三黄泻心汤抑制危险脂肪因子7-keto诱导血管内皮NLRP3活化引起的功能紊乱的机制分析

目的:研究三黄泻心汤(SHXXT)能否通过抑制7-酮基胆固醇(7-keto)诱导的血管内皮细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)活化恢复内皮功能。方法:培养小鼠主动脉血管环组织,实验组分为正常组,模型7-keto组,三黄泻心汤含药血清1%,2%,5%不同浓度给药组,观察小鼠血管舒张功能;培养微血管内皮细胞,按照上述实验分组,另设置NLRP3抑制剂异甘草素(ISO),通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内皮一氧化氮合酶(e NOS),NLRP3,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1),白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达量的变化,除此之外,利用一氧化氮(NO)定量试剂盒检测NO的浓度。结果:与正常组比较,模型组显著降低血管环内皮依赖性舒张功能(P<0.01),给药组明显恢复内皮依赖性血管舒张功能,且成浓度依赖性(P<0.05,P<0.01);同时研究显示,与正常组比较,模型组微血管内皮细胞e NOS蛋白表达明显降低(P<0.05),NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),NO浓度显著降低(P<0.01);与模型组比较,给予三黄泻心汤血清治疗后,明显升高e NOS蛋白表达和NO浓度,明显降低NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:三黄泻心汤能改善7-keto引起的内皮依赖性血管功能损伤,且是通过抑制内皮NLRP3炎症小体活化介导的NO信号通路实现的。