基于分子对接及分子动力学模拟的中药来源Ⅱ型5α-还原酶抑制剂筛选

目的基于分子对接及分子动力学模拟方法从中药活性成分中寻找潜在的Ⅱ型5α-还原酶(5αR2)抑制剂。方法采用分子对接方法对中药来源的26种单体成分进行对接,根据对接结果,对与蛋白结合较强的化合物进行分子动力学模拟,采用MM/PBSA方法计算体系的结合自由能;通过体外微量酶反应体系进行生物活性验证。结果 26种单体成分与5αR2具有不同程度的结合能,其中女贞苷、红花黄色素和扁柏双黄酮的结合能较低,结合能力强;分子动力学模拟结果与对接结果相一致(结合能力:女贞苷-蛋白红花黄色素-蛋白扁柏双黄酮-蛋白);活性实验结果显示3种成分对5αR2具有一定的抑制作用,女贞苷半数抑制浓度(IC50)值为(42.12±3.83)μmol/L,红黄黄色素IC50值为(69.06±6.35)μmol/L,扁柏双黄酮IC50值为(191.28±5.90)μmol/L。结论筛选的26个单体成分中,女贞苷、红花黄色素和扁柏双黄酮具有预防和治疗雄激素依赖型疾病新药研发的潜力,为探索新型5αR2抑制剂提供参考。     

红花化瘀汤熏洗治疗膝关节镜术后康复效果及对患者疼痛和膝关节功能的影响

目的:探讨红花化瘀汤熏洗在膝关节镜术后康复中的临床效果及对患者疼痛和膝关节功能的影响。方法:选择膝关节镜手术患者104例为研究对象,随机数字表分为对照组和观察组各52例。对照组术后给予常规方法治疗,观察组在对照组基础上联合红花化瘀汤熏洗治疗。治疗8周后,比较两组治疗效果、VAS评分、膝关节功能及炎症因子。结果:两组术后2周、4周、6周及8周膝关节肿胀度均小于术前(P<0.05); 但观察组术后以上时间点膝关节肿胀度小于对照组(P<0.05); 且观察组术后以上时间点VAS评分低于对照组(P<0.05); 观察组术后8周疼痛、功能、活动度、畸形、肌力和稳定性评分高于对照组(P<0.05); 观察组治疗后8周NO和IL-1β水平低于对照组(P<0.05),TGF-1β水平高于对照组(P<0.05)。结论:红花化瘀汤熏洗用于膝关节镜术后康复中能改善患者膝关节肿胀程度,减轻患者疼痛,提高患者膝关节功能,可降低炎症因子水平。     

基于多元统计分析和网络药理学的五味子醋制前后质量标志物预测分析

目的基于多元统计分析和网络药理学分析预测五味子醋制前后潜在的质量标志物。方法采用UPLC-Q/TOF-MS解析生、醋五味子饮片中主要的木脂素类成分,并运用多元统计方法筛选出炮制前后潜在的差异化学成分,即化学标记物。进一步通过网络药理学以及生物信息学分析显著差异成分相关的主要作用靶点和通路,构建"成分-靶点-通路"网络关系,预测生、醋五味子潜在的质量标志物。结果筛选了五味子醋制前后差异性成分40个,其中8个为生、醋五味子之间显著性差异成分(即化学标记物)。鉴定并确认了其中的5个化学成分,分别是5-羟甲基糠醛、五味子甲素及其同分异构体、五味子乙素和五味子酯丁。而其余3个化学标记物通过解析一级、二级质谱信息,推测它们很可能也属于木脂素类成分。网络药理学分析结果表明,鉴定并确认的5个潜在质量标志物与五味子的主要药理作用密切相关。最终五味子乙素和5-羟甲基糠醛被确定为最具代表性的潜在质量标志物。结论五味子醋制前后其化学成分发生了一系列复杂的变化,经研究分析确定五味子乙素和5-羟甲基糠醛可作为五味子醋制前后代表性的潜在质量标志物,并推测木脂素类成分可能为五味子醋制保肝的重要效应物质基础。     

五味子多糖对脑胶质瘤SHG-44细胞血管内皮生长因子表达水平的影响

目的探讨五味子多糖作用脑胶质瘤SHG-44细胞后对血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法培养脑胶质瘤SHG-44细胞,将其分为对照组和五味子多糖1.25、2.5、5 mmol/L组,利用酶联免疫吸附实验观察五味子多糖作用后SHG-44细胞分泌VEGF蛋白情况。结果五味子多糖1.25和2.5 mmol/L浓度组SHG-44细胞分泌VEGF蛋白水平呈下降趋势,而5 mmol/L浓度组SHG-44细胞分泌VEGF蛋白水平明显降低,与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。结论五味子多糖能明显抑制SHG-44细胞分泌VEGF蛋白,提示其可能通过抑制脑胶质瘤血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

