凝聚IgG及其在循环免疫复合物检测中的应用

自从Dixon等清楚地证明了在动物慢性或急性实验性血清病中,由于抗原过剩而形成的可溶性免疫复合物沉积于血管壁,确认可能与肾炎、关节炎等的发病有关以来,人们对免疫复合物病的研究给予了高度重视。迄今己经证明免疫复合物在类风湿性关节炎、混合冷球蛋白疾病、系统性红斑狼疮、     

莪术二酮对乳腺癌HCC1937细胞迁移和侵袭的影响及机制

目的:探讨莪术二酮对人乳腺癌HCC1937细胞的迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:体外培养HCC1937细胞,分别以12. 5,25,50,100,200,400μmol·L~(-1)莪术二酮处理24,48 h,设空白组,用细胞计数试剂盒法(CCK-8)检测莪术二酮对HCC1937细胞活力的影响;设立空白组,莪术二酮12. 5,25,50μmol·L~(-1)组,细胞黏附实验检测莪术二酮对HCC1937细胞黏附力的影响;划痕愈合实验检测莪术二酮对HCC1937细胞迁移力的影响; transwell小室体外迁移和侵袭实验检测莪术二酮对HCC1937细胞迁移和侵袭力的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测莪术二酮对HCC1937细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶B(Akt)信号通路的调节作用以及对基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平的影响;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测莪术二酮对HCC1937细胞中MMP-2,MMP-9 mRNA表达水平的影响。结果:与空白组比较,莪术二酮12. 5,25,50μmol·L~(-1)组对HCC1937细胞活力无明显影响,莪术二酮100,200,400μmol·L~(-1)组对HCC1937细胞活力有明显的抑制作用(P 0. 05,P 0. 01),且呈时间-浓度依赖性;与空白组比较,莪术二酮12. 5,25,50μmol·L~(-1)组能明显降低HCC1937细胞的黏附率、迁移率、迁移和侵袭细胞数(P 0. 05,P 0. 01);与空白组比较,莪术二酮12. 5,25,50μmol·L~(-1)组能明显下调MAPK和Akt信号通路上关键蛋白蛋白激酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK)和Akt的磷酸化水平(P 0. 01),MMP-2,MMP-9蛋白和mRNA表达显著下降(P 0. 01)。结论:莪术二酮能明显抑制人乳腺癌HCC1937细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与通过下调MAPK和Akt信号通路上关键蛋白ERK,JNK,Akt的磷酸化水平,进而使MMP2,MMP-9表达量下降有关。     

应用小瓶离心培养法分离检测2009年1-6月广州市成人流感样病例相关病毒

目的 应用高通量的小瓶离心法快速分离检测广州市成人流感样病例相关病毒,分析广州地区患有ILI的成人呼吸道病毒感染情况,评价其在临床实验室开展快速病毒培养的意义.方法 采集2009年1-6月广州市成人流感样病例患者标本652份,应用小瓶离心法(包括MDCK、HEp-2、LIE-MK_2和MRC-5 4种细胞),离心接种后,通过观察CPE、血凝(HA)、血吸附(HAD)及直接免疫荧光法(IF)等方法进行病毒分离鉴定.结果 652份成人流感样病例标本中共检出阳性161份,5种病毒病原体,病毒培养阳性率为24.69%,其中甲型流感病毒62株(62/161,38.51%),乙型流感病毒88株(88/161,54.65%),副流感病毒8株(8/161,4.96%),腺病毒2株(2/161,1.24%),呼吸道合胞病毒1株(1/161,0.62%).用小瓶离心培养法发出各种病毒培养报告的平均时间分别为:流感病毒2 d、腺病毒3 d、副流感病毒3 d.结论 (1)离心培养法具有快速、灵敏、高通量的特点,对临床实验室诊断病毒具有应用推广价值.(2)在分离的Iu病原体中,流感病毒占主导,乙型流感病毒为优势毒株,自2009年1月延续至6月,并呈逐步增多的态势,出现夏季高峰.     

益气化痰通络方对股动脉粥样硬化和超敏C反应蛋白水平的影响

目的观察益气化痰通络方对股动脉硬化患者股动脉内-中膜厚度（IMT）和超敏C反应蛋白（hs-CRP）的影响。方法将58例股动脉粥样硬化患者随机分为治疗组和对照组,对照组予降脂药辛伐他汀40mg／d,治疗组在对照组基础上加用益气化痰通络方（黄芪、当归、地龙、桑椹、丹参、茶树根、泽泻、石菖蒲等组成）。疗程均为12周。结果治疗组和对照组均可有效降低血清胆固醇、低密度脂蛋白浓度（P〈0．05,P〈0．01）。治疗组股动脉IMT均值较治疗前明显降低（P〈0．01）,而对照组无明显改变,两组间差异有显著性（P〈0．01）;治疗组和对照组血清hs-CRP均明显低于治疗前（P〈0．01,P〈0．05）,且治疗组明显低于对照组（P〈0．05）。结论益气活血化痰通络方可消减股动脉粥样硬化,对IMT和hs-CRP有明显调节作用。     

