人脑胶质瘤干细胞SHG-44s的克隆及初步鉴定

目的:探讨人脑胶质瘤体外细胞系中存在肿瘤干细胞的可能性.方法:将SHG44细胞系和SHG44-9细胞株,分别应用含血清培养基(DMEM 10?S)和无血清培养基(DMEM/F12,添加bFGF、LIF和EGF)培养.用CD133免疫磁珠分离干细胞、Hoechst33342和NESTIN流式细胞仪、Nestin、NSE、GFAP免疫细胞化学染色检测肿瘤干细胞及其分化细胞.结果:CD133磁珠分离得到的干细胞的比例:在血清组SHG44和SHG44-9分别为0.021%和0.035%:无血清组分别为1.2%和2.3%.而Hoechst33342和CD133标记后流式细胞仪检测干细胞比例:血清组中SHG44、SHG44-9分别为1.5%、0.37%;无血清组分别为16.4%和29.1%.并且这些细胞能够增殖和分化成神经元和胶质细胞.而Nestin标记后SHG44、SHG44-9中分别有51.05%、77.53%阳性细胞.结论:体外长期传代培养的人脑胶质瘤细胞系中存在肿瘤干细胞SHG44s,CD133磁珠和Hoechst33342流式细胞仪分离和检测胶质瘤干细胞是行之有效的方法,而Nestin 细胞是干细胞分化后的祖细胞或前体细胞,不能作为分离和检测干细胞特异性标记物使用.     

脑胶质瘤干细胞和U251人胶质瘤细胞系X线辐射敏感性研究

目的:研究脑胶质瘤干细胞(Brain glioma stem cell) U251胶质瘤细胞系对不同剂量X线的射线敏感性.方法:从脑胶质瘤组织中分离培养脑胶质瘤肿瘤球,用CD133免疫磁珠技术分离得到脑胶质瘤干细胞;经不同剂量X线照射脑胶质瘤干细胞和U251细胞后,用软琼脂克隆形成实验检测两者的放射敏感性.结果:1)从脑胶质瘤组织中分离胶质瘤干细胞.2)随着照射剂量的增加,两种细胞的存活率均出现下降,但肿瘤干细胞的存活率明显高于U251细胞(t=-3.71,P＜0.01).3)根据公式SF=exp(-αD-BD2)对实验数据进行拟合,得到干细胞和U251细胞的α/β值分别为3.57、7.15.结论:脑胶质瘤干细胞与U251胶质瘤细胞系相比具有较强的辐射抗拒性.     

下调基因PTTG1 对人胶质瘤细胞SHG44增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响

背景与目的：研究表明垂体瘤转化基因1（pituitary tumor-transforming gene 1，PTTG1）在多种癌症中高表达。该研究旨在探讨其对胶质瘤细胞SHG44增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法：用PTTG1 siRNA干扰胶质瘤细胞SHG44的基因表达，通过实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）分别在mRNA和蛋白质水平上评估PTTG1沉默效率，进一步检测其对SHG44细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。结果：沉默PTTG1基因表达可以显著抑制SHG44细胞增殖（P<0.05）、迁移（P<0.01）和侵袭（P<0.001）能力，增加细胞凋亡（P<0.05）。结论：下调PTTG1的表达可以降低神经胶质瘤的恶化程度，有望成为临床胶质瘤治疗的新靶点。     

