南通市老年人生活质量的影响因素

目的了解南通市老年人生活质量状况及其危险因素。方法采用分层整群抽样的方法,欧洲五维健康量表及自制量表为调查工具,对南通市986名60岁以上老年人进行调查。结果南通市老年人对行动能力、自我照顾能力和焦虑或沮丧的满意度较高,对躯体疼痛或不适以及日常活动的满意度较低,且每个维度得分均是男性好于女性(P<0.05)。多因素分析显示南通是老年人生活质量的影响因素依次是居住方式、慢性病个数、体育锻炼、年龄、性别和职业。结论鼓励老年人适当参加体育锻炼,建立和谐的社会关系,提高老年人生活质量。     

脱氧胆酸对HBV复制及肝癌细胞自噬影响的研究

目的 观察脱氧胆酸(deoxycholic acid, DCA)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)复制的影响,及其对肝癌细胞自噬的影响程度,探讨其可能的作用机制。方法 观察不同浓度DCA对HepG2及HepG2.215细胞活性的影响,进而测定不同浓度DCA对HepG2.215细胞HBV DNA的载量及HBsAg、HBeAg和HBcAg表达水平的影响,蛋白免疫印迹检测自噬水平;将HepG2.215细胞转染乙型肝炎病毒X(HBX)蛋白突变表达质粒后,观察HBX对DCA处理的HepG2及HepG2.215细胞的HBV DNA载量以及HBsAg、HBeAg和HBcAg表达水平的影响,蛋白免疫印迹检测细胞自噬水平。结果 (1)CCK-8实验结果显示随着DCA浓度的升高,细胞活力均呈现梯度下降趋势(P<0.01);(2)HepG2.215细胞的HBV DNA载量以及HBsAg、HBeAg、HBcAg水平均随着DCA浓度的提高而上升(P<0.01);(3)HepG2与HepG2.215细胞的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(P<0.01),HepG2细胞的...     

1型HIV感染多重PCR检测方法的建立

重复性,能覆盖我国最主要的流行病毒株.     

BCL—2蛋白不能抑制VP16诱导的乳腺癌细胞（Bcap37）凋亡

目的 为了解BCL—2在Bcap37细胞表达增高能否抑制足叶乙甙诱导的细胞凋亡,把重组的逆转录表达载体pLXSN—bcl—2和pLXSN—neo转染Bcap37细胞,经G418筛选获得表达细胞(Bcap37—bcl—2,Bcap37—neo)。方法 经RT—PCR和Western blotting检测bcl—2基因的表达,并用不同浓度的VP16处理两种细胞16小时,经细胞形态观察、细胞凋亡原位显示、MTT实验检测细胞的凋亡变化。结果 两种细胞的凋亡变化没有显著差异。结论 BCL—2高表达不能阻滞VP16诱导的Bcap37细胞凋亡,这与我们以前所做的关于BCL—2能阻滞VP16诱导的K562细胞凋亡作用相反,推测BCL—2的抗凋亡作用可能和细胞类型有关,可能还有其它因素参与BCL—2对细胞凋亡的调节。     

转染野生型p53对乳腺癌细胞所致细胞凋亡的研究

为研究ｐ５３对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响,用重组人野生型ｐ５３全长ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体转染Ｂｃａｐ３７细胞,观察其增殖的凋亡变化。方法 应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测Ｂｃａｐ３７细胞表达变化,流式细胞仪计数检测细胞增殖及周期变化,ＭＴＴ及苔盼兰计数观察紫外线刺激后细胞存活率差异,ＤＮＡ末端原位标记技术检测细胞凋亡变化。     

壮骨颗粒含药血清对兔骨髓基质干细胞体外增殖及分化的影响

研究壮骨颗粒含药血清对骨髓基质干细胞体外成骨活性的影响。方法:采用体外细胞培养技术,采用壮骨颗粒对细胞进行体外诱导培养,并设置空白血清对照组,进行MTT、免疫组织化学染色及ALP测定,观察壮骨颗粒对骨髓基质细胞的诱导作用。结果:在促细胞增殖方面:实验组作用显著(P<0.01),在第3d开始增殖,第6d达到平台期;而对照组对数增殖期明显延长(P<0.01);在促细胞分化方面:壮骨颗粒血清组在2d、3d、5dALP活性水平高于对照组(P<0.01)。常规形态学观察,壮骨颗粒组诱导的细胞在形态上类似于成骨细胞,免疫组化染色提示诱导细胞具有骨细胞表型。结论:壮骨颗粒组应用可促进细胞增殖,并诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化。     

