黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤组织中MMP2和VEGF表达的影响

目的观察黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤抑瘤效果以及肿瘤组织中MMP2和VEGF表达的影响。方法选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌原位癌动物模型(5组),分为模型组,阳性对照组(顺铂),黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍组(按照2:1),动态测量各组肿瘤体积增长情况,观察抑瘤效果。用免疫组织化学法检测移植瘤组织中MMP2和VEGF蛋白的表达并计算表达率。结果黄芪、莪术配伍组以及顺铂组的移植瘤体积和瘤质量均小于模型组(P0.05),黄芪、莪术配伍组移植瘤体积和瘤质量小于顺铂组、莪术组以及黄芪组(P0.05),莪术组移植瘤体积和瘤质量与模型组相比较无统计学差异(P0.05)。黄芪、莪术配伍组移植瘤体积和瘤质量小于顺铂组(P0.05);与模型组比较黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍组和顺铂组移植瘤组织中MMP2和VEGF蛋白表达水平平均减弱(P0.05)。结论黄芪、莪术配伍使用在实验周期内对人卵巢癌HO-8910抑瘤效果明显(P0.05),其作用机制可能与下调MMP2和VEGF蛋白的表达有关。     

基于关联规则等方法的古今哮喘方中十八反药对的应用分析

探讨古今哮喘方中十八反药对应用特点。建立古今哮喘方数据库,检索含有反药的哮喘方,用频繁项集和对应分析的方法对其年代、药对、药物性味及剂型进行分析。收集到哮喘方剂共1 196首,其中含有反药的方剂为46首,占总方数的3.8%;各朝代含反药哮喘方的比例无显著性差异,宋和金元时期相对较少;方中出现次数最多的反药药对为附子-半夏,其次为附子-贝母、甘草-芫花;配伍关系较密切的为乌头类与半夏。药物性味关系最为密切的是辛热,其次为苦寒;剂型以丸剂应用最多,其次为汤剂、膏剂。结果提示医家在遵循十八反配伍禁忌原则的同时,也有少量的应用,集中在治疗顽固性哮喘的方剂中,并且在反药药对、剂型、配伍药物性味方面具有一定的特点。     

当归补血汤主要吸收成分对GK大鼠肾保护作用研究

观察当归补血汤主要吸收成分对2型糖尿病模型GK大鼠肾保护作用及可能机制。方法 UPLC-MS/MS定性定量吸收入血活性成分(ABCs),确定ABCs组成,定量1g母方中ABCs浓度。GK大鼠按血糖随机分为模型组、当归补血汤组及吸收成分（ABCs）组,每组10只,给药组分别灌胃当归补血汤（4g/kg）、吸收入血的生物活性成分（剂量相当于母方含量,即咖啡酸5.36mg/kg,芒柄花素2.68mg/kg,毛蕊异黄酮2.56mg/kg,阿魏酸1.36mg/kg,黄芪甲苷0.45mg/kg,丁苯酞0.16mg/kg,蒿本内酯0.16mg/kg）,10只普通Wistar大鼠作为空白对照,给予等量生理盐水,每日1次,连续给药28d。观察指标:①肾脏系数、尿总蛋白和尿白蛋白;②肾组织氧化应激;③病理切片观察肾脏组织形态。结果 当归补血汤及ABCs均能够改善糖尿病大鼠的肾脏肥大,显著降低糖尿病模型大鼠尿总蛋白、尿白蛋白和肾脏MDA水平（P<0.05）,显著升高肾脏总SOD活力（P<0.05）,且对肾脏组织病理形态学有保护作用;与当归补血汤组比较,ABCs作用不如汤剂显著。结论 ABCs能够代表母方当归补血汤发挥对GK大鼠的肾保护作用,机制涉及氧化应激。母方中除ABCs外,其微量元素、氨基酸、多糖等其他成分也同时发挥着药效作用。     