高表达ANXA2肝癌干细胞外泌体对肝癌细胞恶性生物学特性的调控作用

摘 要：［目的］ 探讨肝癌干细胞来源外泌体中差异表达的蛋白质,重点分析外泌体ANXA2分子对肝癌恶性生物学特性（自我更新、侵袭和转移能力）的影响。［方法］ 采用无血清悬浮培养法和干细胞标志物流式分选术分离人肝癌干细胞;分别采用干细胞球形成实验、体外侵袭转移能力鉴定分离所得肝癌干细胞;采用蛋白质谱分析肝癌干细胞来源外泌体中的差异表达蛋白质;siRNA靶向抑制ANXA2表达后,分别进行肝癌细胞球形成实验、体外侵袭与迁移实验检测外泌体ANXA2对人肝癌细胞自我更新、侵袭、转移能力的影响;收集肝癌患者和正常人血浆,通过凝胶排阻层析联合CD63免疫磁珠分离纯化外泌体,Western blot检测外泌体中ANXA2表达情况,结合临床病理资料,综合分析外泌体ANXA2的临床相关性。［结果］ 成功分离得到肝癌干细胞CD133+ SK-Hep-1,其具有典型的肿瘤干细胞生物学特性。与CD133- SK-Hep-1细胞外泌体相比,CD133+ SK-Hep-1肝癌干细胞来源外泌体中具有多种差异表达蛋白,其中外泌体ANXA2表达明显上调。siRNA靶向抑制肝癌干细胞ANXA2表达后,其外泌体中ANXA2表达也下降。分别采用PBS、siRNA靶向抑制肝癌干细胞ANXA2后外泌体（Exo-LCSCs-siANXA2）、肿瘤干细胞来源外泌体（Exo-LCSCs）刺激肝癌细胞系HepG2、SNU398,其自我更新、侵袭和转移能力依次增强。Western blot结果显示,肝癌患者血浆外泌体ANXA2表达明显高于健康人血浆;肝癌患者血浆外泌体ANXA2表达与患者年龄、性别无明显相关性,而与肿瘤TNM分期和转移显著相关。［结论］ 高表达ANXA2的肝癌干细胞的外泌体对肝癌细胞恶性生物学特性具有调控作用。     

探讨bcl-2下调后对胶质瘤细胞系的增殖、凋亡和侵袭能力的影响

目的 研究下调bcl-2基因表达后对神经胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法 利用小分子RNA干扰（Small interfering RNA,siRNA）技术人工合成bcl-2靶向siRNA,转染神经胶质瘤细胞系SHG44和TJ905细胞,特异性沉默神经胶质瘤细胞SHG44和TJ905细胞bcl-2基因表达。通过蛋白质印迹（Western blot）分析、噻唑蓝（MTT）实验、Transwell实验和流式细胞仪（FCM）检测,观察bcl-2 siRNA对转染细胞bcl-2基因抑制效果、增殖能力的变化、侵袭能力的改变和细胞凋亡的影响。结果 bcl-2 siRNA可特异性下调神经胶质瘤细胞系SHG44和TJ905细胞bcl-2基因表达。bcl-2下调的神经胶质瘤细胞增殖能力在不同时间点都受到抑制,侵袭能力也明显下降,但实验中未见细胞明显凋亡。结论 下调bcl-2基因表达可有效抑制神经胶质瘤细胞生长,降低细胞增殖和侵袭能力。     

人脑胶质瘤组织培养的干细胞样细胞具有体外高侵袭能力

目的:分离培养人脑胶质瘤干细胞样细胞(glioma stem-like cell,GSLC),研究其体外侵袭力。方法:选取中国医科大学第一医院神经外科2008年10月至2009年1月间住院患者手术切除的脑胶质瘤组织8例,以无血清成球培养法培养胶质瘤细胞球;免疫细胞化学实验检测其CD133的表达;荧光免疫显微镜观察其分化后胶质细胞标志物GFAP和神经元标志物TU-20的表达;matrigel侵袭实验检测其侵袭力,并与原代脑胶质瘤细胞进行比较。结果:成功分离培养出人脑胶质瘤细胞球细胞,该细胞表达干细胞标志物CD133;能自我更新与增殖;诱导分化后,GFAP和TU-20均为阳性表达,提示其为GSLC。胶质瘤细胞球细胞侵袭细胞数显著多于原代胶质瘤细胞[(261.23±87.20)vs(116.08±63.88)个,P<0.01];此外,胶质瘤细胞球细胞穿过matrigel胶后可再次聚集成球状生长。结论:成功分离培养人脑胶质瘤组织中的GSLC,其体外具有较高的侵袭力,可能参与脑胶质瘤的侵袭和转移。     

