在孕9.5、13.5 d时显著高于对照组(P0.01),在孕17.5 d时无显著差异(P=0.504);给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4 mRNA转录水平与对照组相比无明显差异(P=0.081、0.219、0.178)。流式细胞法检测Th17细胞(CD4阳性、IL-17A阳性)比例。在PBMCs中,三个孕期时间点时,Poly(I∶C)诱导流产组的CD4阳性、IL-17A阳性比例显著高于对照组(P0.05);TLR-3抗体预先阻断后,CD4阳性IL-17A阳性比例在两组中无明显差异(P=0.612、0.320、0.167)。在脾脏淋巴细胞中,Poly(I∶C)诱导流产组的CD4阳性IL-17A阳性比例在孕9.5、13.5、17.5 d时显著高于对照组(P0.05),TLR-3抗体预先阻断后,差异无统计学意义(P=0.109、0.413、0.631)。流式细胞法检测UMGCs中的CXCR4阳性细胞比例。CXCR4阳性细胞比例在IRF-4阳性细胞中显著高于IRF-4阴性细胞(P0.01),Poly(I∶C)注射可显著提高IRF-4阳性及IRF-4阴性细胞中CXCR4的表达;预先给予CXCL12(CXCR4配体)抗体阻断,无论是在IRF-4阳性或IRF-4阴性细胞中,Poly(I∶C)诱导组与对照组中CXCR4的表达无明显差异(P=0.122)。免疫组化法检测子宫胎盘组织中IRF-4蛋白表达水平,Poly(I∶C)诱导流产组的IRF-4免疫组化光密度值在孕9.5、13.5 d时显著高于对照组(P0.05),孕17.5 d时无明显差异(P=0.403);给予预先腹腔连续注射TLR-3抗体后,两组之间的表达差异无统计学意义(P=0.664、0.205、0.486)。结论 IRF-4在此流产过程中与对照组相比表达有差异,包括mRNA转录水平、蛋白水平均有显著差异。TLR-3抗体预先阻断小鼠体内TLR-3后,IRF-4转录及蛋白表达水平差异消失。     

CA19-9、HE4、CEA联合超声造影诊断卵巢癌的价值

目的分析糖类抗原19-9(CA19-9)、人附睾分泌蛋白4(HE4)、癌胚抗原(CEA)联合超声造影诊断早期卵巢癌的临床价值,以期提高卵巢癌早期诊断灵敏度和准确率,降低漏诊率。方法选取2016年1月-2017年12月巴中市中心医院及贵州医科大学附属医院行妇科检查疑似卵巢癌的患者248例作为研究对象,所有患者均取静脉血检测血清肿瘤标志物CA19-9、HE4、CEA水平,均行盆腔超声造影检查,均行手术探查或者手术治疗,以手术术中所见及病理诊断作为卵巢癌诊断金标准,计算血清肿瘤标志物、超声造影检查单项、不同指标组合诊断早期卵巢癌的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度。结果经术中探查及术后病理诊断,248例疑似卵巢癌患者中42例确诊为早期卵巢癌,发病率为16.94%。卵巢癌患者CA19-9、HE4、CEA均明显高于非卵巢癌患者(P0.05)。CA19-9诊断有87例为卵巢癌阳性,HE4诊断69例阳性,CEA诊断有78例阳性,超声造影诊断有41例卵巢癌阳性,CA19-9、HE4、CEA联合诊断40例阳性,超声造影联合3种血清肿瘤标志物诊断卵巢癌31例。超声造影联合CA19-9、HE4、CEA诊断卵巢癌的特异度、准确度、阳性预测值均明显高于血清肿瘤标志物和超声造影单独诊断,灵敏度均低于CEA、HE4、CA19-9、超声造影单一诊断。结论血清肿瘤标志物CA19-9、HE4、CEA联合盆腔超声造影可有效提高患者诊断特异度和准确率,为患者治疗方案的选择提供有效数据,对提升早期卵巢癌患者预后水平具有重要意义。     

