小儿疫苗和“糖丸”说再见

到2018年,在中国,预防小儿麻痹的“糖丸”,将被注射用脊灰灭活疫苗所替代,而且是免费注射。医生来到幼儿园,一个挨一个地给小朋友分派糖丸,那糖丸吃起来甜甜的。     

人胎盘叶酸受体蛋白的提取、纯化及鉴定

目的 建立人胎盘叶酸受体蛋白的提取及纯化方法,并对其进行定性定量检测. 方法 采集医院分娩的正常人的胎盘样品.将胎盘剪碎,组织匀浆,酸化及中和,过柱提纯,组分鉴定,除杂并用分子筛进一步纯化.利用Bradford检测蛋白浓度,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法进行蛋白分子量检测,用Western Blot对提取蛋白进行定性鉴定. 结果 用于本实验的胎盘湿重370 g.在经过亲和层析柱抽提后的8个留样组分中,组分2～5含有目的蛋白的粗提物.经过分子筛等方法除杂后,Bradford蛋白检测显示本次共提取蛋白总量345 μg.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法结果证实此蛋白分子量大约为35 ～40 KDa.Western Blot方法显示此蛋白与叶酸受体抗体特异结合. 结论 使用本研究方法能够从人胎盘中成功提取并纯化人源的叶酸受体蛋白,每100 g胎盘可提取叶酸受体蛋白93 μg.本研究为以后的叶酸受体抗体检测奠定了基础.     

甲肝灭活疫苗在特殊人群中的应用

摘要：随着我国甲型肝炎疫苗计划免疫的实施,甲型肝炎的发病率在迅速下降。对于特殊人群如静脉注射
毒品者、男同性恋、ＨＩＶ 感染者、慢性肝病患者等的免疫策略仍未明确。国内外相关研究显示,特殊人群
往往暴露甲型肝炎病毒后发病风险较高,接种甲型肝炎疫苗后应答反应较差,且疫苗保护时间相对较短,
对此类人群应按何种免疫程序接种才能达到较好的保护效果,仍需进一步研究。建议特殊人群的甲型肝炎
疫苗免疫列入国家免疫策略之中。
关键词：甲型肝炎灭活疫苗;吸毒人群;慢性肝病患者;ＨＩＶ 感染者;男男性行为者
中图分类号：Ｒ１８６　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０４ ０３６８ ０４     

人促血液血管细胞生成素的高效表达和快速纯化

目的 构建人促血液血管细胞生成素（HAPO）的表达载体，获得纯化的HAPO蛋白并研究其生物学功能。方法 通过PCR方法扩增人HAPO基因，克隆于不同的原核表达载体，ITPG诱导融合蛋白表达。NTA层析柱纯化融合蛋白，再经肠激酶裂解融合蛋白，阳离子交换层析纯化，得到纯化的重组蛋白。用培养的MO7e和ECV-304细胞检测蛋白活性。结果 HAPO可在pET32C中，获得稳定高效的可溶性表达。在Ecoli BL21（DE3）中，HAPO表达量可占菌体总蛋白的10％左右。重组蛋白80％是以可溶性蛋白形式存在。NTA层析柱纯化得到的HAPO融合蛋白，再经肠激酶裂解，阳离子交换层析纯化，得到90％以上纯度的重组HAPO蛋白，并且具有良好的生物学活性。结论 得到具有90％以上纯度的重组HAPO蛋白，而且，对MO7e和ECV-304细胞具有促增殖的作用。我们获得了纯化的人重组HAPO蛋白，为进一步研究其功能及临床应用打下基础。     

FimH重组蛋白的原核表达及纯化

目的：在大肠杆菌中构建并表达3种FimH重组蛋白,并对FimH重组蛋白的培养条件进行优化,制备高纯度FimH重组蛋白。方法：采用原核表达载体pET28a构建出能表达FimH的重组质粒,并分别对诱导温度、IPTG浓度、诱导时间等条件进行优化,以提高重组蛋白的产量和增大其可溶性,最后以亲和层析分离纯化3种FimH重组蛋白。结果：成功构建出表达大肠杆菌（K12,BL21）和沙门氏菌（S．T．）FimH的原核表达载体pET28a—K12／BL21／S．T．,经酶切、测序和WesternBlot鉴定,目的蛋白表达正确。在适当浓度的IPTG诱导,15℃震荡培养20h,可使FimH的表达量达到最大,分离纯化的蛋白在SDS—PAGE中显示为一条带。结论：本研究构建以3种FimH为表面呈现系统的表达载体,3种FimH基因和预测蛋白结构略有差异。本研究为后续研究3种蛋白生物活性差异及其靶向M细胞的免疫佐剂活性提供物质基础。     

