金鸡毛草提取物经Wnt/β-catenin信号通路促进大鼠Ⅲ期压疮溃疡愈合的作用研究

目的观察金鸡毛草提取物经Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路促进大鼠Ⅲ期压疮溃疡愈合的作用。方法建立Ⅲ期压疮溃疡大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组与金鸡毛草提取物低、中、高(4、8、16 g/kg)剂量组,每组12只。另取12只正常大鼠作为对照组。金鸡毛草提取物低、中、高剂量组大鼠灌胃4、8、16 g/kg的金鸡毛草提取物,灌胃体积10 mL/kg,对照组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,给药周期为2周。给药周期结束后,检测大鼠创面愈合率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠压疮溃疡组织和正常组织病理变化,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法测定大鼠压疮溃疡组织和正常组织中Wnt、β-catenin mRNA和蛋白水平。结果对照组大鼠皮肤组织结构正常,可见大量成纤维细胞及毛细血管;模型组大鼠压疮溃疡组织大量炎症细胞浸润,成纤维细胞及毛细血管数目明显减少,表皮明显变薄;金鸡毛草提取物低、中、高剂量组大鼠压疮溃疡创面组织已经出现结痂,且表皮明显增厚,炎性细胞浸润较轻。与对照组比较,模型组大鼠血清IL-2、IL-4、TNF-α、压疮溃疡组织Wnt、β-catenin mRNA和蛋白水平升高(P <0.05);与模型组比较,金鸡毛草提取物低、中、高剂量组大鼠创面愈合率依次升高,血清IL-2、IL-4、TNF-α、压疮溃疡组织Wnt、β-catenin mRNA和蛋白水平依次降低(P <0.05),呈剂量依赖性(P <0.05)。结论金鸡毛草提取物能加速大鼠Ⅲ期压疮溃疡愈合,减轻大鼠Ⅲ期压疮炎症反应;其机制可能与金鸡毛草提取物可促进大鼠Ⅲ期压疮溃疡组织Wnt、β-catenin mRNA和蛋白的表达进而激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

葱白提取物诱导PGC-1α活化非酒精性脂肪性肝病大鼠线粒体代谢的研究

[目的]探讨葱白提取物通过诱导过氧化物酶体增殖物受体γ辅助激活因子1α(PGC-1α)活化非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠线粒体代谢的机制。[方法]采用高脂饮食造模,将48只雄性大鼠随机分为空白组、模型组、葱白组、空转组、转染组、转染加葱白组,并运用小干扰RNA技术抑制PGC-1α的表达,实验检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测大鼠肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)mRNA的表达情况,观察肝脏组织病理改变,蛋白质印迹法(Western Blot)验证线粒体合成相关蛋白PGC-1α、核呼吸因子1(NRF-1)、线粒体转录因子A(TFAM)和线粒代谢相关蛋白细胞色素c氧化酶B(COX-B)、细胞色素c氧化酶合成蛋白(SCOX)、中链酰基辅酶A脱氢酶(MCAD)的表达。[结果]与空白组相比,模型组大鼠肝脏出现明显脂肪变性;葱白提取物可降低TC、TG、LDL-C水平,升高HDL-C水平(P<0.01),同时ACCase mRNA表达水平降低(P<0.01),CPT-1 mRNA表达水平升高(P<0.01),缓解脂肪肝变性,并上调PGC-1α、NRF-1、TFAM、COX-B、SCOX、MCAD蛋白的表达(P<0.01)。同时,与模型组相比,在转染加葱白组的大鼠中上述检测指标,未见明显变化。[结论]PGC-1α是葱白提取物治疗NAFLD的重要靶点。葱白提取物可通过上调PGC-1α改善NAFLD模型大鼠线粒体功能,维持线粒体呼吸链稳定,从而起到活化线粒体代谢以及改善脂肪肝变性的效果。     

白花蛇舌草提取物对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402体外抗肿瘤活性及作用机制的实验研究

目的研究中药白花蛇舌草提取物对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402抗肿瘤活性及其作用机制。方法采用MTT法检测白花蛇舌草提取物对Bel-7402细胞生长和多药耐药性的作用；淋巴细胞转化实验检测对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖的刺激作用；集落形成实验观察体外抗癌药物的敏感性。结果MTT实验、集落形成实验的结果表明，白花蛇舌草提取物对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402的生长具有明显的抑制作用，且这种作用是剂量依赖关系，IC50为1．6mg／ml。结论①白花蛇舌草提取物可能通过直接影响肿瘤细胞能量代谢，对Bel-7402细胞生长具有明显的抑制作用，而且呈剂量依赖关系；②具有促进小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。     