免疫磁珠法分选人脑胶质瘤干细胞及其培养和鉴定

背景与目的:脑胶质瘤治疗效果一直不理想,这与胶质瘤细胞无限增殖能力和侵袭性生长有关,本研究旨在从人脑胶质瘤组织和细胞株中分离脑胶质瘤干细胞、进行体外培养并对其干细胞特性加以鉴定。方法:采用以CD133为标志的免疫磁珠法从人脑胶质瘤组织和细胞株中分离脑胶质瘤干细胞并进行体外培养,通过免疫荧光技术检测干细胞标志物CD133、Nestin,诱导分化后检查分化细胞标志物MAP2、GFAP、MBP以及电镜超微结构观察和移植SCID鼠致瘤实验,对其干细胞特性加以鉴定。结果:新鲜人脑胶质瘤组织和胶质瘤细胞株中存在一小部分CD133 的胶质瘤细胞,能表达干细胞的标志物CD133和Nestin,符合干细胞的超微结构特点,体外培养能连续传代;诱导分化后能产生MAP2、GFAP、MBP染色阳性的细胞;移植SCID鼠后能形成与亲本肿瘤表型一致的移植瘤。结论:新鲜人脑胶质瘤组织和胶质瘤细胞株中存在的一小部分CD133 胶质瘤细胞具有干细胞的属性,就是胶质瘤中的肿瘤干细胞,即胶质瘤干细胞。     

TWIST调控miR-145表达促进胶质瘤干细胞侵袭、迁移的实验研究

目的:探究转录因子TWIST对胶质瘤干细胞侵袭、迁移的影响,并探讨与微小RNA（microRNA,miR）-145之间的关系。方法:以人神经胶质瘤细胞U251为研究对象,提取干细胞并经免疫荧光染色CD133、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）鉴定。实验分组:对照组、过表达对照组、TWIST过表达组、沉默对照组、TWIST沉默组,分别用pcDNA3、pcDNA3-TWIST、pGPH1-shNC、pGP-TWIST-shRNA转染提取并鉴定后的干细胞。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各细胞中TWIST mRNA和miR-145水平;蛋白质免疫印迹实验检测细胞中TWIST、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-2、MMP-9蛋白水平;Transwell检测细胞侵袭和迁移情况;划痕实验检测细胞迁移情况;双荧光素酶鉴定miR-145与TWIST的靶向关系。结果:干细胞分选与鉴定:CD133阳性干细胞约占5.6%左右;分选后细胞用CD133和GFAP染色显示双阳性。与对照组相比,TWIST过表达组细胞中TWIST mRNA和蛋白水平,细胞侵袭、迁移数量,愈合率,细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平升高（P＜0.05）,miR-145水平降低（P＜0.05）;TWIST沉默组细胞中TWIST mRNA和蛋白水平,细胞侵袭、迁移数量,愈合率,细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（P＜0.05）,miR-145水平升高（P＜0.05）;过表达对照组、沉默对照组上述指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。miR-145与TWIST存在结合位点并经双荧光素酶靶向关系验证。结论:升高TWIST能够促进胶质瘤干细胞侵袭、迁移,且能靶向miR-145发挥作用。     

MKP-1增强组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞敏感性及其作用机制

目的 探讨MKP-1对组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors，HDACi）作用脑胶质瘤干细胞（glioma stem cells，GSC）敏感性的影响及可能的作用机制。方法 收集武汉市第三医院神经外科2016年1月至2018年12月收治的53例脑胶质瘤患者肿瘤及健康脑组织。RT-PCR检测MKP-1表达，分离并培养脑胶质瘤干细胞，采用MTT实验检测HDACi MS-275作用脑胶质瘤干细胞的IC₅₀。以MKP-1过表达质粒转染干细胞构建差异表达MKP-1的脑胶质瘤干细胞模型，MTT实验分析HDACi MS-275的敏感性，CCK-8实验检测细胞增殖情况，RT-PCR及Western blot实验检测肿瘤干细胞相关因子SOX2、SOX9的表达，Western blot实验检测p38、JNK、ERK1/2的表达。结果 MKP-1在脑胶质瘤组织中的表达较健康脑组织明显降低（P<0.001）。HDACi MS-275作用GSC的IC₅₀为（55.12±7.31） nmol/mL，作用后细胞增殖能力较对照组明显降低（P<0.001），MKP-1表达明显升高（P<0.001）。HDACi MS-275作用过表达MKP-1脑胶质瘤干细胞的IC50较对照组和空白组明显降低（P<0.001）。MKP-1组GSC增殖能力，SOX2、SOX9 mRNA和蛋白表达量均较对照组和空白组明显降低（P<0.001）。MKP-1组JNK和p38表达较均对照组和空白组降低（P<0.001），但ERK1/2表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 脑胶质瘤干细胞对HDACi的敏感性与MKP-1表达有关，MKP-1可能通过调控SOX2、SOX9、p38、JNK而影响脑胶质瘤干细胞对HDACi的应答。     

