AMH检测与相关疾病诊断的研究进展

抗缪勒管激素(Anti-Müllerian hormone, AMH),又称缪勒管抑制物(Müllerian inhibiting substance, MIS),是由560个氨基酸组成的糖蛋白，通过其受体AMHRI、AMHRⅡ调节男性睾丸间质细胞的功能和女性窦卵泡发育。由于AMH水平不受月经周期、激素类避孕药和怀孕的影响并且能反映卵巢储备能力，是诊断乳腺癌、多囊卵巢综合征、卵巢颗粒细胞癌、子痫前期等疾病的重要标志物。随着检测技术的不断进步，AMH检测已步入自动化阶段，文章从AMH的生理功能、检测方法及其与疾病的相关性出发介绍AMH检测在疾病诊断中的应用。     

羟基γ-异山椒素抑制人体卵巢颗粒细胞雌激素生物合成的机制研究

目的:探讨羟基γ-异山椒素抑制人体卵巢颗粒细胞雌激素合成的相关机制。方法:利用CCK-8检测4种山椒素对人卵巢颗粒细胞系(KGN细胞株)增殖的影响；Elisa法检测4种山椒素对KGN细胞雌二醇合成的影响；RT-qPCR检测KGN细胞芳香化酶基因；Western blot法检测芳香化酶蛋白及相关通路蛋白。结果:羟基γ-异山椒素抑制雌二醇生物合成效果最佳[半抑制浓度(IC₅₀)=(16.63±0.39)μmol·L^-1],并且在该浓度下对KGN细胞的增殖无明显抑制作用。在羟基γ-异山椒素干预后，芳香化酶基因和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),且芳香化酶的活性未受到明显影响；同时，羟基γ-异山椒素能显著降低P-CERB,P-AKT,P-p38蛋白的表达(P<0.05)。结论:羟基γ-异山椒素可能通过抑制p38/MAPK和PI3K/AKT通路的激活，降低CREB的磷酸化，抑制芳香化酶转录，最终抑制KGN细胞雌激素生物合成。     

多囊卵巢综合征患者颗粒细胞蛋白质组学分析

目的 应用定量蛋白质组学方法分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞蛋白质表达变化。方法 收集2020年9月至2021年9月于我院生殖医学中心行IVF/ICSI助孕的患者取卵后废弃卵泡液标本24例，其中PCOS组12例和正常排卵对照组12例，从中提取颗粒细胞。采用液相色谱-串联质谱方法得到其蛋白质表达谱，生物信息学分析鉴定差异表达蛋白及其功能。采用Western Blot法验证质谱结果。结果 共鉴定出329种差异表达蛋白，其中上调蛋白169个，下调蛋白160个。KEGG富集分析结果显示，差异蛋白在亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸分解，糖酵解/糖异生，谷胱甘肽代谢等通路显著富集。结论 PCOS女性与正常排卵女性之间颗粒细胞蛋白质表达谱存在显著差异，进一步探索差异蛋白的功能或许可以为PCOS发病机制的研究提供线索。     

Peroxiredoxins家族在H2O2诱导人颗粒细胞凋亡过程中的表达

摘要:目的 探讨 Peroxiredoxins(Prdxs)家族在 H2O2诱导人颗粒细胞凋亡过程中的作用。方法 选取在华中科技 大学同济医学院附属同济医院接受体外受精-胚胎移植技术(invitrofertilizationembryotransfertechnology,IVF-ET)的 年轻患者的颗粒细胞,经体外培养并给予 H2O2诱导人颗粒细胞凋亡,检测 Prdx1~6mRNA 表达情况。结果 选取患 者的激素水平及窦卵泡数(AFC)提示卵巢处于良好状态,体外培养颗粒细胞同时表达卵泡刺激素受体(FSHR)和黄体 生成素受体(LHR),符合原代颗粒细胞表型。在 H2O2诱导下,细胞核皱缩,发生凋亡。实时定量聚合酶链反应(qPCR) 显示,H2O2处理组Prdx1、2、4mRNA 的表达水平显著高于对照组,尤其Prdx4;而Prdx3和Prdx6mRNA 的表达水平低 于对照组,差异均具有统计学意义;Prdx5mRNA 的表达水平相对于对照组有升高的趋势,但差异无统计学意义。结论 Prdxs可能通过调节颗粒细胞凋亡过程,从而在人卵泡闭锁甚至卵巢衰老过程中发挥重要调节作用。     

