二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路及相关分子的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎作用的分子机制。方法:将40只SD大鼠随机平均分为正常组、模型组、二陈汤加味组和EVP4593(NF-κB抑制剂)组。以香烟烟雾联合气管滴注脂多糖(LPS)方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味组以10 g·kg~(-1)灌胃(ig),EVP4593组皮下注射1 mg·kg~(-1),正常组、模型组ig等量生理盐水,连续干预14 d。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1),趋化因子(CXCL)-2,CXCL-3和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平,免疫组化(IHC)检测TLR4,MyD88,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)在大鼠肺组织中的定位表达。结果:与正常组比较,模型组肺匀浆中TLR4,MyD88,NF-κB p65 mRNA及蛋白表达均显著增加(P0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著升高(P0.01)。与模型组比较,二陈汤加味组TLR4,MyD88,NF-κB p65mRNA及其蛋白表达均显著减弱(P0.05,P0.01),HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1含量显著降低(P0.05,P0.01)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路相关信号分子基因的表达,以及减少HMGB1,CXCL-2,CXCL-3和MCP-1的释放有关。     

E2F圈套寡核苷酸抑制人视网膜色素上皮细胞增生的实验研究

目的 观察转录因子E2F的圈套寡核苷酸（decoy ODNs）对培养的人视网膜色素上皮(HRPE)细胞增生的影响。 方法 在脂质体lipofectamine^TM2000介导下将不同浓度的E2F decoy ODNs或错义decoy ODNs转入培养的HRPE细胞中，甲基四唑盐比色 (MTT) 法检测其对HRPE细胞增生活性的影响，凝胶迁移率变动分析（EMSA）法检测E2F decoy ODNs与转录因子E2F的竞争结合活性。 结果 0.2 μmol/L E2F decoy ODNs显著抑制HRPE细胞的增生（P=0.002），并在低浓度时呈剂量依赖关系。错义decoy则无此作用。EMSA检测结果显示，E2F decoy ODNs拮抗转录因子E 2F的结合活性。 结论 E2F decoy ODNs能序列特异性地抑制转录因子E2F 的结合活性，进而抑制HRPE细胞的增生活性。 （中华眼底病杂志，2004，20：182-185）     

端粒酶反義寡核苷酸抑制視網膜色素上皮細胞增殖的實驗研究

目的使用脂質體介導的端粒酶反義寡核苷酸封閉端粒酶基因在視網膜色素上皮細胞的表達從而抑制視網膜色素上皮細胞的增殖,爲增殖性玻璃體視網膜病燮的治療探索一條基因治療途徑.方法使用端粒重復序列擴增法(Telomeric repeat amplification protocol,TRAP)定性、定量檢測濃度爲0umol/L、2umol/L、4umol/L、6umol/L、8umol/L脂質體介導的端粒酶反義寡核苷酸及濃度爲4umol/L的正義寡核苷酸在視網膜色素上皮細胞端粒酶活性表達.結果TRAP結果顯示随着端粒酶反義寡核苷酸濃度的增高,視網膜色素上皮細胞端粒酶活性逐漸降低,8umol/L幾乎没有表達,正義寡核苷酸很少抑制視網膜色素上皮細胞端粒酶活性.結論脂質體介導的端粒酶反義寡核苷酸能抑制視網膜色素上皮細胞端粒酶的活性從而抑制視網膜色素上皮細胞的增殖.     

丹参、附子、知母对内毒素血症小鼠一氧化氮系统的影响

目的观察丹参、附子、知母对内毒素血症小鼠的心、肝、肠、肺、肾、血清中一氧化氮(nitric ox- ide,NO)系统的影响,探究这3种中药发挥作用的可能的分子机制。方法通过腹腔注射大肠杆菌脂多糖(6mg/kg)建立内毒素血症模型。分3个时间点(4 h、8 h和24 h)观察每组小鼠心、肝、肠、肺、肾和血清中NO、各型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量变化。结果(1)丹参能显著性升高各组织和血清中的原生型NOS(cNOS)和SOD,降低诱生型NOS(iNOS)。(2)与模型组比较,附子能显著性降低心、肠和肺组织中的iNOS和NO,升高SOD。(3)NG-硝基-左旋精氨酸(N_ω-Nitro-L-arginine,L-NNA)能明显减少各组织和血清中的iNOS、NO和SOD,降低肺、肾组织和血清中的cNOS。(4)与模型组比较,知母能明显升高肝、肺和肾组织中的iNOS和NO,降低SOD。结论丹参和附子通过抑制iNOS的产生,减少其诱导的NO的生成,对内毒素血症的小鼠起保护作用。同时丹参通过增加cNOS,增多有...     

