日本脑炎病毒血球凝集和凝集抑制试验的条件

1　材料和方法1.1　材料　血凝板为 2 0孔 U型底塑料硬板 .0 .12 mol·L- 1 HCl浸泡过夜 ,自来水 ,单蒸馏水 (DW)冲洗干净 ,晾干备用 .血凝素制备是用出生 3～ 6 d昆明种乳鼠 ,脑内接种 JEVSA14株 0 .0 2 m L,3d后发病处死 ,取脑加入少许 p H9.0硼酸盐水 (BBS:0 .5 mol· L- 1硼酸 10 0 m L,1.5 m ol· L- 1 Na Cl80 m L ,1mol· L- 1 Na OH 2 4 m L ,DW至 10 0 0 m L ) ,研磨后配成 10 0 g· L- 1脑悬液 ,5 0 0 0 r· min- 1离心 2 0 min,吸取上清分装小塑料管 - 2 0℃保存 .其中少量上清经紫外灯照射 2h灭活后 - 2 0℃保存 .…     

乙型肝炎病毒表面抗原基因在昆虫细胞中表达产物的鉴定

目的 :在昆虫细胞中表达乙型肝炎病毒 ( HBV)的表面抗原。方法 :利用已构建的含有 HBV S基因的重组杆状病毒 Bac- S,在昆虫细胞中进行表达 ,并用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测。结果 :重组杆状病毒感染昆虫细胞后 ,可表达相应大小的 S蛋白 ,且该蛋白可被 HBs Ag特异性单抗 ( m Ab)所识别。结论 :利用杆状病毒表达系统 ,成功地表达了具有生物学活性的 HBV S蛋白。     

锌指蛋白A20 RNAi载体的构建及筛选

目的我们前期的实验结果显示A20 mRNA和蛋白在人脑胶质瘤组织及细胞系（U251、U87、BT325）中高表达，本研究拟构建A20RNAi载体，并检测其对U251细胞A20表达的抑制作用。方法构建三种针对人A20基因的真核干涉表达载体，以脂质体法将其分别转染人脑胶质瘤细胞系U251，以RT-PCR、蛋白印迹法检测各干涉载体对U251细胞中A20mRNA和蛋白表达的抑制作用。结果成功构建三种针对A20基因的RNAi载体，经RT-PCR、蛋白印迹检测筛选出对A20基因干涉效果最佳的载体，命名为pSilencer3．1-A20R1。结论成功构建A20基因干涉载体，为进一步探讨A20与脑胶质瘤恶性增殖、血管形成以及抗凋亡的关系奠定实验基础。     

全面提高教师自身素质是培养跨世纪合格人才的关键

全面加强素质教育是教育改革的需要，是时代的需要，是培养跨世纪合格人才的需要。从八个方面阐述了高校教师在培养合格人才中需加强自身素质培养的重要性。     

METH1在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因激活作用的检测

目的通过观察血管生成抑制因子METH1的cDNA片段在酵母双杂交中的表达及检测其对报告基因有无激活作用，为进一步明确METHI抑制增生性瘢痕的分子机制奠定基础。方法采用酵母双杂交Ga14系统3，经PCR扩增子METH1的cDNA片段，分别克隆入pUC19质粒，经测序正确后。再分别亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中。将重组质粒导入酵母菌AH109，检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因的激活作用。结果成功获得METH1的cDNA片段，该片段所表达的蛋白对酵母菌AH109无毒性，且对报告基因无激活作用。结论血管生成抑制因子METH1蛋白活性区在酵母双杂交系统中的表达产物。可作为诱饵蛋白进行相互作用蛋白的筛选研究。     

HIV毒株分离及体外感染实验研究

目的 从艾滋病病毒(HIV)感染者(万某)分离获得HIV毒株，应用此毒株在体外攻击与HIV感染者长期无保护性行为未引发感染者(张某)及健康人的淋巴细胞，检测病毒感染细胞情况，研究抗感染保护的机制。方法 采用RT测定法和P24抗原检测法。将HIV感染者淋巴细胞与健康人淋巴细胞共培养，并将获得的HIV毒株体外攻击张某及健康人的淋巴细胞，分别观察细胞病变并检测P24抗原及逆转录酶的活性。结果 从万某血中分离获得了HIV—1毒株，连续8周显微镜观察，从第2周开始可见HIV特有的细胞病变，逆转录醇的活性检测和P24抗原检测结果从第2周为阳性，说明病毒分离成功。健康人淋巴细胞自HIV—l感染后2周开始，显微镜可观察到HIV—l持有的细胞病变，逆转录酶的活性检测和P24抗原检测结果均为阳性，表明HIV侵入。张某的淋巴细胞在HIV感染后显微镜下观察，始终未见特有的细胞病变，逆转录酶的活性检测和P24抗原检测结果均为阴性，表明HIV病毒未侵入细胞。结论 分离的毒株可以感染健康人淋巴细胞，说明病毒本身无变异；病毒不能侵入张某的淋巴细胞，可能是其淋巴细胞表面HIV—l受体或辅受体的基因或功能发生突变，导致病毒无法侵入机体。     

基因免疫诱导9.1C3分子因影像类抗独特型抗体的产生

本文分别采用真核表达载体ｐＥＦ－ＢＯＳ及ｐＣＭＶ４构建含起始码和终止码的抗９．１Ｃ３分子单隆抗全重链可变区基因重组表达质粒９．１Ｃ３ＶＨｐＥＦ－ＢＯＶ及９．１Ｃ３ＶＨｐＣＭＶ４，并将其分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠血清对Ｋ５６２细胞进行间接免疫染色和流式细胞仪表明，其因免疫小鼠体内可诱导９．１Ｃ３分子内影像８类抗独特型抗体的产生。     

抗单纯疱疹病毒CHA9—3D8单链抗体三维结构的计算机模建和…

将１株分别来自单纯疱疹病毒ＭｃＡｂ（重链）和出血热病毒ＭｃＡｂ（轻链）的杂化单链抗体基因序列，在ＳＧＩ图形工作站上，利用同源蛋白结构预测的方法，建立起了其三维结构模型，以寻找轻，重链空间结构的相互关系，观察抗体的结构及表面静电性和疏水性的变化。结果表明，杂化链抗体的轻，重链位置得当，轻链参与组成了“疏水口袋”的工有约五分之二的“袋口”部分由其围成，Ｌｉｎｋｅｒ链位置贴切，游离子轻，重链之外，轻，重     

异种胸腺,骨髓联合移植诱导受体免疫耐受

异种胸腺、骨髓联合移植诱导受体免疫耐受胡军１贾赤宇２马文煜１陈璧２蔡振杰３陈志云４张戈４岳小红４（１第四军医大学微生物学教研室西安７１００３３２第四军医大学西京医院烧伤科３第四军医大学唐都医院心脏外科４第四军医大学学员一大队）关键词胸腺骨髓异种移植免...