DOR患者卵泡颗粒细胞/未成熟卵母细胞端粒长度观察、差异表达基因筛选及生物学功能分析

目的 观察卵巢储备功能减退（DOR）患者卵泡颗粒细胞/未成熟卵母细胞端粒长度，筛选颗粒细胞差异表达基因，并分析差异表达基因的生物学功能。方法 采用qPCR法检测4例DOR患者（减退组）和4例卵巢功能正常者（正常组）颗粒细胞、未成熟卵母细胞的端粒长度；高通量测序分析4例减退组和4例正常组颗粒细胞差异表达基因，并进行生物学功能分析。结果 减退组、正常组未成熟卵母细胞端粒长度分别为0.935、1.39，颗粒细胞端粒长度分别为0.915、1.34，两者比较，P均<0.05。相比于正常组，减退组检测到997个上调基因，525个下调基因；GO功能分析发现，差异表达基因显著富集涉及细胞黏附、细胞分裂、负向调控BMP信号通路、凋亡过程的正调控、细胞增殖的负调控、ATP结合、细胞连接、线粒体基质、催化活性、蛋白酶结合、线粒体、线粒体内膜、氧化还原酶活性、对cAMP反应等，差异基因KEGG信号通路包括cAMP信号通路、cGMP-PKG信号通路、胰岛素分泌、肌动蛋白细胞骨架的调节、钙信号通路、卵母细胞减数分裂、甲状腺激素合成、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸降解、酪氨酸代谢、组氨酸代谢、乙醛酸酯和二羧酸酯代谢...     

卵巢低反应女性中沉默信息调节因子1对卵巢颗粒细胞的调控

目的 探讨卵巢低反应女性中沉默信息调节因子1(SIRT1)对卵巢颗粒细胞的调控。方法 本研究纳入行IVF/ICSI-ET助孕的女性共60例，其中卵巢低反应（POR）组和卵巢正常反应（NOR）组各30例。采用密度梯度离心法分离纯化卵泡液中的颗粒细胞。分别使用SIRT1激动剂白藜芦醇（RESV）或抑制剂EX527处理POR组颗粒细胞，对照组为不使用药物处理的颗粒细胞。采用qPCR检测颗粒细胞SIRT1和类固醇激素合成关键酶（StAR、CYP19、CYP17）的mRNA水平。采用Western blot检测颗粒细胞SIRT1、类固醇激素合成关键酶蛋白和凋亡相关蛋白（Bcl-2、Caspase-3）的水平。TUNEL法检测颗粒细胞的凋亡率。化学发光法检测颗粒细胞培养液中雌二醇水平。结果 POR组颗粒细胞SIRT1 mRNA和蛋白水平低于NOR组（P=0.003,P <0.001）。RESV上调SIRT1 mRNA和蛋白水平（P <0.001），上调类固醇激素合成关键酶mRNA和蛋白水平（P <0.05）,EX527下调SIRT1 mRNA和蛋白水平（P=0.023、0.001...     

