应用微卫星DNA基因分型技术进行双生子卵型鉴定

目的 用微卫星DNA基因扫描和分型技术建立双生子卵型鉴定法。方法 选取69对同性别双生子、6对异性别双生子和17对同胞对,抽提基因组DNA,单盲设计,随机编号后,采用9对荧光标记的,在中国人群中具有高度杂合度的短串联重复序列（short tandem repeat,STR)引物,进行基因扫描和分型分析。根据这9个STR基因型的一致性来鉴别卵型。结果 9个STR基因型完全一致的63对受检者全部为同性别双生子,6对异性别双生子和17对同胞对的STR基因型均不完全一致,另有6对同性别双生子的STR基因型也不完全一致,经计算采用6个或5个STR位点判定同性别同卵双生的可信性分别大于99.6%和99%,采用全部9个位点判定同性别同卵双生的可信性大于99.95%。结论 STR基因扫描和分型技术为在基因组水平上直接判别双生子卵型,提供了一种准确,可靠的鉴定方法,它还有快速,简便等优点。     

变性高效液相色谱与直接测序法在单核苷酸多态性检测中的应用比较

目的 了解变性高效液相色谱（denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)方法,在人类基因组单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP)检测中的灵敏度和精确度。方法 应用DHPLC方法检测了41份样本,并与直接测序法相比较。结果 在41个样本的检测中,DHPLC的检出率达到了100%,在大规模样本的杂合子筛检中,检测的错误率几乎为0。结论 DHPLC技术是一项可用于未知SNP的检测,尤其是在人群中大规模筛查已知SNP的有效手段。     

1977～1996年英国55例囊性纤维化病患者的72例次妊娠结局

本研究在于证实患囊性纤维化病的妇女妊娠的可能性 ,并阐述与母体疾病严重程度相关的产科、婴儿及母体的医疗结局。采用回顾性病例研究 ,研究对象来源于英国的 11个囊性纤维化病中心的妊娠妇女。复习内科和产科病历 ,并按以下项目分类 :母亲囊性纤维化病状况 (如基因型、胰、肝及糖尿病状况 ) ;妊娠前疾病严重程度 (如体重和肺功能 ) ;胎儿结局以及母亲患病情况。主要评价指标包括 :足月妊娠或妊娠失败、胎儿结局和并发症、母亲患病情况 ,如体重改变、肺功能、妊娠期和产后的肺部感染 ,结局与母亲患病严重程度的相关性。囊性纤维化病是一种…     

终止妊娠和清宫时取得的组织是否需要常规送组织学检查

本研究的目的在于评价对于孕 3月内终止妊娠和急诊手术清宫中获得的组织学标本常规行组织学检查的价值。入选者为在孕 3月内经历了药物流产或手术人工流产 ;或因妊娠失败 ,可疑不全流产或不全引产而接受了急诊手术清宫者。主要评价术前临床诊断与术后组织学检查结果之间的关系。在 1576例研究者中 ,1465( 93% )例组织学报告证实取得了妊娠产物。2例 ( 0 .13% )有葡萄胎病变 ,证实了术前的超声诊断。在 0 .5%的药物流产、5%的手术流产、10 %的第二次清宫、12 %的因妊娠失败而行的清宫以及 79%的因不全流产而行的清宫术者中 ,妊娠产物未得到组…     

经脐单腔道腹腔镜治疗先天性肥厚性幽门狭窄的护理观察

目的：探究经脐单腔道腹腔镜治疗先天性肥厚性幽门狭窄的护理效果。方法：随机选取额2013年1月到2013年10月在我院治疗的先天性肥厚性幽门狭窄患儿14例,行经脐单腔道腹腔镜辅助下幽门环肌松解术,并积极做好围术期护理。结果：14例患儿均痊愈出现,术后无出现并发症。结论：经经脐单腔道腹腔镜治疗先天性肥厚性幽门狭窄,良好的围术期护理,可促进患儿的康复。     

重组釉原蛋白的提取和纯化

目的:通过固相化金属亲和层析的方法,获得较高纯度的具有生物活性的重组釉原蛋白。方法:将重组表达质粒pcDNA3.1TM/Am/myc-His(-)B转染至HEK293A细胞中,用G418持续筛选,培养扩增。收集细胞,加入RIPA细胞裂解液,粗提蛋白。通过镍金属螯合层析的方法,纯化目的蛋白,并进行SDS-PAGE和Westernblot检测,检测蛋白纯化程度和产率。将釉原蛋白冻干,-80℃冻存。结果:SDS-PAGE及WesternBlot检测结果表明,蛋白粗提液中有大小约50KDa的重组釉原蛋白表达,经过HisTrapHPcolumn层析,目的蛋白形成了单一条带,纯化率为91.3%。结论:本实验通过固相化金属亲和层析的方法,获得了高纯度的重组釉原蛋白,为进一步研究蛋白质功能奠定了基础。     

