经颅多谱勒检测兔大脑中动脉微血栓栓子的研究

目的应用经颅多谱勒（TCD）动态检测兔血栓栓塞模型大脑中动脉（MCA）的微栓子信号（MES），观察栓子的负荷量与缺血性脑血管病（ICVD）发生的相关性。方法将实验动物随机分为3组，即A组含3—5个栓子，B组含6-10个栓子，C组为生理盐水对照组。采用自体动脉血微栓子建立兔局灶性脑缺血模型同时TCD监测MES。栓塞后6h进行磁共振成像（MRI）及兔脑组织病理观察。结果A、B组TCD均监测到MES；B组MRI的T1WI、T2WI及病理观察见梗死灶，而A组仅在弥散加权成像（DWI）见可疑小缺血灶。结论TCD实时、动态观察微栓子信号，能预测缺血性脑血管病发生的危险性，为临床及早干预治疗提供科学依据。     

可溶性CD40L联合其他造血细胞生长因子体外扩增人脐血CD34+细胞

目的研究可溶性CD40L(sCD40L)对人脐血CD34 细胞体外扩增和集落形成的影响。方法用磁珠阳性分离纯化法分离脐血CD34 细胞;用造血干细胞体外悬浮培养、集落形成实验以及流式细胞仪检测等方法,观察应用sCD40L对脐血造血干细胞扩增、CD34 细胞增殖及造血集落形成的影响。结果sCD40L能显著增强干细胞因子(SCF)、白细胞介素3(IL-3)、促红细胞生成素(EPO)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对脐血干细胞总数和CD34 细胞的扩增作用,并能促进造血集落,尤其是粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的形成。sCD40L联合其他造血细胞生长因子对脐血CD34 细胞的扩增作用在培养的第7d最显著,当sCD40L浓度为40μg/L时,CD34 细胞的扩增倍数达8.23±1.26。结论sCD40L与SCF、IL-3、EPO、GM-CSF联合应用,对人脐血造血干细胞的体外扩增更为有效。     

PD-L1 在胃癌患者手术前后外周血T 细胞和单核细胞上的表达及意义

目的:检测胃癌患者术前术后外周血细胞表面PD-L1的表达,探讨其表达改变及临床意义。方法:收集44例胃癌患者术前术后和18名健康志愿者外周血标本,流式细胞术检测CD3⁺ CD4⁺ T、CD3⁺ CD8⁺ T 细胞表面PD-1 和PD-L1 以及CD14⁺单核细胞表面PD-L1 的表达。结果:与健康志愿者相比,胃癌患者外周血CD4⁺ T 和CD8⁺ T 细胞表面PD-L1 表达无显著差异[(11.1±6.4)% vs (9.8±5.6)%,P =0.453 2;(13.9±12.0)% vs (12.0±7.1)%,P =0.558 9],而CD14⁺ 单核细胞表面PD-L1 表达水平显著增加[(29.2±16.7)% vs (17.5±9.7)%,P=0.007 3]。但胃癌患者术后CD4+ T 细胞和CD8⁺ T 细胞表面PD-L1 的表达均显著高于术前水平[(15.8±8.2)% vs (11.1±6.4)%,P= 0.001 5;(22.5±13.3)% vs (13.9±12.0)%,P =0.000 2],而术后外周血CD14+单核细胞PD-L1 表达水平并无显著变化[(33.8±17.3)% vs (29.2±16.7)%,P=0.082 8]。同时,胃癌患者手术前后外周血CD4⁺T 和CD8⁺T 细胞表面PD-1的表达无统计学差异[(25.6±9.9)% vs (26.9±8.9)%,P=0.505 5;(26.5±14.6)% vs (29.9±10.4)%,P=0.118 7]。结论:PD-L1 可作为监测原发性胃癌患者的免疫功能和预后评估的有效指标。     

10例急性白血病免疫表型动态观察

采用间接免疫荧光法测定了10例急性白血病细胞在复发或病程中的免疫表型,发现2例免疫表型发生了改变,1例改变在病程中,另1例改变在复发时。认为白血病细胞免疫表型改变并无规律性,在复发和病程中均可发生。     

HER-2在乳腺癌组织中的表达及其与血管生成的关系

采用免疫组织化学法检测人表皮生长因子受体-2(HER-2)在乳腺癌组织及癌旁乳腺组织中的表达水平.结果乳腺癌组织中HER-2蛋白的表达明显高于癌旁乳腺组织(P<0.05),与腋窝淋巴结转移呈正相关(P<0.05);HER-2阳性组织中微血管密度(MVD)显著高于HER-2阴性(P<0.05).提示HER-2在乳腺癌的发生、发展及肿瘤血管生成过程中发挥重要作用.     