红花注射液对小鼠体内稳态华法林抗凝作用的影响

目的 探讨红花注射液对小鼠体内稳态华法林抗凝作用的影响;方法 采用平行、随机、对照实验,对照组和高、低剂量实验组给予华法林溶液（0.3 mg/kg）灌胃,分别每天1次,连续给药10 d;在实验的第5天开始每天灌胃后30 min,对照组尾静脉注射生理盐水,高、低剂量实验组注射红花供试液（1%及5%两个浓度）,连续给药5 d。对照组分别给予蒸馏水和生理盐水。在实验的第10天静脉注射给药后小鼠髂总动脉取血约1.2 m L,测定PT、INR值。结果 实验组与对照组相比,PT值的延长、INR值的升高均无显著性差异。结论 未发现红花注射液对小鼠体内稳态华法林的抗凝作用有影响。     

奥扎格雷钠联合红花注射液治疗脑梗塞40例临床观察

目的:探讨奥扎格雷钠联合红花注射液治疗脑梗塞的临床疗效。方法:选取脑梗塞患者80例作为研究对象,随机分为对照组和研究组各40例。对照组患者采用川芎嗪注射液进行治疗,研究组采用奥扎格雷钠联合红花注射液进行治疗,比较两组临床疗效。结果:治疗后对照组总有效率为72.5%,明显低于研究组的92.5%,差异具有统计学意义(P0.05),治疗后两组神经功能缺损评分明显下降,研究组明显优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:奥扎格雷钠联合红花注射液治疗脑梗塞临床疗效较好,能有效改善患者的神经功能,值得临床推广应用。     

羟基红花黄色素A通过抑制Mst1激酶活化对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的观察羟基红花黄色素(Hydroxysaffl or yellow A,HSYA)对乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧(anoxiareoxygenation,A/R)损伤的保护作用,并进一步探讨该作用与Mst1/YAP信号中Mst1激酶之间的关系。方法分离新生SD大鼠心肌细胞,孵育48 h,细胞贴壁,然后进行分组实验。正常对照组(Con组):正常条件下孵育36 h;缺氧复氧组(A/R组):正常孵育24 h后行缺氧10 h复氧2 h;羟基红花黄色素处理组(A/R+H组):正常孵育24 h后行缺氧10 h同时加用HSYA,后复氧2 h;Mst1si RNA后缺氧复氧组(Mst1si RNA+A/R组):小干扰转染后6 h,换正常培养基,孵育18 h,缺氧10 h复氧2 h。收集各组心肌细胞培养基上清测LDH,流式细胞仪检测活性氧水平及凋亡率,Western blot检测Mstl,cleaved caspase-3,Caspase-3蛋白表达变化。结果与Con组比较,A/R组ROS升高,凋亡率增加,活化Mst1的表达增加,cleaved caspase-3蛋白表达增加,差异有统计学意义;与A/R组比较,A/R+H组ROS水平降低,凋亡率下降,P-Mst1蛋白表达下降,cleaved caspase-3蛋白表达减少,差异有统计学意义。与A/R组比较,Mst1si RNA组ROS无明显变化,凋亡率下降,总Mst1及P-Mst1的蛋白表达下降,cleaved caspase-3下降,差异有统计学意义;与A/R+H组比较,Mst1si RNA组ROS水平较高,心肌细胞凋亡率增加,且差异具有统计学意义。结论 HSYA处理能减轻原代心肌细胞的氧化应激水平,减少心肌细胞凋亡,其机制可能部分依赖于抑制Mst1蛋白激活有关,但存在其他通路。     

芍药红花煎剂对肝损伤细胞氧自由基及凋亡因子影响研究

目的:探讨芍药红花煎剂对肝损伤细胞氧自由基及凋亡因子影响。方法:采用皮下注射四氯化碳(CCl4)法制备肝损伤小鼠模型,给予芍药红花煎剂灌胃治疗两周,治疗结束后对大鼠细胞氧自由基MDA和SOD水平,凋亡因子Bc1-2和Bax蛋白表达情况进行检测。结果:与阳性药相比,中剂量与高剂量组MDA水平较低(P0.05),SOD水平较高(P0.05),Fas、Fas L、Bax与Bc1-2蛋白水平较高,Bc1-2/Bax的比例较低(P0.05)。结论:芍药红花煎剂能够明显改善肝损伤小鼠细胞氧自由基MDA和SOD水平,调节凋亡因子Fas、Fas L、Bc1-2和Bax蛋白表达情况,对临床有指导意义。     

红花注射液对冠心病患者甲襞微循环的影响

手指甲襞是覆盖于指甲根部的皮肤皱褶,是临床微血管检查中最常用的部位之一,凡可能发生微血管变化的疾病,如各种原因引起的休克、血液病、急性传染病或严重烧伤等,均能够通过观察甲襞微循环的变化显示疾病的病理变化过程,并观察治疗效果[1].本研究旨在探讨红花注射液对冠心病患者甲襞微循环的影响,为针对性地治疗冠心病提供科学依据.     

南五味子中五味子酯甲的测定

目的建立能够准确、快速地测定南五味子中五味子酯甲含量的HPLC方法。方法采用菲罗门C18色谱柱,流动相为甲醇-水(65∶35),检测波长254 nm。结果五味子酯甲在0.08～0.8μg范围内线性关系良好,平均回收率为99.40%。结论该方法简便、灵敏、准确。