胶质瘤干细胞、肿瘤相关巨噬细胞和B7-H1在脑胶质瘤组织中的表达及其意义

目的:探讨胶质瘤干细胞（glioma stem cells,GSCs）、肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）和负性共刺激分子B7-H1(B7 homolog 1)在不同病理级别脑胶质瘤组织中的表达及其相关性。方法:对30例低级别脑胶质瘤（WHOⅠ级、Ⅱ级）和30例高级别脑胶质瘤（WHOⅢ级、Ⅳ级）标本做连续石蜡包埋切片,用免疫组化SP法检测各组标本中GSCs、TAMs和B7-H1的表达情况,采用CD133作为GSCs的标志物,以CD68作为TAMs的标志物。用Image-Pro Plus 6.0软件分析每个视野阳性染色的积分光密度（IOD）,每个组织切片在400倍镜下分析20个视野。结果:CD133、CD68和B7-H1在高级别脑胶质瘤组织中的表达水平明显高于低级别脑胶质瘤组织（P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01）;脑胶质瘤组织中B7-H1的空间表达位置在CD68+TAMs的分布区域较强;CD133与CD68的表达呈正相关（P＜0.001）,CD133与B7-H1的表达呈正相关（P＜0.001）。结论:随着病理级别的增高,脑胶质瘤组织中GSCs、TAMs和B7-H1的表达均增高,并且CD133与CD68和B7-H1的表达呈显著正相关。     

长链非编码RNA PSMA3-AS1在人胶质瘤细胞中的表达及作用研究

目的 探究胶质瘤组织中lncRNA PSMA3-AS1的表达情况,以及其对胶质瘤细胞(U251、LN229、T98G和A172)增殖和侵袭能力的影响。方法 使用qRT-PCR实验检测35对胶质母细胞瘤组织和癌旁组织中PSMA3-AS1表达;结合TCGA数据库分析PSMA3-AS1表达与胶质瘤恶性程度及患者预后的关系;采用U251和T98G胶质瘤细胞系进行细胞增殖能力和侵袭能力检测;使用Western blot实验检测侵袭相关蛋白MMP-2/9表达水平。结果 TCGA数据库分析提示PSMA3-AS1在胶质瘤组织中呈高表达状态,结合35对胶质瘤组织和细胞系中PSMA3-AS1的表达,提示PSMA3-AS1在胶质瘤中表达明显上调(P＜0.05)。同时发现PSMA3-AS1表达与肿瘤直径有关(P=0.007),而PSMA3-AS1高表达的胶质瘤患者生存期较短(P=0.042)。敲低PSMA3-AS1表达后,胶质瘤细胞内PSMA3-AS1的表达水平及细胞增殖、侵袭能力明显受到抑制,侵袭相关蛋白(MMP-2/9)表达水平明显降低(P＜0.05)。结论 PSMA3-AS1在胶质瘤中呈高表达状态,具有促癌作用,可能是潜在的胶质瘤治疗靶点。     