芪升合剂对大肠癌患者化疗致骨髓抑制的影响

目的 观察芪升合剂对大肠癌患者化疗所致骨髓抑制的干预作用。方法 选择120例2007年9月—2011年2月就诊于上海交通大学医学院附属瑞金医院住院及门诊结、直肠癌患者,随机分为芪升合剂联合化疗组(治疗组)和单纯化疗组(对照组),每组60例。两组均以FOLFOX4或XELOX方案化疗,共6个周期,治疗组每次化疗结束后口服芪升合剂150 mL,早晚各1次,连续7天为1个疗程,共6个疗程。观察两组患者粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor, G-CSF)使用总量及平均用量,观察两组6次化疗前及第6次化疗后白细胞(WBC)计数,观察治疗前、第4次化疗前及第6次化疗后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)和血小板(PLT)计数。于治疗前、第4次化疗前及第6次化疗后观察两组患者化疗后常见症状(乏力、易感冒、口糜、咽痛、面色少华、纳差、呕吐、腹泻等)积分及安全性指标(肝肾功能、尿常规)。比较两组化疗毒副反应分级及KPS评分、体重、症状积分疗效。结果对照组治疗过程中使用G-CSF平均用量及总量大于治疗组(P<0.01)。两组治疗后WBC计数均减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗组第2～6次化疗前及治疗后WBC计数均高于对照组同期(P<0.01, P<0.05)。与本组治疗前比较,两组第4次化疗前RBC、PLT均减少,治疗后RBC、Hb、PLT均减少(P<0.05, P<0.01)。治疗组患者体重疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,治疗组治疗后乏力、易感冒、咽痛、面色少华、呕吐、腹泻症状积分均降低(P<0.01)。与对照组比较,治疗组第4次化疗前毒副反应降低(P<0.01)。结论 芪升合剂能有效干预大肠癌患者化疗所致骨髓抑制,是安全低毒的中药复方。     

乳腺癌伴焦虑抑郁的中西医治疗研究

焦虑抑郁等情绪障碍贯穿乳腺癌患者从症状出现、诊断、复发、长期适应等多个阶段,影响乳腺癌的发生、发展、死亡和转归.因此,临床上对于乳腺癌伴焦虑抑郁患者,应尽早进行心理干预及药物治疗.中医认为,乳腺癌伴焦虑抑郁病变主要在肝、脾、肾等脏.肝脾郁怒、气血亏损导致冲任不和,久而成岩,痰毒瘀结是其发展的核心病机.故治疗上应以疏肝健脾、调畅气血、补肾安神为主,同时配合扶正固本、祛邪解毒之品,可有效改善患者生活质量和延长生存期,事半功倍.     

葡萄球菌肠毒素A和黑色素瘤抗原A3基因重组真核共表达载体的构建及其在293T细胞的表达

目的构建葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal endotoxinA,SEA)和喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(melanoma-associated antigenA3,MAGE-A3)基因共表达的真核表达载体,检测、鉴定其在293T细胞中的表达情况。方法分别用RT-PCR方法 及人工化学合成法获得MAGE-A3和SEA基因片段,然后依次将MAGE-A3和SEA基因克隆至含内部核糖体进入位点的真核表达载体IRES序列的上、下游,构建成重组质粒pMGEA3-IRES-SEA。经脂质体转染至293T细胞以后,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别鉴定SEA和MAGE-A3基因的表达。结果限制性内切酶酶切分析证实MAGE-A3和SEA基因均正确地克隆在pMAGEA3-IRES-SEA中,基因测序结果与GenBank公布的MAGE-A3、SEA序列完全一致,实现了双基因的正确重组。重组质粒转染293T细胞后能检测到MAGE-A3、SEA基因的高水平的有效表达。稳定表达双基因的293T细胞上清对外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)增殖有促进作用,与细胞中SEA的表达和分泌有关。结论成功地构建了pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE-A3和SEA蛋白,由此奠定了其作为抗喉癌DNA疫苗应用的基础。     

扶中消积分期疗法治疗直肠癌生存分析

目的 :探讨中医扶中消积分期疗法对直肠癌患者的生存影响。方法 :采用回顾性队列研究方法,选取符合入组标准直肠癌患者149例,其中治疗组(经扶中消积分期疗法治疗)97例,对照组(未经扶中消积分期疗法治疗)52例。观察两组病例总生存期(OS)、中位生存期(m OS)、无疾病生存期(DFS)、无进展生存期(PFS),并行COX回归多影响因子分析。结果 :经COX分析口服中药时间是保护因子,肿瘤分期是危险因子(P0.01)。与对照组比较,治疗组OS延长约44个月(P0.01),II~III期DFS延长60个月(P0.01)。口服中药起始时间和服用中药时间长短影响生存(P0.01)。结论 :应用扶中消积分期疗法能延长直肠癌患者的生存,减少II期和III期直肠癌康复期患者的转移和复发;稳定IV期直肠癌患者的疾病进展;口服中药时间是保护因子,而肿瘤分期则是危险因子,术后即服和化疗后服中药均能够有效的延长患者中位生存期。     

新生儿人巨细胞病毒先天性感染危险因素筛查

目的 通过检测新生儿脐带血中人巨细胞病毒( human cytomegalovirus,HCMV)IgG抗体和gB基因,了解新生儿HCMV感染情况,并结合临床资料分析产妇年龄、Ⅰ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV-Ⅰ)IgG抗体阳性、孕周与HCMV先天性感染的相关性.方法 收集2010年11月～2011年6月期间,某市妇幼保健院就诊的健康产妇所娩新生儿脐带血,共178例.采用ELISA法检测脐带血血清是否存在HCMVIgG和HSV-Ⅰ IgG抗体,巢式PCR检测HCMV gB基因.结果 产妇HCMVIgG阳性率为99.44％ (177/178);产妇HSV-Ⅰ IgG阳性率为83.71％ (149/178);新生儿脐血HCMVgB阳性率为32.02％ (57/178);产妇年龄和HSV-Ⅰ IgG抗体阳性不是发生HCMV先天性传播的危险因素.结论 针对早产和过期产儿,应该加强其HCMV先天性感染的早期诊断.