胰腺癌中OPG表达及与预后的相关性

目的探讨胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的表达与临床病理学特征、KRAS基因突变及预后的相关性。方法收集2008～2012年南京医科大学第一附属医院PDAC标本102例,制作组织芯片,采用免疫组化法检测OPG在PDAC中的表达。采用荧光定量PCR法检测其中46例肿瘤组织KRAS基因第12、13号外显子突变情况。结果肿瘤组织中OPG与癌旁组织相比,其表达更高。46例KRAS基因突变检测中有24例野生型(52.2%),22例突变型(47.8%)。相关性分析显示KRAS基因突变与糖尿病有关(P=0.025),与OPG表达及其他临床病理特征无相关性(P0.05)。Cox单因素生存分析显示组织大小(P=0.008)、分化程度(P0.001)、肠系膜上动脉受侵犯(P=0.043)、肠系膜上静脉受侵犯(P=0.004)、门静脉受侵犯(P=0.033)、术后化疗(P=0.023)、OPG表达(P0.001)与PDAC预后显著相关。Cox多因素生存分析显示OPG高表达(P0.001)是PDAC患者总生存期的独立预后因素。结论 OPG高表达提示PDAC患者预后差,其可以作为PDAC预后的生物学标志物。     

定向诱导人尿液细胞源性多能干细胞向多巴胺能神经元的分化

目的探讨定向诱导人尿液来源诱导性多能干细胞(U-iPS)向多巴胺(DA)能神经元分化。方法单层贴壁法体外培养U-iPS,通过时向性添加TGF-β及BMP信号通路抑制剂,SHH细胞因子,GSK3β抑制剂Chir99021将U-iPS诱导为DA能神经前体细胞(NPCs),通过添加BDNF/GDNF等细胞因子将其进一步分化为DA能神经元。在诱导分化的4个时间点(第0天、7天、14天及25天)采用RT-qPCR和免疫荧光检测多能干细胞标志物Oct4与Nanog的表达;NPCs标志物Nestin、Pax6和Foxa2的表达;DA神经前体细胞标志物Lmx1a和En1的表达;神经元标志物Tuj1的表达以及DA能神经元标志物TH的表达情况。以人皮肤成纤维细胞来源的iPS(F-iPS)向DA能神经元的诱导分化作为对照进行分化效率的比较。结果 U-iPS在第0天表达多能干标志物Oct4和Nanog;诱导第7天能转化为Nestin、Pax6及Foxa2阳性的NPCs;第14天转化为Lmx1a和En1阳性的DA能神经前体细胞;第25天分化得到的神经元样细胞表达神经元标志物Tuj1,其中部分细胞表达DA能神经元标志物TH。各时间点神经类细胞标志物的表达与F-iPS诱导分化得到的神经类细胞标志物的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 U-iPS细胞具有向DA能神经元分化的潜力,能在体外经过诱导分化得到TH阳性的DA能神经元,且与F-iPS向DA能神经元分化的效率无明显差异。     

灌洗液温度对腰麻下经尿道前列腺电切术患者中心体温和血流动力学的影响

目的观察灌洗液温度对腰麻下经尿道前列腺电切术(TURP)患者中心体温和血流动力学的影响。方法选择腰麻下行TURP的老年患者80例,随机分为2组,每组40例。对照组膀胱尿道灌洗液为室温液体(21℃),试验组膀胱尿道灌洗液为加温液体(37℃)。2组患者均连续监测收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)及体温,术中每10 min对患者进行寒战评分并记录。结果对照组患者在手术前体温为(36.79±0.05)℃,手术结束时下降至(34.59±0.14)℃,降低了2.2℃;试验组手术前体温为(36.89±0.04)℃,手术结束时为(36.17±0.59)℃,体温降低了0.72℃,2组患者间体温变化比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组术中寒战发生率(18例,45%)显著高于试验组(6例,15%)(P<0.05)。2组患者血流动力学指标变化比较差异无统计学意义。结论 TURP中应用加温灌洗液(37℃)可有效地预防围术期低体温的发生,减少寒战的发生。     

结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B-ESAT6的融合表达及纯化

目的　融合表达结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B ESAT6 ,为结核病的预防提供有效亚单位疫苗。方法　设计含不同酶切位点的Ag85B和ESAT6引物 ,采用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)的方法从结核分枝杆菌毒株H3 7Rv DNA中分别扩增出相应大小的DNA片段 ,将片段分别与PGEM T easy载体连接测序。将测序正确的Ag85B和ESAT6按照不同的酶切位点克隆入PPROEXHT表达载体 ,挑选出阳性克隆 ,将诱导的表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析 ,同时与含6个组氨酸 (histidine 6×his)的单克隆抗体 (monoclonalantibody ,mAb)进行固定化蛋白质免疫学测定(Western blot) ,将用含Ni 鳌合剂的Ni NTA亲合柱纯化的表达产物免疫小鼠 ,用结核分枝杆菌培养上清滤液蛋白 (culturefiltrateproteins ,CFP)作为抗原 ,酶联免疫吸附试验 (enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。结果　PCR获得的Ag85B和ESAT6序列与基因文库 (GenBank)报道的完全一致。两者在大肠杆菌DH5α株中融合表达的产物约为 370 0 0 ,与预计大小相吻合。Western blot结果显示 ,在相对分子量约 370 0 0处有表达产物与 6×hismAb特异性结合带。表达产物为包涵体 ,通过Ni NTA纯化系统 ,可得到纯化的目的蛋白。Ag8     