LC-MS/MS定量分析小鼠肝组织15种胆汁酸成分研究

目的 建立快速高效的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定小鼠肝组织15种胆汁酸(BAs)浓度。方法 采用活性炭制备无BAs的空白肝组织,作为制备标准样品和质量控制样品的生物基质。匀浆小鼠肝组织,加入碱性乙腈溶液(5%NH₄OH))沉淀蛋白。以²H₄-DCA,GUDCA-d₅和LCA-d₄为内标物,用Agilent Poroshell 120 EC C18色谱柱(100 mm×4.6 mm, 2.7μm)分离,以醋酸铵水溶液和甲醇-乙腈溶液为流动相梯度洗脱,柱温30℃,流速0.3 mL/min,进样量为2μL,采用电喷雾离子源(ESI)负离子模式,多反应监测(MRM)。结果 15种BAs线性关系良好,R²均大于0.993,定量检测限均小于2 ng/mL,基质效应为90.76%～109.25%;日内、日间准确度和精密度均小于15%, 4℃24h、反复冻融、冷冻保存1个月稳定性良好,满足生物样品的分析要求;小鼠肝组织检测结果显示游离型BAs和结合型B...     

慢加急性肝衰竭不同预后患者血浆外泌体差异蛋白的生物信息学分析

目的筛选不同预后慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血浆外泌体中的差异蛋白,分析其功能及生物学过程,为患者临床诊断提供参考依据。方法前瞻性选取2019年7月—10月于首都医科大学附属北京佑安医院住院确诊的ACLF患者10例,随访90 d,患者死亡或肝移植归入肝移植/死亡组(n=5),患者存活归入生存组(n=5),两组一般资料指标比较采用Mann-Whitney U秩和检验。采用非标记(Label-free)定量蛋白质组学技术对血浆外泌体蛋白进行鉴定和定量分析,筛选差异蛋白并进行功能富集分析,使用R-3.5.1软件对差异蛋白进行层次聚类分析,分析其参与的生物学过程。结果外泌体蛋白质组学分析共鉴定出860种蛋白,以倍数上调>1.2倍或下调>1.2倍且P<0.05的标准筛选出差异表达蛋白116种,与肝移植/死亡组相比,生存组上调蛋白62种、下调蛋白54种。生物信息学分析结果显示,这些蛋白主要参与了免疫反应、信号转导、囊泡介导的转运、细胞死亡和增殖等生物学过程,并与炎症反应、糖类和氨基酸代谢、肝细胞损伤及再生等信号通路密切相关。结论非标记定量蛋白质组学技术筛选出的差异蛋白可能作为ACLF早期诊断及预后判断的血清学标志物。     

血清GPC3联合AFP对原发性肝癌的诊断价值探讨

原发性肝癌已成为肿瘤相关性死亡的首要原因，早期诊断是改善预后的关键。AFP联合肝脏超声筛查和随访是早期诊断的主要途径，但对慢性肝病基础上较为常见的良性病变与小肝癌的鉴别仍较困难。AFP低水平升高仅预示肝癌的可能，不具有诊断价值。AFP〉200ng／ml作为诊断肝癌cutoff值，敏感性仅为20％-45％。AFP-L3等对肝癌有很好的特异性，但是敏感性也低。磷脂酰肌醇硫酸类肝素蛋白聚糖-3（glypican-3，GPC3）是通过磷脂酰肌醇（GPI）锚定于细胞膜表面脂质的硫酸类肝素蛋白聚糖，参与调节胚胎生长发育。国外研究显示GPC3在80％-90％肝癌组织中表达水平显上调，在正常成人组织和其它肿瘤中低水平表达或不表达，约50％肝癌患血清中亦可检测到升高水平的可溶性GPC3蛋白，是一个值得期待的肝癌特异性标志物。GPC3联合AFP测定可以显提高敏感性而不影响特异性，在相对早期的肝癌中也有一定的阳性率，有利于肝癌的早期诊断。本采用ELISA测定肝癌和肝硬化患血清GPC3水平，探讨单独GPC3及联合AFP对原发性肝癌的诊断价值。[第一段]