通关藤提取物通过调控上皮间充质转化抑制前列腺癌细胞的侵袭及迁移

目的探讨通关藤提取物对前列腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响,及其对上皮间充质转化（EMT）的作 用机制。方法采用CCK8 法检测通关藤提取物对前列腺癌细胞DU145、PC3、RM-1 和LNCaP 增殖的影响; 采用划痕实验和Transwell 法检测DU145、PC3 细胞迁移和侵袭情况;采用光学显微镜观察细胞形态学变化, 并用Western Blot 法检测EMT 相关核心蛋白E-钙黏蛋白（E-Cadherin）、β-连环蛋白（β-Catenin）、波形蛋白 （Vimentin）的表达。结果通关藤提取物可以明显抑制PC3、DU145、RM-1 和LNCaP 细胞的增殖,并呈现一 定的时间和浓度依赖性,在作用72 h 后,通关藤提取物对PC3、DU145、RM-1 和LNCaP 细胞的半数抑制浓 度（IC50）值分别为53.45、57.22、44.82、50.95 mg·mL-1。与对照组比较,通关藤提取物（30、60 mg·mL-1）可以明 显抑制DU145 和PC3 细胞的迁移及侵袭能力（P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001）。通关藤提取物干预后, DU145、PC3 细胞的形态发生了明显改变,与对照组比较,EMT 标志物Vimentin 蛋白表达明显下调（P < 0.05,P < 0.01）。结论通关藤提取物能够抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,可能与其下调Vimentin 蛋 白表达,进而抑制EMT 有关。     

藏紫菀不同溶剂提取物的体外抗氧化活性

目的研究藏紫菀不同溶剂提取物的体外抗氧化活性。方法采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、2,2′-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法、超氧阴离子自由基清除法、NO自由基清除法、羟自由基清除法及铁还原/抗氧化能力(FRAP)法,对藏紫菀70%乙醇粗提物、正己烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水提部位等极性部位的抗氧化活性进行评价,同时分析抗氧化活性与总多酚和总黄酮含量之间的关系。结果与粗提物相比,乙酸乙酯、正丁醇部位表现出更强的抗氧化活性,且抗氧化活性与总黄酮和总多酚的含量密切相关,乙酸乙酯、正丁醇部位中总多酚含量分别高达(311.09±7.92)、(320.21±10.69)mg没食子酸/g提取物,总黄酮含量最高可达(667.78±19.18)、(623.97±14.01)mg芦丁/g提取物。乙酸乙酯部位对DPPH、ABTS⁺·、·OH、O₂^-·均具有最高的自由基清除活性,而正丁醇部位的NO清除活性和FRAP值均高于其他部位。结论藏紫菀乙酸乙酯、正丁醇部位具有较强自由基清除能力,是活性优异的天然抗氧化剂,可将其用于天然抗氧化活性单体成分的提取和分离。     

茯苓、枸杞、黄芪提取物和海参冻干粉配伍增强免疫力作用的实验研究

目的:观察茯苓提取物、枸杞提取物、黄芪提取物和海参冻干粉配伍制成混合物的增强免疫力作用。方法:按《保健食品检验与评价技术规范》中免疫力功能检验方法,经口给予小鼠200 mg/(kg·bw)、400 mg/(kg·bw)、1000 mg/(kg·bw)剂量30 d,测定细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能指标及NK细胞活性。结果:高剂量组足跖肿胀度、抗体生成细胞数、半数溶血值、NK细胞活性、吞噬鸡红细胞的吞噬指数均显著高于阴性对照组(P<0.05),实验组能显著提高迟发型变态反应能力、小鼠抗体生成细胞数、血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力和NK细胞活性。各剂量组对小鼠体质量增长、胸腺/体质量比值、脾脏/体质量比值、淋巴细胞增殖能力、单核-巨噬细胞碳廓清能力均无显著影响(P>0.05)。结论:茯苓提取物、枸杞提取物、黄芪提取物和海参冻干粉配伍制成的混合物具有增强免疫力作用。     

