溴隐亭不同给药方式治疗高泌乳素血症的Meta-分析

目的 系统评价溴隐亭不同给药方式治疗高泌乳素血症的疗效与安全性。方法 计算机检索Pubmed、Embase、The Cochrane Liabrary、中国学术期刊全文数据库（CNKI）、中国生物医学文献数据库（CBM）、万方数据库（WangFang）和维普中文科技期刊数据库（VIP）等数据库关于溴隐亭不同给药方式治疗高泌乳素血症的随机对照试验（RCT）,检索时限均由建库至2018年10月31日。观察指标为血清泌乳素（PRL）水平、月经情况、妊娠率、溢乳情况、胃肠道不良反应（ADR）、循环系统及神经系统ADR。对符合要求的文献进行数据提取及方法学质量评价,采用RevMan 5.2软件进行Meta-分析。结果 共纳入23项RCTs,计1 964例患者。Meta-分析结果示：溴隐亭阴道给药组与口服给药组相比,阴道给药组降低血清PRL[MD=-2.11,95% CI（-3.85,-0.37）,P=0.02]、改善月经率[RD=0.08,95% CI（0.03,0.14）,P=0.002]、溢乳消失率[RD=0.06,95% CI（0.01,0.10）,P=0.02]效果更好,胃肠道ADR发生率更低[OR=0.18,95% CI（0.12,0.26）,P<0.000 01]、循环系统及神经系统ADR发生率更低[OR=0.29,95% CI（0.17,0.49）,P<0.000 01],这些指标均优于口服给药组。但用药后妊娠率方面两组差异无统计学意义。溴隐亭经直肠给药与口服给药比较,疗效无明显差异,但在ADR发生率方面[OR=0.10,95% CI（0.05,0.19）,P<0.000 01],直肠给药低于口服给药,差异有统计学意义。结论 现有证据显示溴隐亭阴道给药较口服给药效果显著,安全性更高;在不宜使用阴道给药的情况下,溴隐亭直肠给药较口服给药安全性更高,两种给药方式均值得临床推广。     

医用三氧橄榄油防治鼻咽癌急性放射性皮炎的临床疗效观察

目的观察医用三氧橄榄油防治鼻咽癌急性放射性皮炎的临床疗效。方法纳入56例患者,分为比亚芬组和医用三氧橄榄油组,各28例,放疗期间照射野皮肤涂抹药物,每日三次,连续六周进行RISRAS评分,RTOG分级及安全性评价,每周一次,比较两组之间上述指标的差异。结果自第四周开始,三氧橄榄油组RISRAS评分较比亚芬组降低(P 0.05),第五周和第六周两组比较差异有统计学意义(P 0.01)。放疗后第五周和第六周,三氧橄榄油组RTOG分级较比亚芬组有所改善,比较差异有统计学意义(P 0.05)。结论医用三氧油在防治鼻咽癌患者放疗后急性放射性皮肤损伤方面优于比亚芬。     

