鼻咽癌患者四种血清自身抗体诊断价值的研究

目的 以血清蛋白质组学方法筛选到的4种鼻咽癌患者自身抗体(Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3)为对象,分析其诊断鼻咽癌的价值.方法 通过对封闭条件、抗原浓度及血清稀释度等条件进行优化,建立鼻咽癌患者血清自身抗体的ELISA检测方法,采用该方法分别检测Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3自身抗体在36例鼻咽癌患者、20例其他肿瘤患者及20名健康人血清中的浓度,采用统计学方法分析其判别鼻咽癌的敏感度和特异度.结果 鼻咽癌患者血清中4种抗体的含量明显高于健康人(鼻咽癌患者CK19、Rho-GDI-2、HSP70、LAP3的A450值分别为0.188 8±0.047 3、0.240 5±0.024 7、0.116 8±0.025 3、0.2769±0.0442;健康人A450值分别为0.010 5±0.0044、0.1053±0.016 9、0.098 6±0.014 0、0.149 8±0.033 1;F值分别为4.869、15.919、10.331、6.369;P值分别为0.010、0.000、0.000、0.003).Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3抗体判别鼻咽癌的敏感度分别为85.0%、75.0%、75.0%和75.0%,特异度分别为58.9%、80.4%、58.9%和57.1%准确性分别为76.8%、76.8%、69.6%和67.9%.以单个自身抗体作为判别鼻咽癌的指标,Rho-GDI-2抗体具有更高的敏感度,而HSP70抗体的特异度最高.4种抗体联合应用,判别鼻咽癌的敏感度和特异度可达94.4%和95.0%.结论 采用ELISA方法检测Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3自身抗体有助于鼻咽癌的筛杳和诊断.     

采用血清蛋白质组学方法筛选能诱发自身抗体的鼻咽癌相关抗原

目的 采用血清蛋白质组学方法筛选能诱发机体产生自身抗体的鼻咽癌(NPC)相关抗原,以便为NPC诊断和治疗提供候选标志.方法 收集19份NPC组织,采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离组织总蛋白质,每份组织样本同时做3块2-DE胶,其中将1块2-DE胶作为制备胶进行考马斯亮蓝染色,另2块2-DE胶采用半干式电转法将胶中的蛋白转至PVDF膜上,并分别与NPC患者自身的血清和健康人血清进行2-DE免疫印迹分析,识别能与多数NPC患者血清反应而不与或很少与健康人血清反应的蛋白质点,再从制备2-DE胶中切取相应蛋白质点,进行基质辅助激光解吸电离飞行时问质谱(MOLDI-TOF MS)和电喷雾电离四级杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)分析,获取肽质量指纹图和肽序列标签,数据库搜索鉴定蛋白质.结果 鉴定了13个能诱发机体产生自身抗体的NPC相关抗原:热休克蛋白70(HSP70)、人血清白蛋白(HAS)、热休克蛋白60(HSP60)、细胞角蛋白15(CK 15)、亮氨酸氨基肽酶(LAP 3)、α-烯醇化酶(α-enolase)、ErbB3结合蛋白(EBP1)、细胞角蛋白19(CK 19)、核糖体蛋白P0(RPP 0)、丙酮酸脱氢酶E1(PDE 1)、GTP结合调节蛋白(GNBP)、抗增殖蛋白(prohibitin)和Rho GDP解离抑制因子2(Rho-GDI 2),13种蛋白质点在21%的鼻咽癌患者中可见,而健康人中缺乏或出现频率较低.结论 本研究筛选到13个NPC相关抗原,这些抗原能诱导患者产生自身抗体,这些抗体有可能成为NPC诊断标志和治疗靶标.     

早期颅骨修补术与脑室腹腔分流术治疗脑外伤临床效果比较

目的 探讨临床中早期颅骨修补术和脑室腹腔分流术治疗脑外伤的临床效果.方法 将70例脑外伤开颅去骨瓣减压术后并脑积水患者采用数字表法随机分为两组,对照组35例先行脑室腹腔分流术,并在术后3～6个月行颅骨修补术治疗;研究组35例在术后2～3个月一次同时行早期颅骨修补术与脑室腹腔分流术治疗.观察两组的临床治疗效果.结果 研究组术后GCS优良率（71.4％）显著高于对照组（57.2％）（x2 =7.47,P＜0.05）,良好率显著高于对照组（x2=8.35,P＜0.05）,中残率显著低于对照组（x2 =7.33,P＜0.05）,并发症发生率（14.3％）显著低于对照组（34.3％） （x2 =7.35,P＜0.05）.结论 对脑外伤患者采取早期行颅骨修补术与脑室腹腔分流术治疗能够有效促进患者康复,并且降低术后并发症.     