γδT细胞在肿瘤免疫中的作用

γδＴ细胞在肿瘤免疫中的作用张学光１９８４年前，免疫学家在研究体液和细胞免疫反应时，并没有注意到γδＴ细胞，后在应用抗Ｔ细胞单抗研究Ｔ淋巴细胞表面受体（ＴＣＲ）基因时，意外地发现了γ、δ基因，从而发现了Ｔ细胞的另一亚型──γδＴ细胞。近十年，许多实验...     

转B7-1基因的人多发性骨髓瘤细胞XG-7在激发杀肿瘤细胞CTL中的作用

为调查B7－1分子在人多发性骨髓瘤细胞的表达是否可诱导出具有抗肿瘤作用的CD8 的CTL，我们用含B7－1基因逆转录病毒载体PTG5192的包装细胞293E的培养上清，感染人多发性骨髓瘤细胞系XG－7（不表达B7－1分子），用新霉素G418选择并经流式细胞仪筛选，获得了稳定高表达B7－1分子的XG－7细胞（命名为XG－7－B7细胞）。在体外增殖实验中，XG－7－B7细胞显示出比母系细胞XG-7对外周血淋巴细胞（PBL）具有更大的刺激活性。表型分析证实XG-7-B7细胞所刺激的PBL是一群T细胞，其表型特征为CD3，CD8阳性，CD25、CD28也高表达，而CD4和CD16几乎不表达。这群细胞可在体外长期培养扩增，并可用作效应细胞。细胞毒实验结果表明：CD8 T细胞可杀死XG－7－B7细胞、母系细胞XG－7和其它肿瘤细胞如K562与Daudi细胞。结果提示，这群肿瘤持异的CD8 CTL细胞对肿瘤的过继免疫治疗具有潜在的应用价值。     

LacZ基因在哺乳动物细胞中的稳定表达及其检测方法

目的：构建含有LacZ标记基因的真核表达载体和稳定表达LacZ的转基因细胞，并建立简易有效的检测方法。方法：采用脂质体转染法将装有LacZ基因的真核表达载体pcDNA3导入鼠成纤维细胞L929，G418筛选LacZ基因稳定表达细胞株，并应用超声波破碎和贴壁细胞悬浮培养的方法来检测转基因细胞的转染率及目的蛋白的表宕。结果：成功构建了稳定表达LacZ基因的转基因细胞，超声波破碎后其上清与β－半乳糖苷酶（LacZ）的底物X－gal反应显兰色；辅有固体琼脂粉的平皿中细胞培养至第4天开始显兰色，并随时间的延长，比率增加，最终可高达100％。结论：LacZ基因在哺乳动物细胞中可稳定表达，建立的检测方法具有简单及重复性好的特点。     

“急淋”白血病细胞与高内皮小静脉及骨髓基质细胞粘附行为的变化

采用改进的小鼠肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）冰冻切片粘附结合实验法和ＭＴＴ法，观察白血病患者尤其是Ｂ细胞性急性淋巴细胞性白血病（Ｂ—ＡＬＬ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外粘附小鼠ＭＬＮ高内皮小静脉（ＨＥＶ）的活性变化及患者骨髓班单个核细胞（ＢＭＭＣ）体外粘附患者骨髓基质细胞（ＳＣ）的活性变化．结果：１．Ｂ—ＡＬＬ，患者ＰＢＭＣ粘附ＨＥＶ的阳性率和强阳性率均低于正常组；２．经抗淋巴细胞功能相关抗原一１（ＬＦＡ—１）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）封闭后，Ｂ—ＡＬＬ患者ＰＢＭＣ对ＨＥＶ的粘附阳性率低于正常对照ＰＢＭＣ经同样处理组及自身ＰＢＭＣ末处理组。抗ＬＦＡ一１ＭｃＡａｂ封闭也能使正常对照ＰＢＭＣ粘附阳性率和强阳性率下降；３．各型ＡＬＬ患者ＢＭＭＣ与患者骨成ＳＣ的粘附率低于正常对照，各型患者组问没有显著差异。     

不借助外科显微镜大鼠肾移植模型的建立

目的建立无外科显微镜下的大鼠肾移植模型。方法分别以Wistar大鼠和SD大鼠作为供受体。从腹主动脉原位灌注412肝素林格平衡液，移植时供体腔静脉与受体腔静脉、供肾动脉带有的腹主动脉瓣与受体腹主动脉行端侧吻合，供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱壁连续缝合。结果共完成68次肾脏移植手术，其中前期42次，主要是摸索手术方法和训练显微外科技术，总结围手术期处理经验。后期26次，手术时间约为2．5h。5只受鼠死亡，其余受鼠均存活超过2周，手术成功率为80．7％。结论该模型手术操作简单、便捷、直观，简化了显微外科技术的设备要求,可运用于移植相关研究。