当归芍药散通过调节ER/NF-ΚΚB/NLRP3缓解卵巢切除小鼠认知功能

目的雌激素下降是导致围绝经期女性认知功能障碍的风险因素,雌激素的缺失大大增加了围绝经期女性罹患阿尔茨海默病(AD)的风险。然而,长期的雌激素代替疗法在安全性上尚存在较大的争议,因此寻找更为安全有效的治疗方法,显得尤为重要。当归芍药散(DSS)是治疗妇人妊娠腹痛的经典方,其对AD也有较好的疗效。近来,研究人员进一步发现,DSS可以改善增加海马雌激素的合成改善雌激素缺乏引起的认知功能缺陷,但其发挥作用的分子机制尚不清楚。本研究旨在探讨DSS发挥改善雌激素缺失模型小鼠认知障碍的分子机制,为中医药治疗神经退行性疾病提供实验依据。方法将75只雌性ICR小鼠随机分为对照组和模型组,通过双侧卵巢摘除法(OVX)建立雌激素缺失动物模型,对照组仅切除卵巢旁附近少量脂肪,随后将模型动物随机分为:OVX组,DSS治疗组(每天3.2和6.4 g·kg~(-1))和阳性药治疗组(β-雌二醇,E2,每天100μg·kg~(-1)),DSS治疗组给予灌胃治疗,阳性药治疗组给予皮下注射治疗,对照组给予等体积蒸馏水治疗。治疗12周后,通过Morris水迷宫测试、Y迷宫测试及旷场实验观察认知功能,免疫组化染色法观察小鼠海马小胶质细胞和星形胶质细胞激活,ELISA法检测海马炎症因子IL-1β分泌,Western蛋白印迹法检测海马NF-κB、NLRP3、胱天蛋白酶1、ASC、IL-1β及雌激素受体(ER)ERα和ERβ蛋白的表达。结果 DSS可显著缩短OVX小鼠在Morris水迷宫定位航行的逃避潜伏期,增加模型小鼠在Y迷宫三个臂中的交替百分比,增加模型小鼠在旷场中心区域活动的时间,此外,DSS可明显下调OVX小鼠小胶质细胞标志物Iba-1和星形胶质细胞标志物GFAP的表达,下调海马IL-1β的分泌,降低OVX模型小鼠海马p-NF-κB、NF-κB、NLRP3、胱天蛋白酶1、ASC和IL-1β蛋白的表达,此外,DSS还能增加OVX小鼠海马的雌激素受体ERα和ERβ的表达。结论 DSS可能是通过调节海马ER/NF-κB/NLRP3通路发挥缓解雌激素缺乏引起的认知功能缺陷,DSS可能是治疗围绝经期女性认知功能障碍的潜在药物。     

endophilin A2抑制小鼠肾间质纤维化的形成

目的探讨endophilin A2(EndoA2)对肾间质纤维化的抑制作用,为评估EndoA2是否可作为肾脏纤维化防治的新靶点提供实验室依据。方法 EndoA2转基因小鼠通过单侧输尿管结扎手术,形成肾间质纤维化。造模结束后,分离小鼠肾脏并作石蜡切片。Masson染色检测小鼠肾间质纤维化程度,并检测纤维胶原相关分子的蛋白表达情况。另外,HK2细胞过表达EndoA2,观察细胞形态变化与上皮间质转分化(EMT)标志物的蛋白表达以及TβRI与TβRⅡ的mRNA和蛋白表达;检测EndoA2对TGF-β/smad通路的影响。结果造模后的EndoA2转基因小鼠肾间质纤维化程度明显减弱,而且肾皮质中多个纤维胶原相关分子的蛋白表达均明显降低;EndoA2可明显抑制TGF-β1诱导的HK2细胞EMT及TGF-β/Smad通路,而且TβRⅠ的mRNA和蛋白表达均明显降低;EndoA2可抑制TβRⅡ的蛋白表达但并不影响其mRNA水平。结论 EndoA2可通过抑制TβRⅠ和TβRⅡ的蛋白表达,从而抑制TGF-β/Smad通路,最终抑制肾间质纤维化的形成。     

槲皮素通过SIRT1/NLRP3通路改善db/db糖尿病模型小鼠的认知功能障碍

目的流行病学研究发现,糖尿病与认知功能障碍密切相关。槲皮素已被证实具有改善糖尿病和认知障碍功能,但是其相关机制仍然不清楚。本研究采用db/db糖尿病模型小鼠,探讨槲皮素是否可以通过SIRT1/NLRP3途径来改善糖尿病模型小鼠的认知功能障碍。方法将10月龄的雌性db/db小鼠随机分成3组(每组8只),模型组、槲皮素低剂量组(35 mg·kg~(-1))和槲皮素高剂量组(70 mg·kg~(-1));相同月龄雌性野生型db/m小鼠8只设为正常对照组。连续给药12周后进行学习记忆相关的行为学检测(Morris水迷宫测试和新物体识别测试)、葡萄糖耐量OGTT和胰岛素耐量ITT。行为学测试结束,取材,免疫印迹检测小鼠脑中神经和突触相关蛋白及SIRT1/NLRP3通路相关蛋白的表达。结果 Moriss水迷宫实验结果显示,槲皮素组较模型组逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台的次数和目标象限停留的时间显著提高(P<0.05);新物体识别实验结果显示槲皮素组较模型组对于新物体的识别指数明显提高(P<0.05),表明槲皮素能够增加db/db小鼠的学习记忆能力。同时,胰岛素耐量实验和葡萄糖耐量实验结果显示,槲皮素组较模型组胰岛素抵抗和空腹血糖水平显著降低(P<0.05)。蛋白质印迹分析还表明,槲皮素组较模型组小鼠脑中神经和突触相关蛋白(PSD93,PSD95,BDNF和NGF)的表达显著增加(P<0.01,P<0.05),同时槲皮素还显著改善了SIRT1的蛋白质表达(P<0.05),降低了NLRP3炎症相关蛋白(NLRP3,ASC,Cleaved Caspase-1,IL1β,IL18)的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论 SIRT1/NLRP3通路可能是槲皮素对糖尿病脑病神经保护作用的关键机制。     