基于UFLC-IT-TOF-MS技术的牡荆子中2个木脂素在大鼠体内代谢研究

目的对牡荆子中2个木脂素单体化合物6-羟基-4-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-7-甲氧基-3,4-二氢-2-萘醛(VB-1)和vitedoin A(VB-2)在大鼠体内的代谢情况进行研究。方法采用超快速液相色谱-离子阱飞行时间质谱(UFLC-IT-TOF-MS)技术,鉴定大鼠分别ig给予2个木脂素单体化合物后,粪便、尿液、胆汁、血浆中的代谢产物。结果发现并确证了2个木脂素原型及其11个代谢产物在大鼠体内的存在。通过代谢产物鉴定分析了其主要代谢途径,发现在大鼠体内这2个木脂素成分发生了葡萄糖醛酸化、硫酸化、羟化、羟化硫酸化、还原葡萄糖醛酸化和还原硫酸化等代谢反应。结论通过对2个木脂素单体化合物代谢产物的分析,基本阐明了其在体内的代谢过程,为进一步的药理活性及其机制研究提供了依据。     

海南狗牙花枝叶中1个新的8-O-4′-木脂素

目的研究海南狗牙花Ervatamia hainanensis枝叶的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及制备型HPLC等柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱学数据鉴定化合物结构。结果从海南狗牙花枝叶的95%乙醇提取物中分离得到了4个木脂素类成分,分别鉴定为threo-7-O-ethylguaiacylglycerol-8-O-4′-(coniferyl alcohol)ether(1)、threoguaiacylglycerol-8-O-4′-(coniferyl alcohol)ether(2)、erythro-guaiacylglycerol-8-O-4′-(coniferyl alcohol)ether(3)、去氢二松柏醇(4)。结论化合物1为1个新的8-O-4′-木脂素类成分,命名为海南狗牙花脂素A(1);化合物2~4为首次从狗牙花属植物中分离得到。     

无标记细胞检测方法揭示舒血宁注射液对血栓素A2受体亚型的选择性抑制作用

目的:构建人源血栓素A2受体(Thromboxane A2 receptor,TXR)Label-free细胞检测体系,并采用以检测中药注射剂舒血宁注射液及其活性组分对该受体的作用。方法:构建TXRα、TXRβ表达质粒,及稳定表达TXRα或TXRβ的HEK293细胞系;通过Label-free细胞检测方法,使用TXR特异性激动剂U46619及拮抗剂SQ-29548对TXRα-HEK293和TXRβ-HEK293稳定转染细胞系进行功能鉴定,并利用该体系辨识舒血宁注射液及其总黄酮、总内酯组分对TXRα和TXRβ的作用。结果:基因测序结果表明,成功构建TXRα、TXRβ表达质粒;PCR结果表明,成功建立了TXRα-HEK293和TXRβ-HEK293稳定转染细胞系;Label-free细胞检测结果显示U46619和SQ-29548能够分别特异性激活和拮抗受体,表明TXRα和TXRβLabel-free细胞检测体系构建成功;Label-free细胞检测结果表明舒血宁注射液能够抑制TXRβ,对TXRα无影响。结论:成功建立TXRα和TXRβLabel-free细胞检测体系,并发现舒血宁注射液能够选择性作用于TXRβ,提示舒血宁注射液可通过抑制TXRβ发挥其药理活性。     

