硫酸核糖霉素分子式中硫酸数目的确定及控制方法的比较

目的：为了确定硫酸核糖霉素分子式中硫酸的数目,并选择适合的方法控制其硫酸盐的含量。方法：建立了高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）对硫酸核糖霉素的硫酸盐（SO4）含量进行测定,并开发出了同样适用的离子色谱电导法（HPIC-CD）进行结果比对。同时采用《中国药典》方法测定硫酸核糖霉素的酸碱度。结果：HPLC-ELSD法,硫酸盐（SO4）在15～250 μg·mL-1范围内线性良好,检测限和定量限分别为0.16 μg和0.25 μg,回收率为101.1%;HPIC-CD法,硫酸盐（SO4）在20～180 μg·mL-1范围内线性良好,检测限和定量限分别为0.17 ng和0.50 ng,回收率为99.8%。结论：两种硫酸盐测定方法,专属性强,灵敏度高,重复性好,测定结果无显著性差异,分子式中硫酸的数目约为1.5,进一步发现,硫酸盐含量和溶液pH值呈显著负相关,并具有一定的线性关系,酸碱度检查可以控制硫酸盐的含量。     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人肝癌细胞株乙酰肝素酶表达的影响

目的:探讨乙酰肝素酶(Hpa)反义寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞株Hpa mRNA和蛋白表达的影响。方法:设计合成互补于Hpa mRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体Oligofectamine~(TM) Reagent包埋后转染SMMC-7721、BEL-7402细胞,以RT-PCR和Western-blot检测转染前后细胞Hpa mRNA以及蛋白表达的变化。结果:与正常对照组和NS-ODN相应浓度组相比,转染AS-ODN组肝癌细胞Hp amRNA和蛋白的表达均下降。结论:Hpa反义寡脱氧核苷酸下调Hpa mRNA和蛋白的表达,可能抑制肝癌的侵袭转移。     

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂（PARPi）治疗卵巢癌：影像学研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)的出现,开启了维持治疗卵巢癌的新篇章,使大部分患者预后得到明显改善。影像学可对患者进行非侵入性全面评估,为临床诊治提供重要信息。本文就PARPi作用原理及影像学有关PARPi治疗卵巢癌进展进行综述。     

帕金森病与肠道菌群的研究进展

<正>帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种常见于中老年人的神经退行性疾病,其特征为α突触核蛋白病变,涉及脑-肠轴的所有区域,包括中枢、自主神经和肠神经系统~([1])。肠道微生物群及其代谢物通过一系列与宿主相互作用,同时整合免疫、内分泌和神经系统,双向过程影响宿主的健康~([1])。实际上,PD的微生物群-肠-脑轴失调可能是明确诊断前多年就出现胃肠功能障碍的基础,同时证实了病理过程从肠道     

Role of nucleostemin in growth regulation of gastric cancer, liver cancer and other malignancies

AIM: To examine the role of nucleostemin in the growth regulation of gastric cancer, liver cancer and other cancers. METHODS: RT-PCR was used to clone the fragment of nucleostemin cDNA from HEK 293 cells. Eighteen kinds of malignant tumor tissues including gastric adenocarcinoma and liver cancer tissues, 3 kinds of benign tumor tissues, 3 kinds of benign hyperplastic tissues and normal tissues were employed to examine nucleostemin gene expression by RT-PCR, Slot blot, Northern blot and in situ hybridization. RESULTS: We successfully cloned a 570 bp fragment of nucleostemin-cDNA from HEK-293 cells. All detected malignant tumor tissues, benign tumor tissues, and benign hyperplastic tissues had high levels of nucleostemin expression. Nucleostemin was also expressed in human placenta tissue at a high level. In terminally differentiated normal human adult kidney and mammary gland tissues, no nucleostemin expression could be detected. CONCLUSION: Nucleostemin can help regulate the proliferation of both cancer cells and stem cells. It might play an important role in the growth regulation of gastric cancer, liver cancer and other cancers.     