鹅不食草通过激活ERK/Nrf2信号通路发挥神经保护的作用机制

目的氧化应激与神经退行性疾病的发生发展密切相关,传统中草药鹅不食草具有抗氧化特性。本课题利用鹅不食草乙醇提取物(ECM)深入研究鹅不食草的抗氧化效果以及分子机制,并探讨鹅不食草通过抗氧化发挥神经保护从而改善小鼠学习记忆的作用效果。方法采用醇提法提取ECM,并运用高效液相色谱技术从ECM中分离纯化倍半萜类化合物,利用核磁共振对其进行结构鉴定。体外实验利用叔丁基过氧化氢(t BHP)和谷氨酸盐在神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)和小鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)中构建氧化损伤模型;在体内实验中,选用昆明小鼠皮下注射D-半乳糖(D-Gal,每天120 mg·kg~(-1))建立亚急性衰老模型,并在造模2个月后用ECM(每天100,200和400 mg·kg~(-1))继续灌胃1个月检测对小鼠的体内抗氧化效果。通过DCFH-DA荧光探针标记检测活性氧(ROS)含量;利用相关试剂盒检测细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和抗氧化小分子GSH的含量;用免疫印迹检测各种抗氧化蛋白的含量;采用Nissl染色观察鹅不食草对海马神经元的保护作用;利用Morris水迷宫检测鹅不食草改善小鼠学习记忆的能力。结果首先我们检测鹅不食草在细胞水平的抗氧化效果和分子机制。谷氨酸盐和t BHP可以显著升高细胞内ROS含量,促进SH-SY5Y和PC12细胞死亡,并降低线粒体膜电位,下调GSH的含量,抑制SOD活性,同时升高MDA水平。而ECM(0.5～2.0 mg·L-1)预处理可以显著降低细胞内ROS含量,抑制氧化诱导的细胞死亡,并回复线粒体膜电位,降低MDA含量,同时GSH含量和SOD活性也回复至正常水平。ECM可以显著降低t BHP诱导的p38 MAPK和JNK磷酸化水平,同时维持了ERK的磷酸化水平。进一步发现ECM可以诱导Nrf2的核转位进而促进下游抗氧化相关蛋白的表达,包括血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)和NAD(P)H:醌氧化还原酶-1(NQO-1),表明ECM可以显著活化细胞内Nrf2信号通路;而ERK抑制剂U0216则显著抑制ECM诱导的Nrf2通路活化,表明ECM通过激活ERK活化Nrf2通路从而发挥抗氧化作用。在D-Gal诱导的亚急性衰老小鼠模型中,ECM同样可以显著降低海马和皮质内MDA水平,增加GSH含量;在海马组织中,ECM可以抑制p38 MAPK和JNK的活化,增强ERK磷酸化水平,激活Nrf2信号通路,恢复小鼠海马中HO-1,NQO-1和SOD2的表达水平,并维持海马神经元突触蛋白的表达水平。在Morris水迷宫定位航行试验中,ECM处理组小鼠的逃避潜伏期较模型组明显缩短,并在空间探索实验中增加了小鼠的穿越平台次数,从而表明鹅不食草可以显著抑制氧化应激导致的神经损伤并改善学习记忆。为了探索鹅不食草发挥抗氧化作用的主要活性成分,从ECM中分离纯化出了4种倍半萜类化合物,经鉴定确定为6-O-angeloylprenolin、arnicolide D、arnicolide C和microhelenin C4种单体化合物;实验发现6-O-angeloylprenolin和arnicolide D在低剂量下(0.5～2μmol·L-1)可以非常显著的抑制ROS产生,并保护t BHP对SH-SY5Y和PC12造成的氧化损伤,同时2种单体化合物可以显著活化Nrf2信号通路。从而明确了鹅不食草发挥抗氧化作用的主要活动单体成分。结论 ECM能够通过激活ERK/Nrf2信号通路保护神经元细胞免受氧化应激诱导的损伤,并显著改善小鼠的学习记忆能力;其中6-O-angeloylplenolin和arnicolide D2种单体化合物作为主要活性成分发挥抗氧化特性。提示鹅不食草具有显著抗氧化作用并可以作为抗氧化化合物的来源,为治疗神经退行性疾病药物研发提供了新的选择。     