银杏叶提取物新配方对高脂血症大鼠的干预效应

背景:调脂治疗在冠状动脉粥样硬化性心脏病的一、二级预防中的作用已得到充分肯定,银杏叶提取物具有一定的降脂作用。目的:建立高脂大鼠模型,观察银杏叶提取物新配方(由银杏总黄酮和银杏内酯组成)对高脂血症大鼠血脂水平的干预及肝脏脂肪变性程度。设计:随机对照观察。单位:复旦大学附属金山医院心内科,苏州大学药学系,苏州中药研究所。材料:选取清洁级 SD 大鼠 60只,适应性饲养 1周后,随机分成 6组:正常对照组、高脂模型组、力平脂 25m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方20m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 40m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组,10只 /组。方法:力平脂 25m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 20m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 40m g/(kg·d)组、银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组均以 10m L /kg 体积于每天上午 9:00～10:00灌服给药,正常对照组和高脂模型组给予等体积的蒸馏水灌服。除正常对照组外,其余各组大鼠于每天下午 1:00～2:00同时以 10m L /kg 体积灌服脂肪乳剂,连续 28d。第 29天各组分别测定血清总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇、血清载脂蛋白 AI、血清载脂蛋白 B。同时取出各组大鼠肝脏进行病理检查,观察肝脏脂肪变性程度。主要观察指标:造模后各组大鼠的血脂情况以及肝脏脂肪变性程度。结果:实验选用大鼠 60只,均进入结果分析。①造模后各组大鼠血脂情况的比较:高脂模型组血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇明显增加,高密度脂蛋白胆固醇降低,与正常对照组比较差异显著(P <0.01),但血清三酰甘油仅有轻度升高(P >0.05);银杏叶提取物新配方 20～80m g/(kg·d)组均可不同程度地抑制大鼠高脂血症的形成,表现为血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇均明显降低(P <0.05或 0.01),并有一定升高高密度脂蛋白胆固醇、血清载脂蛋白 AI及降低血清载脂蛋白 B 的作用,其中银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组最为显著(P <0.05)。②造模后各组大鼠肝脏脂肪变性程度的比较:高脂模型组大鼠的肝病理检查可见弥漫性脂肪空泡;银杏叶提取物新配方 40,80m g/(kg·d)组大鼠肝脂肪变性程度有一定的减轻,尤以银杏叶提取物新配方 80m g/(kg·d)组效果明显。结论:提示银杏叶提取物新配方可有效地纠正高脂血症的脂质代谢,对高脂饮食所致的高脂血症具有良好的预防作用。     

甲钴胺与银杏叶联合治疗神经性耳鸣疗效观察

神经性耳鸣是耳科临床常见疾病，严重影响患者日常工作、学习以及休息，目前治疗方法较多，但疗效欠佳。我们自2005／2007年应用甲钻胺与银杏叶联合治疗神经性耳鸣，疗效满意，现报道如下。     

抗SSA／Ro抗体研究的新进展

1979年Alspaugh等使用培养人淋巴细胞提取物与原发性Sjogren＇s综合征（pSS）患者的血清进行研究。发现该提取物中含有两种新的自身核抗原即SSA和SSB抗原，1979年Alspaugh与Clark又证明SSA抗原与Clark1968年发现的Ro抗原是同一种物质。故命名为SSA／Ro抗原，针对SSA／Ro抗原的自身抗体是已知的核糖核蛋白（fibonudeopro-teincomplex，RNP）抗体中分布最广、最常见的自身抗体之一。     

银杏叶提取物对东莨菪碱所致大鼠空间工作记忆障碍的影响

目的探讨银杏叶提取物对东莨菪碱所致大鼠空间工作记忆障碍的影响。方法将大鼠随机分成三组：正常组，东莨菪碱组和银杏叶治疗组，水迷宫试验，东莨菪碱组按0．4mg／kg腹腔注射，以后每天注射等体积生理盐水，连用1周。正常对照组每天注射与东莨菪碱等体积的生理盐水，连用1周。银杏叶治疗组按10mg／kg腹腔注射，每天1次，连用1周。1周后进行Morris水迷宫试验，观察3组大鼠平台逃避潜伏期，并与试验后第一天比较。结果两次逃避潜伏期在正常组差异有统计学意义（46．4±17．1，13．4±8．2，P〈0．001），东莨菪碱组无统计学意义（23．6±14．3，18．1±9．8，P〉0．05）。银杏叶组差异有统计学意义（27．9±14．3，9．0±3．8，P〈0．05）。结论M型胆碱能受体阻滞剂东莨菪碱能损害大鼠空间工作记忆，银杏叶提取物能改善这种损害，说明银杏叶提取物是通过影响胆碱能系统来发挥其促智作用的。