人参皂甙Rb1对ATP诱导大鼠海马脑片毒性损伤的影响

目的:研究人参皂甙Rb1对ATP诱导大鼠海马脑片毒性损伤的影响及其作用机制。方法:采用SD大鼠离体海马脑片模型,随机分为正常对照组、人参皂甙Rb1对照组、ATP损伤组、人参皂甙Rb1(20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L)组、亮蓝G(BBG)组、亮蓝G+人参皂甙Rb1组、2'-3'-O-(4-苯甲酰-苯甲酰)腺苷三磷酸三乙烷胺盐(Bz ATP)组和Bz ATP+人参皂甙Rb1组。测定脑片孵育液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率,免疫组化测定海马CA1区和齿状回神经型一氧化氮合酶(n NOS)表达,Western blot测定海马磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK1/2)蛋白表达。结果:人参皂甙Rb1(40μmol/L、60μmol/L)组可明显降低ATP诱导的LDH释放,人参皂甙Rb1(60μmol/L)亦降低海马p-JNK1/2以及CA1区和齿状回n NOS的表达,人参皂甙Rb1(60μmol/L)对由P2X7受体激动剂Bz ATP诱导的LDH释放和n NOS、p-JNK1/2表达亦有明显抑制作用。P2X7受体抑制剂亮蓝G可明显减低ATP诱导的LDH释放,但BBG联合应用人参皂甙Rb1(60μmol/L)并未增强人参皂甙Rb1的保护作用。结论:人参皂甙Rb1可明显抑制ATP诱导的大鼠海马脑片毒性损伤,其作用机制与抑制P2X7受体,进而减少nNOS和p-JNK1/2的表达有关。     

汉黄芩素对肺癌肿瘤细胞生长和转移抑制作用机制的研究

目的:探讨明胶酶(MMP-2)、表皮生长因子受体酪氨酸蛋白激酶(EGFR-TPK)和氨肽酶N(APN)抑制剂汉黄芩素对肺癌细胞的生长和转移抑制机制。方法:本文采用酶抑制学方法,研究了汉黄芩素(0~100μmol/L)对MMP-2、APN和EGFR-TPK的抑制作用,并进一步的分析了汉黄芩素(0~100μmol/L)对肺癌A549的生长、细胞转移的抑制作用和A549细胞中TIMP-2和TGF-β1表达水平的影响,酶标仪吸光度法检测细胞凋亡蛋白Caspase 3活性。结果:汉黄芩素能够抑制MMP-2、APN和EGFR-TPK的活性(汉黄芩素半抑制浓度IC50分别为7.26±0.33、7.11±0.43和5.32±0.22μmol/L)和诱导A549的凋亡(汉黄芩素半抑制浓度IC50为49.13±4.90μmol/L);随着汉黄芩素作用浓度(1、10、50、100μmol/L)的增加,TGF-β1表达均呈现降低趋势,TIMP-2的表达呈增加趋势,且A549细胞穿过人工基底膜的能力下降而凋亡蛋白Caspase 3活性增加。结论:汉黄芩素通过诱导TIMP-2表达增强和TGF-β1表达的降低,对MMP-2、APN和EGFR-TPK的活性产生抑制作用,对Caspase 3活性产生激活作用,最终对肺癌A549细胞的转移和凋亡起到重要作用。     

黄连解毒汤与阿托伐他汀对不稳定心绞痛患者的临床疗效、血清细胞因子、VEGF及NO的影响分析

目的:探讨黄连解毒汤结合阿托伐他汀治疗不稳定心绞痛患者的临床效果及对血清细胞因子、血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮(NO)的影响。方法:选取2013年7月~2016年4月我院诊治的120例不稳定心绞痛患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组各60例,两组患者均在常规治疗基础上加用阿托伐他汀,观察组另外加用黄连解毒汤辅助治疗2个月,对比两组的临床效果及相关指标。结果:治疗后,观察组患者的总有效率90.00%,明显高于对照组的75.00%。治疗后,观察组患者的心电图疗效评价总有效率93.33%,明显高于对照组的80.00%。治疗前,观察组和对照组的血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、VEGF、NO的水平差异不具有统计学意义;治疗后,观察组患者的血清hs-CRP、IL-6、MMP-9、TNF-α水平明显低于对照组患者,VEGF、NO的水平明显高于对照组患者。观察组患者的平板试验中ST段下降0.1mV时间、最大ST段下降距离、ST段下移持续时间、耗氧量和最大负荷量心率均优于对照组患者。结论:黄连解毒汤结合阿托伐他汀及常规疗法治疗不稳定心绞痛患者有利于降低患者的血清炎症反应水平、改善心肌缺氧状态。