新型聚胺基糖表面处理氧化纤维口服吸附剂对肾衰模型鼠的研究

用一种新型聚胺基糖表面处理氧化纤维口服吸附剂（ＣｇｉｔｉｓａｎＤＡＣ）对正常和慢性肾衰模型鼠进行了尿素、氨的体外吸附实验研究，ＣｈｉｔｏｓａｎＤＡＣ在用大鼠胃肠内容物的上清液进行的体外研究中表现出较高的吸附能力。而活性炭Ｋｒｅｍｃｚｉｎ对这些物质的吸附能力则较差。用含５％的ＣｈｉｔｏｓａｎＤＡＣ饲料喂养正常大鼠３周后，其于粪重量、粪内水分含量及粪中含氮量明显增加，而蛋白质表面吸收率则下降。部分结扎肾动脉制成慢性肾衰大鼠模型，用含或不含５％ＣｈｉｔｏｓａｎＤＡＣ的饲料喂养２个月。前者血中尿素氮浓度明显降低，但和后者相比，它们尿中的尿素氮含量无明显差异。提示ＣｈｉｔｏｓａｎＤＡＣ在胃肠道内对尿素和氨的吸附而促进了这些物质在粪中的排泄．ＣｈｉｔｏｓａｎＤＡＣ可降低血浆肌酐浓度，增加肌酐清除率和血红蛋白浓度。而且组织学检查表明服用ＣｈｉｔｏｓａｎＤＡＣ的大鼠其肾小球硬化程度有所减轻。这些观察提示服用ＣｈｉｔｏｓａｎＤＡＣ引起的蛋白质表面吸收率下降，干粪重量、粪内水分含量及其尿毒素排泄的增加，可能在改善慢性肾衰大鼠肾功能方面起着重要作用。     

Hsp16.3的生物学特性及其在结核病研究中的应用

Hsp16．3是由结核分枝杆菌（M.tuberculosis，MTB）hspX基因（Rv2031c、acr）编码的蛋白，最初被认为是免疫显性抗原，后来被确认是一个重要的膜抗原，它的表达与MTB的休眠密切相关。     

2002～2003年米泉市诊所及卫生院消毒质量监测报告

医院消毒是杜绝医院内感染的重要措施,做好医院消毒和灭菌工作对控制医源性感染至关重要.为了解米泉市私人诊所及乡镇卫生院的消毒质量状况,加强消毒管理,我们连续2年对全市170家个体诊所及乡镇卫生院的消毒质量进行了监测,结果报告如下.     

34例~(201)铊心肌显象和冠状动脉造影的对照研究

将34例临床诊断冠心病患者之~(201)铊心肌显象与冠状动脉造影结果作对比。~(201)铊显象之敏感性为81.8%,特异性58.3%。6例冠状动脉旁路手术前后作~(201)铊显象,5例术后改善,1例造影阴性~(201)铊阳性者在心肌活检后诊断为心肌炎。~(201)铊显象敏感性与冠状动脉病变之部位、程度、支数有关。左回旋支病变阳性率低,狭窄严重者阳性率高,受累支数多者阳性率反低,4例造影异常而~(201)铊正常者均系3支病变。1例3支病变者旁路术前~(201)铊阴性,术后反呈阳性,提示缺损还为局部心肌供血比例不平衡之结果。     

吲达帕胺治疗中枢性尿崩症的临床观察

应用吲达帕胺（ｉｎｄａｐａｍｉｄｅ）２．５～７．５ｍｇ／ｄ或双氢氯噻嗪５０～７５ｍｇ／ｄ治疗１０例中枢性尿崩症，治疗后第３天患者日尿量减少近一半，尿渗透压增高１倍多，治疗后第６天上述指标无进一步改善，两种药物的疗效比较无显著性差异。吲达帕胺治疗期间，血压和血清电解质未见明显变化。双氢氯噻嗪治疗后血钾下降。提示吲达帕胺是治疗中枢性尿崩症的一种新的有效药物。     

91例胃粘膜EB病毒感染的检测

ＥＢ病毒是一种肿瘤病毒，与人类鼻咽癌、淋巴瘤关系密切。近年来ＥＢ病毒相关性胃癌在国外已有报道。本文通过胃镜活检，对９１例胃粘膜行ＰＣＲ方法检测ＥＢ病毒感染。一、材料与方法：９１例患者均为我院１９９６年３月～６月门诊及住院胃镜检查者。男５８例，女３３例...