消栓肠溶胶囊对大脑中动脉栓塞大鼠远 隔脑区星形胶质细胞活化及凋亡蛋白表 达的影响

目的 观察消栓肠溶胶囊对大脑中动脉栓塞大鼠远隔脑区星形胶质细胞活化及凋亡蛋白半胱氨酸
天冬氨酸蛋白酶（cystein-aspartate protease 3,Caspase-3）及其底物多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶
（poly ADP-ribose polymerase,PARP）表达的影响。
方法 线栓法建立大脑中动脉栓塞模型,雄性SD大鼠90只随机分成假手术组、模型组、消栓肠溶胶
囊（420 mg/kg、140 mg/kg、47 mg/kg）组、阳性对照药脑心通胶囊（600 mg/kg）组,每组15只,连
续灌胃给药15 d,每天给药1次。分别在术后3 d、7 d、12 d、15 d检测前肢抓握力量;术后15 d采用免
疫荧光染色结合图像分析技术检测海马胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）和
Caspase-3、PARP的表达。
结果 大鼠大脑中动脉栓塞第3天、第7天、第12天、第15天前肢抓握力量均较同时间段假手术组大
鼠减小,差异具有显著性（P＜0.01）;大脑中动脉栓塞第15天,大鼠远隔脑区海马GFAP、PARP表达增
强,Caspase-3阳性细胞增多,差异均较假手术组明显（P＜0.05）。消栓肠溶胶囊420 mg/kg治疗后,大
脑中动脉栓塞第7天大鼠前肢抓握力量增加;消栓肠溶胶囊140 mg/kg组大鼠大脑中动脉栓塞第12
天前肢抓握力量增强;大脑中动脉栓塞第15天,消栓肠溶胶囊420 mg/kg、140 mg/kg、47 mg/kg组
和脑心通胶囊组大鼠前肢抓握力量均提高,差异均较模型组显著（P＜0.05）。和模型组相比,消栓
肠溶胶囊（420 mg/kg、140 mg/kg、47mg/kg）组大鼠海马GFAP、PARP阳性表达强度降低（P＜0.01）,
Caspase-3阳性细胞数减少,差异均较模型组明显（P＜0.05或P＜0.01）。脑心通胶囊也可明显下调大
鼠海马GFAP、PARP表达,和模型组比较差异具有显著性（P＜0.01）。
结论 消栓肠溶胶囊可通过抑制星形胶质细胞异常活化,抑制Caspase-3、PARP凋亡信号分子激活,
保护缺血远隔脑区。     

α-突触核蛋白对帕金森病自我免疫病理的影响

帕金森病(PD)是一种以运动功能障碍为主要症状的神经退行性疾病。近年来研究表明PD也属于一种自身免疫病。PD患者脑内炎症反应的增加和血脑屏障的破坏可以促进中枢神经系统和外周免疫系统之间的相互作用。临床研究发现,患者中枢神经系统HLA-DR阳性反应性小胶质细胞增多,胶质细胞明显激活、T淋巴细胞浸润到中枢神经系统、脑脊液和脑组织中炎症因子显著升高,这些现象与患者体内T细胞对α-突触核蛋白产生的免疫反应密切相关。小胶质细胞摄取胞外的α-突触核蛋白后形成抗原肽-MHCⅡ表达在细胞膜上,通过抗原提呈作用影响活化的T细胞或是效应T细胞,活化的效应T细胞分泌不同的细胞因子作用于神经系统,发挥着致炎或抗炎作用。本文就α-突触核蛋白与小胶质细胞中MHCⅡ表达,以及T细胞的后续分化对PD自身免疫病理的影响进行综述,以期为PD的免疫疗法供更多的理论线索。     