睾酮补充治疗中老年男子部分性雄激素缺乏（PADAM）初步研究

目的 评价有PADAM症状而其他方面健康的中老年男子对口服11酸睾酮治疗的疗效。方法 从北京5所医院入选100例50－70岁伴有PADA相关症状而其他方面健康的男子知情同意参加本研究。每例对象接受11酸睾酮120mg/d,2周后改后80mg/d,全疗程8周。治疗前后分别测定BMI,WHR,收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、血清LH、FSH、总睾酮（T）、性激素结合球蛋白、白蛋白（Alb)、胆固醇（Ch)、甘油三酯（Tg）和前列腺特异抗原（PSA）,血清游离睾酮（FT）和白蛋白结合睾酮（Alb-T),根据公式计算。结果 治疗后,症状评分显减低（P＜0．001）,血清LH和FSH被抑制（P＜0．01或＜0．05）,而血清FT、Alb-T、PSA、Ch、Tg和Alb无显改变。WHR、SBP和DBP亦下降（P＜0．01或＜0．001）。结论 （1）2个月11酸睾酮治疗改善了与PADAM相关症状;（2）血清FT和Alb－T水平治疗后有增高,但差异不显,原因可能与治疗方案睾酮剂量偏小和服药与采血之间间隔较长（＞12h）有关;（3）2月睾酮治疗改善了WHR和血压,而且对前列腺和脂质代谢没有不良影响。     

不同病期支气管哮喘血清及PBMC条件培养液IL-8、TNF-α变化

目的：探讨ＩＬ－８、ＴＮＦ－α在儿童支气管哮喘发病中的作用。方法：采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测３５例发作期、１８例稳定期哮喘患儿血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）条件培养液中ＩＬ－８、ＴＮＦ－α水平。结果：哮喘发作期血清ＩＬ－８及ＴＮＦ－α明显增高,随病情缓解逐渐降低,达到或接受对照组水平。与对照组比较,哮喘发作期、稳定期ＰＢＭＣ条件培养液ＩＬ－８、ＴＮＦ－α水平显著增高;无论发作期抑或     

上海汉族人胰高血糖素基因单核苷酸多态性与原发性高血压的相关性

目的：检测人胰高血糖素基因编码区和调控区的单核苷酸多态性（SNP）及其基因型在上海汉族人群中的分布,并分析和原发性高血压（EH）的相关性。方法：用直接测序法和变性高效液相色谱法（DHPLC）进行SNP检测,用直接测序法对EH组和正常血压组（NT）进行SNP基因分型。结果：在胰高血糖素基因的2号外显子（3689位）和3号外显子连接区（5505位）各检测到1个SNP,对其中一个高频SNP（C3689T）的分型结果显示,SNP基因型频率在EH组和NT组间差异无显著性,不同基因型组间血压,血糖,血脂和肾功能等生化指标差异均无显著性。结论：SNP在不同种族中差异有显著性;胰高血糖素基因的C3689T基因型分布在NT和EH间差异无显著性。     

骨髓增生异常综合征骨髓切片中造血细胞凋亡的初步研究

目的 :观察骨髓增生异常综合征 (MDS)骨髓塑料包埋切片中原位细胞凋亡状况。方法 :用 DNA末端原标记 (ISEL)方法检测 33例 MDS患者骨髓塑料冷包埋切片中凋亡细胞 ,缺铁性贫血 15例作对照 ,并对 MDS之 ISEL 阳性细胞经常规染色光学显像镜分析细胞来源。结果 :33例 MDS的凋亡细胞平均为 (38.0 6± 2 4.6 1)个 /m m2 ,对照组为 (19.2± 7.98)个 /m m2 ,P <0 .0 1,差异有极显著性意义。 MDS中低危组 (RA+RAS)凋亡率(43.5 8± 39.40 )个 /mm2 较高危组 (RAEB+RAEB- T) (2 6 .0 4± 2 1.0 2 )个 /mm2 高 (P <0 .0 1) ,差异有极显著性意义。ISEL 阳性细胞主要来源于粒、红、巨三系造血细胞 ;分别占 38.45 % ,2 7.33% ,7.87%。结论 :MDS存在过度凋亡 ;MDS之 RA+RAS组凋亡高于 RAEB+RAEB- T组 ;凋亡细胞主要来源于三系造血细胞。