玻璃体手术治疗视网膜脱离合并脉络膜脱离

为了探讨玻璃体手术在视网膜脱离合并脉络膜脱离治疗中的应用,回顾性分析了12例12只眼视网膜脱离合并脉络膜脱离的病例,应用闭合式玻璃体手术,玻璃体腔内应用6mm长灌注针头,切除玻璃体,剥离视网膜前膜,气液交换,周边部下方裂孔置巩膜外填压,调整环扎带,玻璃体注气C3Fe15％。一例患者注入硅油。术前、术后常规全身激素用药。结果12例12只眼术中眼内压迅速重建,脉络膜下腔的液体经三个巩膜切口自行引流,脉络膜复位,无需另外的巩膜切口引流脉络膜下腔的液体,术后随访2～16个月,12只眼全部获得视网膜解剖复位,未诱发术后玻璃体视网膜增殖病变(PVR)。提示玻璃体手术在治疗视网膜脱离合并脉络膜脱离时是优先考虑的术式。     

人增生性视网膜前膜中单核细胞趋化蛋白-1的表达

应用间接免疫荧光法,观察孔源性视网膜脱离合并增生性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）、外伤性网脱合并ＰＶＲ和增生型糖尿病视网膜病变（ＰＤＲ）各４例病例的视网膜前膜中单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的表达。结果表明：３组病例视网膜前膜中均见有ＭＣＰ－１阳性细胞,其细胞大小、形态无明显差别。提示：ＭＣＰ－１存在于ＰＶＲ和ＰＤＲ的视网膜前膜中,并参与这两种病变的形成,表明ＰＶＲ和ＰＤＲ的发病机制与趋化细胞因子及局部免疫反应有一定的关系。     

蜂毒肽与变构hIL－2融合基因原核表达载体的构建

目的构建蜂毒肽与人变构白细胞介素－2原核表达载体，为进一步研究该融合基因而奠定基础。方法以本室构建质粒pGEX－4T-2／Melittin－IL－2（^88Arg）为模板，设计引物，用PCR定点突变的方法将IL-2部分的^125Cys突变为Ala，PCR产物与pMD18-T连接，转化大肠杆菌，小提质粒，DNA测序后再将目的片段连接于pET-15b，最后酶切鉴定。结果PCR产物542bp，构建质粒双酶切、DNA测序鉴定如预期。结论成功构建蜂毒肽与人变构白细胞介素-2原核表达载体。     

Inhibition of PCNA Antisense Oligonucleotides Mediated by Liposome on mRNA Expression and Proliferation of h-RPE Cells

Pro1iferative vitreoretinopathy (PVR), as a blind- ness-causing condition, is a common complication of retina detachment and the main reason that leads to the failure of recovery operation of retina detachment. PVR is essentially an intraocular reactive course of wound healing and principally relevant to pathological prolifera- tion of retina pigment epithelia (RPE). Proliferating cell nuclear antigen (PCNA), expressed in many proliferative tissues, play an important role in the cell cycle…     

三苯双脒和阿苯达唑治疗感染旋毛虫小鼠的疗效观察

目的观察三苯双脒和阿苯达唑对感染旋毛虫小鼠的疗效。方法将85只昆明小鼠(每鼠感染旋毛虫幼虫100条)分成3组,A组(成虫期,即感染后5d)、B组(幼虫移行期,即感染后15d)和C组(幼虫成囊期,即感染后35d)。A组小鼠35只,均分为7组,三苯双脒和阿苯达唑各治疗3组,两药给药剂量相同,分别为顿服6.25、12.5和25mg/kg,另设1组为对照组。B、C两组各25只小鼠,各均分为5组,三苯双脒和阿苯达唑各治疗2组,两药给药剂量相同,分别为100和200mg/(kg·d),另各设1组为对照组。A组小鼠治疗后2d处死,计数小肠内成虫。B、C两组小鼠连续治疗7d,治疗结束后15d处死,剖取全部膈肌,消化液消化,镜下计数幼虫。计算各组平均虫数和减虫率,统计分析各组治疗效果。结果A组,三苯双脒各组平均成虫数均显著少于对照组(P0.01),减虫率分别为63.3%、86.2%和98.5%;阿苯达唑6.25和12.5mg/kg组的平均成虫数与对照组的差异无统计学意义(P0.05),但25mg/kg组的平均成虫数则少于对照组(P0.05),减虫率为41.2%。B组,两种药物平均虫数都显著少于对照组(P0.01),三苯双脒治疗组减虫率分别为64.4%和89.6%,阿苯达唑组减虫率分别为56.7%和78.4%。C组,仅阿苯达唑200mg/(kg·d)组的平均幼虫(成囊期)数显著少于对照组(P0.01),减虫率为71.8%,其余各组均无效。结论三苯双脒对小鼠旋毛虫成虫和移行期幼虫有较好的疗效,但对成囊期幼虫无效。较大剂量阿苯达唑对小鼠旋毛虫成虫、移行期和成囊期幼虫均有效。     

截肢病人围术期的护理

截肢属于破坏性手术,是通过手术切除失去生存能力、没有生理功能、危害人体生命的部分或全部肢体,以挽救病人的生命,术后可通过安装假肢和康复训练改进肢体功能.截肢术常用于严重创伤、肢体感染、肿瘤、神经损伤等致功能长期不能恢复、周围血管病变、肢体先天畸形等已影响功能或无法保留的肢体.截肢后病人面对的是不同程度的肢体缺如,给病人造成极大的心理压力,病人生活自理能力下降,丧失生活的勇气,大多数病人表现出焦虑、恐惧、自卑,甚至产生轻生的念头,对治疗极为不利.护理人员在施行常规护理的同时,应严密观察病人的心理反应,并实施心理干预,使病人尽快恢复健康,使病人早日回归家庭和社会.