养肺活血方对肺纤维化大鼠肺组织血管新生的影响

目的 探讨养肺活血方对平阳霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织血管新生的影响.方法 麻醉大鼠后,经气管软骨环间隙向心端穿刺,气管内注入平阳霉素5 mg/kg建立大鼠肺纤维化模型,假手术组大鼠在同样麻醉条件下气管内注入等量生理盐水.术后第2天开始每天灌胃给药,假手术组和模型组予5‰羧甲基纤维素钠(CMC钠)溶液,地塞米松组予等容积地塞米松蒸馏水溶液,养肺活血组予等容积养肺活血方合剂,灌胃28 d,麻醉处死大鼠,将左肺固定,包埋切片,常规脱蜡,用免疫组化SP法检测肺组织血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD34标记微血管.采用光学显微镜和全自动图像获取系统随机测量并计算平均光密度(IOD)值及微血管密度(Microvascular density,MVD).结果 模型组大鼠肺组织VEGF的水平明显高于假手术组(P＜0.01),养肺活血组肺组织VEGF的水平明显低于模型组(P＜0.01).模型组大鼠肺组织微血管密度明显低于假手术组,养肺活血组肺组织微血管密度明显高于模型组.结论 降低肺组织VEGF的水平和增加微血管密度可能是中药养肺活血方治疗肺纤维化的机制之一.     

小儿艾滋病病因病机探析

小儿艾滋病属中医伏气温病和温疫范畴.其主要病因为疫疠毒邪和精血匮乏.基本病机为疠、郁、瘀、虚,系统病机可概括为疫疠深伏,禀赋虚损;正虚邪恋,气滞血瘀;先天不足,后天失养;疠害邪犯,脏腑亏损;疠毒肆虐,阴阳虚竭.证候病机为疫疠潜伏,精血亏虚;正虚邪恋,痰瘀互结;脾肾气虚,化生无源;疠毒壅肺,气郁血瘀;疠郁心肝,闭窍动风;风热湿毒,浸淫肺脾;正不抵邪,阴阳虚竭.     

Research of Apoptosis Mechanism of NCIH460 Cells Induced by the Effective Component Quercetin in Zhoushi Kejinyan Fang

目的 观察周氏克金岩方有效成分槲皮素诱导肺癌细胞NCI-H460凋亡的相关作用机制.方法 采用Hoechst33258染色及透射电镜(TEM)观察槲皮素诱导细胞凋亡的形态学变化,结合Western blot法检测槲皮素对细胞内EGFR-Ras-Raf-MEK/ERK1/2及凋亡相关通路的影响.结果 各浓度的槲皮素处理细胞24 h后,以25、50μmol/L 2个药物浓度处理组的凋亡特征更为显著,荧光显微镜下可见细胞核或细胞质内浓染致密的颗粒块状荧光;在25 μmol/L槲皮素处理细胞48h后在透射电镜的观察图片中也呈现出了细胞凋亡的特征;Western blot法对信号通路相关蛋白的检测结果表明,12.5μmol/L的槲皮素能显著抑制c-Raf的活化,而在25μmol/L下能促进caspase-3和caspase-7的活化.结论 槲皮素能通过抑制c-Raf的激活,抑制EGFR-Ras-Raf-MEK/ERK1/2信号通路,同时诱导肺癌细胞凋亡.     

四物汤类方养血调经配伍功效探析

四物汤为补血剂的代表方,也是调经基本方,是后世众多补血方的祖方,临床应用广泛.本文探讨基于主证的四物汤配伍功效,以及四物汤衍化方的特点.四物汤具有补血调血之功,其补血作用不仅表现在对血液系统的影响,也包括对神经内分泌系统、妇女特异性生理物质及相关激素水平的影响;其调血之用,具有改善血液流变、维持凝血与抗凝平衡,同时还改善子宫平滑肌状态,其作用机制与调控血管内皮细胞分泌的多种因子相关.类方比较表明四物汤衍化方具有一定相似功效和特征差异,在四物汤基础上,桃红四物汤偏重于活血化瘀,改善血液流变学指标、抑制血小板聚集;香附四物汤偏重于理气止痛,抑制子宫平滑肌收缩频率、收缩幅度以及平均肌张力;芩连四物汤则偏重清热活血,抑制相关炎症因子.深化四物汤类方共性和差异效应表征的认识,有助于对经典方剂配伍应用的深入理解,对临床应用具有指导意义.     

