Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的研究

  目的  探讨Gab2-Akt-ARK5通路在胶质瘤侵袭中的意义。  方法  采用免疫组织化学SP法检测90例胶质瘤组织中ARK5及Gab2表达。采用小RNA干扰转染LN-229细胞株,Western Blot检测瞬时转染后ARK5及Gab2表达。体外侵袭实验检测转染后侵袭能力变化及Western Blot检测Gab2下降后Akt和ARK5的磷酸化。  结果  胶质瘤组织中ARK5和Gab2免疫组织化学阳性结果呈正相关且在高级别胶质瘤（WHO分级为Ⅲ、Ⅳ级）中表达明显高于低级别胶质瘤（WHO分级为Ⅰ、Ⅱ级）。转染ARK5、Gab2、ARK5-Gab2及SCR质粒的LN-229细胞分别称siARK5/LN-229、siGab2/LN-229、siARK5-siGab2/LN-229和SCR/LN-229。其中siARK5干扰效率为70%,siGab2的干扰效率为75%。转染后,与SCR/LN-229相比,siARK5/LN-229中ARK5表达降低,siGab2/LN-229中Gab2表达降低,siARK5-siGab2/LN-229中ARK5和Gab2表达均降低。siARK5/LN-229和siGab2/LN-229侵袭并穿透Matrigel膜基质的细胞数均比对照组少（P < 0.01）,且siARK5-siGab2/LN-229细胞数减少更显著（P < 0.01）。在IGF-1刺激下,siGab2/LN-229中Akt和ARK5的磷酸化减弱。  结论  应用小RNA干扰技术降低ARK5或Gab2表达使LN-229细胞侵袭转移能力降低,同时Gab2表达降低抑制ARK5和Akt磷酸化,提示Gab2-Akt-ARK5通路参与胶质瘤细胞的侵袭。      

内镜大隐静脉获取术学习曲线研究

目的 研究初学者学习内镜大隐静脉获取术(EVH)的可行性及学习曲线.方法 选自2008年1月至2010年2月行择期冠状动脉旁路移植术的患者120例行内镜大隐静脉获取术,按手术时间分为6组,各20例患者.比较获取时间、静脉长度、手术结果等情况.结果 本研究长度-时间指数由G1组的0.41±0.08显著提高到G6组的0.85±0,03,这一变化也就代表了微创内镜大隐静脉获取术(EVH)的学习曲线.下肢伤口并发症的发生率及切口数随着手术例数的积累呈下降趋势,静脉修补个数无差异和组织学评估结果均证实所获取的静脉质量可靠.结论 EVH作为一种新兴技术有着广泛的应用前景,经80～100例的学习之后即可熟练掌握,满足临床实践的需要.     

被动吸烟对大鼠卵巢雌激素受体α、孕激素受体表达的影响

目的:观察被动吸烟对Wistar大鼠卵巢雌激素受体α、孕激素受体蛋白及mRNA的影响,为提倡生育期妇女避免被动吸烟提供理论依据.方法:建立大鼠烟雾吸入模型.健康雌性Wistar大鼠,随机分为空白对照组和实验组.实验组吸烟3个月,对照组正常饲养.3个月后处死2组大鼠.免疫组织化学及免疫印迹法检测大鼠卵巢中雌激素受体α(E...     

社区获得性泌尿系统感染病原菌分布及耐药性分析

目的 调查清华大学社区获得性泌尿系统感染病原菌分布及耐药状况,为临床用药提供依据.方法 收集2007～2009年门诊患者尿液并培养分离得到病原菌.采用琼脂纸片扩散法(K-B法)进行体外药物敏感试验,并对结果进行分析.结果 分离241株泌尿系统感染细菌,其中革兰阴性菌187株占77.6%,革兰阳性菌54株占22.4%,主...     

被动吸烟对雌鼠生殖内分泌激素的影响

目的 观察被动吸烟对Wistar雌鼠血清生殖内分泌激素水平的影响.方法 将32只健康雌性Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,每组16只.实验组被动吸烟3个月,对照组正常饲养.3个月后心脏取血,分离血清,应用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测血清中生殖内分泌激素水平.结果 血清E2,P4,FSH水平与对照组相比差异...     

乳腺癌术后即刻乳房重建对病人生活质量影响的研究进展

从生活质量定义、测量工具及研究现状等方面对乳腺癌术后即刻乳房重建病人的生活质量现状进行综述。指出即刻乳房重建在并发症发生率方面国内外研究存在争议较多,医护人员可全面了解即刻乳房重建病人术后生活质量状况,为病人提供有效和针对性的干预措施,降低病人术后并发症的发生率。     

miR-125a-5p通过GSK-3β/Snail信号通路抑制乳腺癌细胞的上皮-间充质转化

目的:探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)通过GSK-3β/Snail信号通路对乳腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:RT-qPCR检测人正常乳腺上皮细胞与乳腺癌细胞中miR-125a-5p的表达量,同时检测miR-125a-5p质粒在人乳腺癌MDA-MB-231细胞中的转染效率;趋化运动实验与Transwell侵袭实验检测趋化运动能力和侵袭能力;Western blot检测EMT相关标志物的变化,同时检测磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK-3β)的蛋白水平及Snail的转核情况。结果:乳腺癌细胞中miR-125a-5p的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P0.05);miR-125a-5p在转染miR-125a-5p质粒的MDA-MB-231细胞中表达水平明显增高;MDA-MB-231细胞的趋化运动能力在表皮生长因子(EGF)浓度为10μg/L时最强;在EGF刺激下,与MDA-MB-231/NC细胞组相比,MDAMB-231/miR-125a-5p细胞组的侵袭能力明显降低,上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)表达量升高,波形蛋白(vimentin)和p-GSK-3β的蛋白水平明显降低,同时Snail转核受到明显抑制;与MDA-MB-231/miR-125a-5p+Con细胞组相比,MDA-MB-231/miR-125a-5p+GAB2细胞组的侵袭能力明显增强,E-cadherin表达量降低,vimentin和p-GSK-3β的蛋白水平明显升高,同时促进Snail转核。结论:miR-125a-5p可通过GSK-3β/Snail信号通路抑制乳腺癌细胞的EMT,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭能力。     