温肾养血方改善自然衰老雌鼠卵巢颗粒细胞及卵母细胞质量的实验研究

目的 探究温肾养血方改善自然衰老雌鼠卵巢颗粒细胞及卵母细胞质量的作用机制。方法 使用随机数表法将40只8月龄ICR雌鼠随机分为A:自然衰老组、B:控制性超排卵组(controlled ovarian hyperstimulation, COH)组、C:温肾养血低剂量组、D:温肾养血高剂量组，连续定时给药10d, B、C、D组雌鼠于第11天腹腔注射孕马血清促性腺激素(pregnant mareserum gonadotropin, PMSG),A组注射等量0.9%生理盐水，48h后，腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, hCG),16h后取高龄雌鼠输卵管，分离其卵巢颗粒细胞及卵母细胞，检测氧化应激及线粒体功能等各项指标，评价各组小鼠卵巢颗粒细胞及卵母细胞质量，并采用高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)测定温肾养血方化学成分。结果 与自然衰老组相比，COH组卵母细胞和颗粒细胞线粒体膜电位明显下降(P<0.05),颗粒细胞α-酮戊二酸脱氢酶(α-ketoglutaric aciddehydrogenase,...     

维生素D对PCOS大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的 探讨维生素D（vitamin D，VD）对多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）大鼠卵巢颗粒细胞（granulosa cells，GCs）凋亡的影响。方法 选取3周龄SD雌性大鼠21只，采用随机数字表法分为对照组（n=6）和造模组（n=15），建立PCOS大鼠模型。造模组采用来曲唑[1mg/（kg·d），溶于0.5%羧甲纤维素钠溶液]灌胃联合高脂饲料喂养，对照组采用等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃，给予普通饲料喂养，将12只造模成功的大鼠（3只造模失败），采用随机数字表法分为PCOS组（n=6）和PCOS+VD组（n=6），两组灌胃同等剂量玉米油，普通饲料喂养，连续21d。比较对照组、PCOS组和PCOS+VD组大鼠的动情周期、卵巢形态学变化，以及血清25羟维生素D[25 hydroxyvitam D，25-（OH）D]、睾酮（testosterone，T）、黄体生成素（luteinizing hormone，LH）、促卵泡激素（follicle-stimulating hormone，FSH）水平。造模结束后，分离GCs进行体外培养，根据培养方式分为GCs对照组（n=6）、GCs-PCOS组（n=6）、GCs-（PCOS+VD）组（n=6）、GCs-（PCOS+ VD+LY294002）组（n=6）。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，透射电镜观察细胞凋亡小体，蛋白免疫印迹法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果 与对照组比较，PCOS组大鼠血清中T、LH水平升高，FSH、25-（OH）D水平降低，动情周期紊乱，卵巢呈多囊样改变，差异均有统计学意义（P<0.05）；与PCOS组比较，PCOS+VD组大鼠血清T、LH降低，FSH及25-（OH）D水平升高，动情周期恢复正常，囊状卵泡数量减少，差异均有统计学意义（P<0.05）。与GCs对照组比较，GCs-PCOS组GCs凋亡率及Bax蛋白表达增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达减少，差异均有统计学意义（P<0.05）；与GCs-PCOS组比较，GCs-（PCOS+VD）组的GCs凋亡率及Bax蛋白表达降低，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达增加，差异均有统计学意义（P<0.05）；与GCs-（PCOS+VD）组比较，GCs-（PCOS+VD+LY294002）组的p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 VD可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制GCs凋亡。     

自噬在多囊卵巢综合征中的调控作用研究

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种复杂的内分泌代谢性疾病，是女性无排卵性不孕症的常见病因，其发病机制尚不完全明确。自噬对细胞内环境的稳定至关重要，同时又参与多种疾病的发生、发展。本文综述了参与自噬的关键分子及其在PCOS内分泌代谢和颗粒细胞中的研究进展，以帮助更好地了解PCOS的发病机制。     

卵巢颗粒细胞肿瘤的CT诊断

卵巢颗粒细胞肿瘤(Granulosa cell tumor,GCT)是卵巢性索间质细胞肿瘤之一,十分罕见,占所有卵巢恶性肿瘤的2%～5%,可发生于任何年龄,但最常见于绝经前或绝经后早期妇女.该肿瘤低度恶性,预后较好,5年生存率可达90%,术前明确诊断对手术方式的选择及预后有很大的帮助[1~3].本文通过回顾性分析本院经病理证实的16例卵巢颗粒细胞肿瘤患者的影像学资料,探讨其CT表现,总结其CT影像学特点.