从DHA代谢角度探讨当归芍药散治疗APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠的作用及机制

目的研究当归芍药散水提液(DSS)对APP/PS1阿尔茨海默病(AD)双转基因模型小鼠认知功能的影响,并从脑内二十二碳六烯酸(DHA)代谢及对DHA代谢信号通路神经炎症、氧化应激探讨DSS治疗AD的作用机制。方法选择6月龄APP/PS1双转基因小鼠,随机分为模型组、当归芍药散高、中、低剂量组以及阳性药组,选择同背景同月龄转基因阴性雄性小鼠作为正常对照组。当归芍药散组分别为1.6,3.2和6.4 g·kg~(-1)。阳性药组(多奈哌齐)给药剂量为3 mg·kg~(-1)。每天灌胃1次,连续给药1个月后开始行为学测试。行为学测试结束次日,小鼠称重,10%的水合氯醛腹腔注射麻醉,分离全脑并称重,采用液质联用技术对脑内未酯化的DHA进行含量测定;采用Western蛋白印迹法对DHA从细胞膜释放、代谢的酶i PLA2和15-LOX以及参与炎症介质释放、代谢的酶c PLA2,COX-1,COX-2,5-LOX和12-LOX蛋白表达量进行检测;ELISA测定炎症介质PGE2,TXB2和LTB4;试剂盒检测小鼠脑内抗氧化酶MDA,SOD,GSH和ROS。结果 Morris水迷宫定位航行结果提示:与正常组相比,同背景同月龄的APP/PS1模型组逃避潜伏期明显延长(P<0.05);阳性药组(P<0.05)以及DSS 1.6,3.2和6.4 g·kg~(-1)组(P<0.01)可明显缩短AD模型小鼠的逃避潜伏期。Morris水迷宫空间探索结果提示:与对照组相比,模型组第一次穿越平台时间明显延长(P<0.01)、穿越平台次数明显减少(P<0.01);阳性药组、DSS 1.6,3.2和6.4 g·kg~(-1)组可明显缩短AD模型小鼠第一次穿越平台的时间(P<0.01)、增加其穿越平台的次数(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,阳性药组、DSS1.6,3.2和6.4 g·kg~(-1)组小鼠脑内未酯化的DHA含量明显增多(P<0.05);除DSS 1.6 g·kg~(-1)外,阳性药、DSS 3.2和6.4 g·kg~(-1)组可明显上调小鼠海马、皮质内15-LOX和i PLA2蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),下调参与炎症介质释放、代谢的酶c PLA2,COX-1,COX-2,5-LOX和12-LOX蛋白表达(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,阳性药组、DSS 1.6,3.2和6.4 g·kg~(-1)组海马、皮质内的神经炎症介质PGE2,TXB2和LTB4明显减少(P<0.05,P<0.01),MDA和ROS明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性增加(P<0.05)。结论当归芍药散能改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的学习记忆障碍,改善血脂水平,能提高AD模型小鼠海马、皮质内未酯化DHA的含量并且上调DHA经酶代谢产生NPD1有关到15-LOX和i PLA2蛋白的表达,减少神经介质PGE2,TXB2和LTB4的生成,并且下调与神经介质生成有关的c PLA2,5-LOX,12-LOX,COX-1和COX-2蛋白的表达,并且还能改善AD模型小鼠脑内的氧化应激状态。