独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG/RANKL蛋白表达的影响

目的:检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞0PG/RANKL蛋白表达的影响,从分子生物学层面探究独活寄生汤治疗骨质疏松症的机理,为独活寄生汤治疗骨质疏松症提供理论及实验依据.方法:体外培养原代SD新生24h大鼠成骨细胞,分别用生理盐水血清对照组、独活寄生汤含药血清低浓度,中浓度,高浓度作用于成骨细胞,采用MIT法检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞生长的影响,Western Blot检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG、RANKL蛋白表达的影响.结果:独活寄生汤含药血清以浓度及时间的依赖方式促进成骨细胞生长;Western Blot结果显示不同浓度的独活寄生汤含药血清能促进成骨细胞OPG蛋白的表达,并且抑制成骨细胞RANKL蛋白的表达.结论:独活寄生汤含药血清可以通过OPG、RANKL系统促进成骨细胞的增殖并且影响成骨细胞的分化.     

环维黄杨星D对大鼠的肾脏毒性

目的观察环维黄杨星D(CVB-D)对大鼠的肾脏毒性及其可逆性。方法 120只大鼠随机分为正常对照组,CVB-D2.5,5和10mg·kg-1组,每组30只。CVB-D组大鼠分别ip给予CVB-D2个月,并于给药后第1和第2个月末每组各取10只大鼠的眼眶血分离血清,检测尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、TammHorsfall蛋白(THP)、β2微球蛋白(β2-MG);收集24h尿液检测N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、微量白蛋白(mAlb)、免疫球蛋白G(IgG)、视黄醇结合蛋白(RBP)、β2微球蛋白(β2-MG)和转铁蛋白(TRF);并做肾脏组织病理学检测。作为恢复期观察,停药4周后每组另10只大鼠做同样检查。结果与正常对照组相比,ip给予大鼠CVB-D1个月后,大鼠血清中的β2-MG明显升高(P<0.01),CVB-D5和10mg·kg-1组的THP含量明显降低(P<0.01),CVB-D10mg·kg-1组大鼠血清中BUN含量升高(P<0.01);同时,CVB-D10mg·kg-1组大鼠尿液中NAG,TRF,β2-MG和IgG含量显著升高,CVB-D5和10mg·kg-1组尿液mAlb含量及RBP含量均显著升高(P<0.05,P<0.01)。持续给药2个月后,CVB-D5和10mg·kg-1组大鼠血清中β2-MG含量显著升高(P<0.05),CVB-D5mg·kg-1组BUN含量明显升高(P<0.05),CVB-D10mg·kg-1组THP含量显著降低(P<0.05);同时,CVB-D10mg·kg-1组大鼠尿液中NAG和IgG含量明显升高(P<0.05,P<0.01),CVB-D5和10mg·kg-1组β2-MG和TRF含量明显升高(P<0.01);病理组织切片显示CVB-D2.5mg·kg-1组部分动物肾小球及肾小管出现坏死的现象,CVB-D5和10mg·kg-1组部分动物出现组织自溶现象。在恢复期,血清及尿液中仍有部分指标显著高于正常对照组,病理组织切片显示CVB-D组仍有部分肾单位出现肾间质内少量炎细胞浸润或不同程度淤血的现象。结论长期应用CVB-D可能引起大鼠肾毒性,且病变在停药后不能彻底恢复。     

成年斑马鱼牙齿的扫描电镜观察

目的用扫描电镜观察研究成年斑马鱼牙齿的形态和超微结构并和人类的牙齿进行比较。方法以成年斑马鱼(鱼龄>3个月)为研究对象,在体视显微镜下,解剖成年斑马鱼腮弓,分离第五腮弓,去净软组织,常规扫描电镜标本制备,日立S-3000n扫描电子显微镜下观察。结果成年斑马鱼牙齿位于第五腮弓上,约11颗功能牙,外形呈锥形,没有牙根,类似人类牙齿的牙尖,也由类似人牙釉质和牙本质样的硬组织包绕其内的牙髓腔构成。斑马鱼牙齿的牙本质层结构疏松,其内有很多贯穿牙面至牙髓腔的孔道,类似人牙齿的牙本质小管,牙本质小管内可见牙本质细胞突,牙髓腔内也有牙髓样软组织结构。结论扫描电镜下,成年斑马鱼牙齿与人类牙齿具有高度相似性,能够模拟人类牙齿的形态和组织特征。斑马鱼作为研究牙发育的模式动物在组织形态上是具有有利条件的。