重组CKB真核表达载体的构建及其稳定转染NCI—H520细胞系的建立

目的构建pEGFP—N1－CKB真核表达载体并将其稳定转染到肺鳞癌细胞NCI—H520中,建立稳定转染的NCI—H520细胞系,为后续研究奠定基础。方法以人CKBcDNA文库为模板,用PCR扩增人CKBcDNA的编码区,并将扩增的cDNA片段与载体连接后亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。重组子经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术将其导入到人肺鳞癌细胞系NCI—H520,经G418筛选并建立稳定的转染细胞株,应用Westernblot检测转染前后该细胞株CKB基因的表达。结果pEGFP—N1－CKB经酶切鉴定及DNA测序证实序列完全正确,真核表达载体构建成功;经Westernblot检测,重组质粒转染株中CKB基因的表达水平明显高于对照组,证实CKB基因已稳定转染到NCI-H520细胞中并得到表达。结论成功构建了pEGFP—N1－CKB真核表达质粒,建立了稳定表达CKB的NCI-H520细胞系,为进一步研究CKB的生物学功能奠定了基础。     

Warburg效应与动脉型肺动脉高压的研究进展

肺动脉高压(pulmonary hypertension)是一种进展性疾病,病理生理学机制复杂多样^[1],其血管特征在于内皮功能障碍、内膜增生、原位血栓形成、炎性细胞浸润以及广泛肺血管重塑^[2-5]。有氧糖酵解又称Warburg效应,是导致动脉型肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)发生发展的重要机制之一^[6-8]。目前研究指出肺动脉内皮细胞(pulmonary artery endothelial cell,PAEC)、肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PASMC)、肺血管成纤维细胞及右心室心肌细胞等发生的Warburg效应均在PAH的发生发展中发挥重要的调控作用,但其相关分子机制并不完全一致。     

激光捕获显微切割纯化的人正常支气管上皮与肺鳞癌组织的定量蛋白质组学研究

目的:建立肺鳞癌(human lung squamous carcinoma,HLSC)组织与正常支气管上皮(normal human bronchial epithelial,NHBE)组织的差异蛋白质表达谱.方法:运用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术从HLS...     

GSS系统脊柱内固定治疗胸腰椎骨折

目的 探讨GSS系统脊柱内固定治疗胸腰椎骨折的方法和效果.方法 GSS系统脊柱内固定加植骨治疗胸腰椎爆裂骨折25例.结果 随访12～24个月,术后椎体前缘压缩高度、椎体后缘压缩高度、Cobb角、椎管面积较术前明显恢复.GSS治疗4周后脊髓神经功能恢复显著.无医源性神经损伤、无切口感染、无断钉、固定器松动,以及术后矫正丢失.结论 该技术大大简化了手术操作的难度,有效防止椎弓根螺钉断裂、松动及术后矫正丢失.     

S100A9和NMP238在同时放化疗 敏感性不同宫颈癌中的表达及意义

目的：初步探讨钙结合蛋白A 9（S100A9）和核质蛋白238（NMP238）的表达在宫颈癌同时放化疗敏感性中的意义。方法：收集治疗前的中晚期宫颈癌组织标本,置-80 ℃超低温冰箱中保存,病理诊断均为中分化鳞癌。在进行同时放化疗后,根据世界卫生组织实体瘤疗效判断标准,将收集的宫颈癌组织标本分为高敏感组和低敏感组。提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析鉴定差异表达蛋白。然后分别应用 Western印迹和免疫组织化学方法检测组织中的蛋白表达。 结果：筛选得到在同时放化疗敏感性不同宫颈癌组织中差异表达蛋白S100A9和NMP238, S100A9蛋白在高敏感组中高表达,NMP238在低敏感组中高表达。Western印迹检测结果与蛋白质组学结果一致。免疫组织化学结果显示S100A9在高敏感组中的表达强度和表达率（88.3%)均显著高于低敏感组（28.6%),NMP238在低敏感组中的表达强度及表达率（35.0%)显著高于高敏感组（85.7%)。 结论：S100A9和NMP238的表达与宫颈癌同时放化疗敏感性有关,可能作为同时放化疗敏感性预测的标志物。     

Stathmin蛋白在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨Stathmin蛋白在鼻咽癌（NPC）中的表达及其与临床病理之间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测98例NPC和30例正常鼻咽黏膜上皮组织（NNET）标本中Stathmin蛋白的表达。结果Stathmin在NPC中的表达较NNET上调（P〈0.01）;与高分化和中度分化的NPC比较,原发NPC中Stathmin蛋白在低未分化NPC中的表达明显上调（P〈0.01）,Stathmin在Ⅲ～Ⅳ期NPC病例中的表达较Ⅰ～Ⅱ期病例明显上调,Stathmin表达水平越高,越易复发（P〈0.01）,Stathmin表达与NPC的分化程度、TNM分期及复发相关（P〈0.01）;不同性别、年龄组患者NPC组织中Stathmin蛋白表达无明显差异（P〉0.05）。结论Stathmin在NPC组织中高表达,其高表达与NPC分化、临床分期、进展及复发相关（P〈0.01）,提示Stathmin在NPC发生发展过程中可能起着一定作用,检测Stathmin对NPC的诊断及预后判断均有重要意义。     

带蒂皮瓣联合负压封闭引流修复四肢软组织缺损

目的 探讨带蒂皮瓣联合负压封闭引流修复四肢软组织缺损的手术方法及治疗体会.方法 自2010年9月至2011年3月,共收治四肢软组织缺损病例9例,创面经封闭负压吸引7～ 10d后,再次手术行腓肠肌皮瓣或带深筋膜蒂皮瓣局部转移修复.结果 9例均顺利成活,创面一期修复.术后随访5～7个月,皮瓣移植区组织及植皮区全部成活,色泽、质地外观满意.患肢恢复一般触、痛觉,冷热觉,活动功能良好.结论 采用带蒂皮瓣联合负压封闭引流对四肢软组织缺损进行修复效果良好,明显缩短疗程,是一种良好的手术选择.