miR-625-5p通过靶向调控PRKACA促进肺腺癌细胞的增殖和侵袭

背景与目的：肺腺癌是非小细胞肺癌的一种亚型,虽在诊断和治疗方面已经取得了很大进展,但晚期肺腺癌临床预后和总生存仍较差。近年来多项研究表明,miRNA在多种癌症中发挥作用,并在细胞增殖、转移、炎症等生物学过程中发挥重要作用。探究miR-625-5p对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及分子机制,旨在为后续肺腺癌的诊断和治疗提供新的思路。方法：利用GEO数据库查找肺腺癌组织中差异表达的miRNA。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测miR-625-5p在各肺腺癌细胞系中的表达情况,采用EdU细胞增殖实验和transwell侵袭实验研究miR-625-5p对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响;通过生物信息学预测miR-625-5p靶向结合的关键基因;采用蛋白质印迹法（Western blot）检测对蛋白激酶cAMP激活催化亚基α（protein kinase cAMP-activated catalytic subunit alpha,PRKACA）在肺腺癌细胞中的表达情况进行验证,采用双荧光素酶报告基因实验和Western blot分析miR-625-5p与PRKACA之间的靶向关系。Western blot检测共转染敲低PRKACA质粒和敲低miR-625-5p质粒后各组细胞PRKACA的表达情况。采用EdU细胞增殖实验和transwell侵袭实验检测共转染以后各组肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的改变。结果：miR-625-5p在肺腺癌组织（P<0.000 1）和各组肺腺癌细胞（P<0.000 1）中表达上调。EdU细胞增殖实验和transwell侵袭实验结果显示,miR-625-5p能够促进肺腺癌细胞的增殖（P=0.002 3）和侵袭（P=0.000 3）能力。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-625-5p能与PRKACA靶向结合（P=0.000 8）。在肺腺癌细胞中,miR-625-5p与PRKACA的表达呈负相关（P<0.000 1）。miR-625-5p下调能够逆转敲低PRKACA对A549细胞增殖（P=0.011 9）和侵袭（P=0.001 5）能力的促进作用。结论：miR-625-5p在肺腺癌组织和细胞中表达上调,并通过负向调控PRKACA促进肺腺癌细胞增殖和侵袭。     

颈动脉狭窄程度对冠脉搭桥术中大脑动脉血流变化的影响

目的探讨体外循环下冠脉搭桥术中脑血流变化趋势及体外循环转机流量对脑血流的影响。方法选取51例冠心病患者,采集病史根据超声情况中颈动脉狭窄程度分组为:颈动脉狭窄≥50%设定为A组,颈动脉无狭窄或狭窄50%设定为B组。在冠脉搭桥术中分别记录两组患者术前、麻醉后、体外循环时及停机时双侧大脑中动脉(MAC)血流峰值流速;同时观察两组患者体外循环时冠脉搭桥术中平均转流量、平均动脉压和鼻咽温变化。结果冠脉搭桥术前时,两组患者大脑中动脉血流差异无统计学意义(P0.05)。在麻醉后和体外循环时,两组患者脑血流量(CBF)较术前明显减低(P0.05),体外循环时较麻醉后无明显变化(P0.05);手术后脑血流流速CBF较麻醉后和体外循环显著回升(P0.05);但是A组患者在麻醉后、体外循环时和手术后CBF均显著低于B组(P0.05)。体外循环时A组患者平均体表面积转机流量和平均动脉压显著高于B组(P0.05),而鼻咽温变化不明显(P0.05)。结论在体外循环下行冠状动脉搭桥术中,患者大脑中动脉血流在麻醉后显著减低,体外循环时较麻醉后无明显变化,手术后脑血流流速上升。而颈动脉狭窄≥50%患者在麻醉后及手术后较狭窄50%患者脑血流显著减低。     

观摩外科手术对外科护理学实践教学效果影响的研究

目的探讨观摩外科手术对外科护理学实践教学效果的影响,为加强高校护理本科生外科护理学的实践教学效果提供依据。方法正常理论教学后将护生随机分成实验组(75人)及对照组(75人),实验组观摩外科手术,对照组观看手术录像,临床实习结束后对两组护生进行综合评价。结果实验组的理论考试成绩及操作技能考试成绩均明显优于对照组(P<0.05)。调查显示,97.3%的实验组护生认为观摩外科手术能提高实践教学效果,94.7%的实验组护生认为观摩外科手术可以提高学习兴趣,96.0%的实验组护生认为观摩外科手术可以发挥其桥梁作用。结论观摩外科手术既有利于护生理论知识及操作技能的掌握,又有助于调动护生的学习兴趣,从而提高外科护理学实践教学效果。