百可利通过调控自噬抗帕金森病的作用机制

目的帕金森病是以运动障碍为主的多巴胺能神经元退行性疾病,其特征性病变是神经元内可见路易小体,α-突触核蛋白聚集形成难以清除的寡聚体。细胞自噬有助于清除胞内损伤的细胞器与蛋白,维持细胞稳态,而α-突触核蛋白寡聚体的清除能力下降可能与胞内自噬障碍有关。百可利通过调节氧化应激与炎症反应、促进寡聚体清除等多种途径发挥神经保护作用,而这种保护作用可能与调控自噬过程有关。方法建立鱼藤酮损伤SH-SY5Y细胞模型,考察百可利对SH-SY5Y细胞的保护作用。Western蛋白印迹法考察鱼藤酮损伤与百可利作用后细胞内α-syn变化,并探究不同时间点下自噬标志性蛋白LC3B表达变化。选取适宜的损伤时间,提取不同组别细胞总蛋白,观察不同浓度的百可利对LC3B表达的影响。通过免疫荧光直接观察细胞中LC3B荧光的表达含量,并考察百可利对LC3B荧光强度的调节作用。进一步探究不同组别细胞蛋白中自噬上游AMPK、m TOR与自噬过程中ULK表达变化,考察自噬上游过程是否被激活。结果百可利对鱼藤酮损伤后的SH-SY5Y细胞具有保护作用,不仅提高细胞生存率,还抑制LDH过度释放,抑制细胞内α-突触核蛋白寡聚物积聚。在鱼藤酮损伤的SH-SY5Y细胞模型中,自噬标志性蛋白LC3B表达量随损伤时间增加而增加。鱼藤酮损伤24 h时,受损细胞中LC3B表达明显增加,给予百可利的细胞中LC3B含量显著下调。免疫荧光结果也证明鱼藤酮促进LC3B荧光强度增加,而百可利不仅抑制核损伤,还能降低过度增加的荧光含量。同时,鱼藤酮损伤细胞中自噬调节蛋白AMPK/m TOR/ULK均明显上调,而百可利有助于恢复至正常水平。结论百可利通过提高细胞生存率,降低LDH表达,减少α-突触核蛋白毒性发挥神经保护作用。鱼藤酮损伤促进细胞内自噬过程的活化,百可利在抑制细胞凋亡的同时,还通过调控自噬活化发挥神经保护作用,而这种保护作用与对自噬体与溶酶体合成过程的调控有待进一步探究。     

沉默hnRNP A2/B1基因后通过Bcl-2/Bax影响宫颈癌CaSki细胞的凋亡

目的 探索沉默核内不均一核糖核蛋白A2/B1（hnRNP A2/B1）基因后对宫颈癌CaSki细胞的增殖、凋亡的 影响及其相关作用机制。方法 建立稳定沉默 hnRNP A2/B1 的 CaSki 细胞株,分为未沉默 hnRNP A2/B1 的空白组 （CaSki 组）、转染阴性序列的阴性对照组（CaSki-NC 组）、转染阳性 hnRNP A2/B1 干扰序列的实验组（CaSki-shRNA 组）。运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及蛋白印迹法（Western blot）对各组细胞hnRNP A2/B1的mRNA及蛋白表达 水平进行验证,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖能力,细胞克隆实验检测各组细胞克隆形成能力,流式细 胞术检测各组细胞凋亡情况,Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化。结果 与CaSki组、 CaSki-NC相比较,CaSki-shRNA组细胞hnRNP A2/B1的mRNA及蛋白表达水平均明显减低,细胞的增殖能力在48 h 降低,克隆形成能力下降,凋亡率增加,Bcl-2蛋白的表达减低,Bax表达升高（P＜0.01）,而CaSki组与CaSki-NC组之 间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 沉默hnRNP A2/B1基因后能抑制宫颈癌CaSki细胞的增殖能力,且可能通过 Bcl-2/Bax影响宫颈癌CaSki细胞的凋亡。