长链非编码RNA在阿尔茨海默病中的研究进展

阿尔茨海默病(AD)属于慢性神经退行性疾病,是引起老年痴呆的主要病因.AD发病机制复杂,临床预后极差.长链非编码RNAs(lncRNAs)是一类不能编码蛋白,通过转录及转录后水平调节基因的表达,参与了癌症、神经系统、心血管系统以及衰老等病理生理过程.lncRNAs与AD的发生发展相关在1992年首次提出之后,不同lncRNAs在AD中的作用受到广泛关注.现对近年来lncRNAs与AD的相关研究进行概述,以期为AD的防治提供新思路.     

应用单分子触发式级联指数恒温扩增技术检测长链非编码RNA方法的建立

目的建立一种利用核酸恒温指数扩增技术特异性检测长链RNA的高灵敏度检测方法。方法利用恒温指数扩增(EXPAR)反应对所建立的方法进行反应条件的优化,并对该方法的通用性、特异性和灵敏度进行了系统分析。结果单分子触发反应产物可以作为引物触发指数恒温扩增;柔性引物可以提高检测特异性,柔性臂长7nt;单分子触发式级联指数恒温扩增技术能够有效检测出待检样品浓度在10fmol/L～100pmol/L范围内的靶标RNA,线性响应良好(R 2=0.955)。结论单分子触发级联式恒温指数扩增技术可以快速、准确检测长链RNA。     

长链非编码RNA在糖尿病视网膜病变发展及治疗中的研究进展

DR是世界各地工作年龄段成年人失明的主要原因，其发病机制是多因素的，分子机制尚不完全清楚。长链非编码RNA（lncRNAs）被认为是多细胞功能的关键调节因子，已有证据表明其参与了DR的许多病理生理机制，本文就 lncRNAs在DR中发挥功能的分子机制及调控作用进行综述，为今后DR的防治研究提供一定的策略和方向。     

脑胶质瘤干细胞衍生的外泌体lncRNA HOXA-AS2促进脑胶质瘤的增殖、迁移、侵袭和干细胞特性

背景与目的：外泌体是介导肿瘤微环境中肿瘤细胞与受体细胞间相互作用的重要信使。然而，细胞外泌体长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在脑胶质瘤干细胞（glioma stem cell，GSC）和脑胶质瘤细胞的细胞间通信中的作用尚不清楚。本研究探究外泌体衍生的lncRNA对脑胶质瘤增殖、迁移、侵袭和干细胞特性的影响。方法：从中国脑胶质瘤基因组图谱（the Chinese Glioma Genome Atlas，CGGA）和癌症基因组图谱（the Cancer Genome Atlas，TCGA）数据库下载包含低级别脑胶质瘤（low-grade glioma，LGG）和高级别脑胶质瘤（high-grade glioma，HGG）lncRNA表达数据的数据集，识别LGG和HGG组织之间的差异表达lncRNA（differentially expressed lncRNA，DelncRNA），并分析HOXA-AS2水平与胶质瘤患者总生存期（overall survival，OS）之间的关系。从人胶质瘤细胞系SHG44中分离GSC，用流式细胞术检测CD133⁺富集的细胞，再用蛋白质印迹法（Western blot）检测干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平。提取和识别SHG44-GSC衍生的外泌体，并用PKH26细胞膜染料进行荧光标记；再将转染了Cy3标记HOXA-AS2的SHG44-GSC与SHG44细胞进行间接共培养；后用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）检测SHG44-GSC和SHG44-GSC衍生外泌体中HOXA-AS2的水平。使用pLVX-IRES-PURO HOXA-AS2慢病毒质粒和含靶向HOXA-AS2质粒的慢病毒shRNA进行慢病毒转染。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）和transwell实验检测SHG44-GSC衍生的外泌体HOXA-AS2对SHG44细胞增殖和侵袭能力的影响。结果：HOXA-AS2在胶质瘤中呈现高表达，且与患者较差的OS相关（P<0.01）。SHG44-GSC中CD133⁺细胞比例明显高于SHG44细胞（P<0.000 1），SHG44-GSC中干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平明显高于亲代SHG44细胞（P<0.000 1），并且SHG44-GSC中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.000 1）。PKH26标记的外泌体被SHG44细胞吸收，且SHG44细胞中可观察到Cy3标记的HOXA-AS2；HOXA-AS2 OE转染的SHG44-GSC细胞（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE）和SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE衍生的外泌体（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo）中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01），在与SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE细胞共培养的SHG44细胞中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01）。SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo可显著促进SHG44细胞增殖、迁移和侵袭。结论：来自SHG44-GSC的外泌体HOXA-AS2能显著促进胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和干细胞特性，提示HOXA-AS2可能是脑胶质瘤潜在的治疗靶点。     

长链非编码RNA在运动改善骨质疏松中的作用机制

<正>自20世纪末Xist作为首个调控性长链非编码RNA(LncRNA)被发现以来,大量文献和实验结果显示,LncRNA在人类细胞中存在如H19、MEG3、DANCR等多种亚型[1]。LncRNA能调控包括成骨细胞(OB)、破骨细胞(OC)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)在内的多种细胞进而影响骨代谢进程的研究在国内外已有很多,例如LncRNA调节miRNA、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)进而影响OB分化,并在骨质疏松(OP)发生中扮演重要     

LncRNAs在细胞衰老中的作用和治疗靶标

长链非编码RNA(long non-coding RNAs,LncRNAs)是一类转录本长度超过200 bp的非编码RNA。细胞衰老是一种稳定的增殖性停滞状态,这种不可逆的细胞停滞状态可能由多种因素引起,如端粒缩短、癌基因诱导或氧化应激。多因素参与细胞衰老,但p53/p21和p16/Rb是不同细胞类型中细胞衰老的主要调节途径。细胞衰老作为一种强大的肿瘤抑制机制已经被广泛研究,以抵抗致癌基因的出现。该文将深入探讨LncRNAs在细胞衰老中的作用机制和治疗靶标。     

lncRNA uc.48+对2型糖尿病大鼠肝糖原的影响

目的探讨长非编码核糖核酸uc.48+小干扰RNA(lncRNA uc.48+siRNA)对2型糖尿病大鼠肝糖原异常的影响及可能机制。方法采用高糖高脂饲料喂养及链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,造模成功后,lncRNA uc.48+siRNA尾静脉注射至大鼠体内,动态监测血糖变化及注射1周后检测肝糖原含量;蛋白印迹及qPCR检测各组大鼠肝脏组织中葡萄糖激酶(glucokinase,GK)mRNA和蛋白表达变化。结果糖尿病模型大鼠用uc.48+小干扰RNA处理后,餐后血糖、空腹血糖较模型大鼠降低。肝糖原检测显示,糖尿病模型组大鼠肝糖原较对照组明显降低,糖尿病模型大鼠加uc.48+小干扰RNA处理后,肝糖原的合成较糖尿病模型组大鼠增多。糖尿病模型组肝脏GK mRNA和蛋白表达较对照组明显减少,经uc.48+小干扰RNA干预后,肝脏GK的mRNA与蛋白表达较糖尿病模型组明显增加。结论 uc.48+小干扰RNA可降低2型糖尿病模型大鼠升高的血糖,增加肝糖原合成,其机制涉及增加GK及磷酸化Akt1表达。