一种高效的小鼠胰岛分离纯化新技术

目的：探讨获得足够数量和较高纯度小鼠胰岛的分离及纯化方法,为进行小鼠的胰岛移植提供实验条件。方法：将6-8周,体质量25-30g的雄性C57BL/6小鼠腹腔麻醉后结扎胆总管,采用胶原酶Ⅴ逆行灌注、原位消化、Ficoll-400梯度离心并用无菌的毛细吸管在相差显微镜下观察并分选胰岛,双硫腙（DTZ）染色鉴定胰岛细胞。体外培养胰岛单细胞,并于第3、8、24天观察胰岛形态。结果：采用该法分离纯化后,每只小鼠可得到390±20个胰岛,胰岛呈圆形或团块状,直径50-150μm,形态完整,折光性好,纯度达85%以上,24d后在培养皿内铺成单个细胞。结论：本研究所用逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心分离、纯化胰岛细胞的方法省时、高效,培养的胰岛细胞活性好,适合进一步研究的需要。     

治疗碗和输液贴在吸痰护理中的应用

临床护士对气管插管或气管切开的病人每次进行吸痰操作前后使用盐水冲洗吸痰管时,要准备口鼻腔内、气管内两瓶无菌纯化水,以防呼吸道感染及交叉感染。由于无菌纯化水的外观包装一样,且注明口鼻腔内、气管内的字样位于瓶体,不易     

不同脂肪纯化方法在自体脂肪移植隆乳术中的应用效果比较

目的比较不同脂肪纯化方法在自体脂肪移植隆乳术中的应用效果。方法选取2017年1月至2018年6月在周口市川汇区中医院接受自体脂肪移植隆乳术的86例女性,按照随机数表法分为对照组和观察组,每组43例。对照组接受静置沉淀法进行脂肪纯化,观察组接受离心法进行脂肪纯化。比较两组术后2周及术后3、6个月乳房隆起值,统计两组术后6个月脂肪存活率,记录两组手术满意度。结果术后3、6个月,两组乳房隆起值均低于术后2周,且观察组同时间点乳房隆起值均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组术后脂肪存活率[(69.75±7.45)%]高于对照组[(58.39±6.92)%],差异有统计学意义(P<0.05)。观察组手术满意度(93.75%)高于对照组(77.08%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论在自体脂肪移植隆乳术中采用离心法,术中脂肪纯化临床效果更佳,可有效提高术后乳房隆起值和脂肪存活率。     

大孔吸附树脂分离纯化单叶铁线莲总皂苷的研究

目的 研究大孔吸附树脂分离纯化单叶铁线莲总皂苷的工艺条件,为单叶铁线莲总皂苷的工业化生产提供实验依据。方法 采用比色法测定总皂苷;比较了5种大孔吸附树脂的静态饱和吸附量、静态解吸率,筛选出适宜的树脂;对最佳树脂进行动态吸附、解吸试验,确定最佳的吸附洗脱工艺。结果 D-101大孔树脂对单叶铁线莲总皂苷有较好的吸附分离性能。最佳工艺条件为：上样液质量浓度为生药0.2 g/mL,pH值为5,上样体积流量为1 BV/h;4 BV蒸馏水洗脱杂质;4 BV 70%乙醇洗脱总皂苷,洗脱体积流量2 BV/h。按此工艺条件生产的总皂苷质量分数达到71.53%,收率86.02%,精制度达238.81%。结论 D-101大孔吸附树脂适合富集纯化单叶铁线莲中总皂苷。     

聚酰胺树脂纯化油菜花粉黄酮部位工艺研究

目的 研究聚酰胺树脂精制纯化油菜花粉抗前列腺增生黄酮部位工艺及参数。方法 以总黄酮质量分数为考察指标,通过不同条件下聚酰胺树脂对油菜花粉黄酮静态和动态吸附与解吸特性的研究,确定聚酰胺树脂对油菜花粉抗前列腺增生黄酮部位的最佳精制工艺;采用优选的最佳精制工艺对油菜花粉黄酮粗提物进行多次精制,得到高质量分数的油菜花粉抗前列腺增生的黄酮部位。结果 在室温和pH值为10.0,油菜花粉黄酮粗提物质量浓度为8 mg/mL时,以80%乙醇1.5 mL/min体积流量洗脱效果最佳。结论 油菜花粉黄酮粗提物经过聚酰胺树脂精制纯化后黄酮的质量分数由粗品的24.65%提高到74.90%,提高了2.03倍,说明聚酰胺树脂精制纯化油菜花粉抗前列腺增生黄酮部位是可行的。