lncRNA XIST通过miR-375-Notch1轴调控急性T淋巴细胞白血病细胞增殖、侵袭的实验研究

目的 探讨lncRNA XIST通过miR-375-Notch1轴调控急性淋巴细胞白血病(T-acute lymphocytic leukemia,T-ALL)细胞增殖和侵袭的影响。方法 以2018年6月—2021年3月收治的57例T-ALL患者为观察对象(T-ALL组),另选55例同期健康体检者为对照组。qRT-PCR检测T-ALL组和对照组及T-ALL T淋巴细胞CCRF-CEM细胞株中lncRNA XIST水平;对CCRF-CEM细胞转染si-lncRNA XIST以沉默lncRNA XIST、转染miR-375模拟物以过表达miR-375;采用CCK-8法、Transwell侵袭实验法及流式细胞术检测CCRF-CEM细胞的增殖、侵袭及凋亡情况;荧光素酶报告基因方法检测lncRNA XIST靶基因;Western blot检测Notch1、ADAM-17、Hes1蛋白表达。结果 与对照组比较,T-ALL组的lncRNA XIST、Notch1 mRNA表达明显增加(P＜0.05),而miR-375水平明显下降(P＜0.05),且T-ALL组患者Notch1蛋白水平明显高于对照组(P＜0.001)。转染si-lncRNA XIST沉默lncRNA XIST后,CCRF-CEM细胞增殖数量、侵袭能力明显下降(P＜0.05),细胞凋亡明显增加(P＜0.05)。荧光素酶报告基因显示miR-375是lncRNA XIST的靶点。CCRF-CEM细胞转染miR-375后,细胞增殖数量、侵袭能力明显下降(P＜0.05),细胞凋亡明显增加(P＜0.05)。转染si-lncRNA XIST可以明显上调miR-375水平、下调Notch1 mRNA水平,同时下调Notch1、ADAM-17、Hes1蛋白表达。结论 lncRNA XIST在T-ALL患者中呈高表达,可能通过miR-375-Notch1轴影响白血病细胞生物学功能。     

lncRNA CASC2对结直肠癌细胞功能及血管生成的影响

目的 研究lncRNA CASC2过表达对结直肠癌细胞增殖、迁移、血管生成及Wnt/FZD/β-catenin信号通路的影响.方法 qRT-PCR检测lncRNA CASC2在正常结肠上皮细胞(NCM460)及结直肠癌细胞株(DLD-1、HT29、SW620、HCT116、RKO、LOVO、SW480)中的表达情况;H...     

lncRNA LOC730101对肝细胞癌增殖、迁移与侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA（long non⁃coding RNA,lncRNA）LOC730101对肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）生物学行为的影响。方法 利用R软件分析TCGA数据库LIHC数据集374例HCC组织和50例正常组织中LOC730101的表达差异。收集2018年广西医科大学附属肿瘤医院外科手术切除、经病理确诊的40例HCC患者的癌组织及其相应癌旁组织,培养肝癌细胞系Huh⁃7、HCCLM3、HepG2和人正常肝细胞系L02,采用qRT⁃PCR检测组织和细胞系中LOC730101的相对表达水平。在肝癌细胞系Huh⁃7、HCCLM3中采用慢病毒感染法构建过表达LOC730101（OE⁃LOC730101）和敲低LOC730101（sh⁃LOC730101）的稳转细胞株,同时设置相应空白对照（control组）及阴性对照组（sh⁃NC组、OE⁃NC组）,然后采用qRT⁃PCR验证感染效果,CCK⁃8实验检测各组细胞的增殖能力,划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测各组细胞的迁移、侵袭能力。结果 TCGA数据库分析结果显示,LOC730101在HCC组织中的表达水平高于正常组织（P<0.001）;qRT⁃PCR检测结果显示,LOC730101在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁组织（P<0.001）;LOC730101在各肝癌细胞系（Huh⁃7、HepG2、HCCLM3）中的表达水平也高于人正常肝细胞系L02（均P<0.05）。与相应阴性对照组相比,LOC730101敲低组细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降（均P<0.05）,而过表达组细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强（均P<0.01）。结论 LncRNA LOC730101在肝癌组织和细胞中表达上调且可能促进其增殖、迁移和侵袭。     

长链非编码RNA ARAP1-AS1在肾透明细胞癌中的表达及作用研究

背景与目的：长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）ARAP1-AS1在多种肿瘤中异常表达,但其在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中的作用尚不清楚。探讨ARAP1-AS1在ccRCC中的生物学作用。方法：通过GEPIA数据库分析ARAP1-AS1在ccRCC组织中的表达及其与临床病理学特征及患者生存率的关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测ccRCC组织及邻近的非肿瘤组织中ARAP1-AS1的表达水平。将患者分为ARAP1-AS1高表达组和低表达组,分析ARAP1-AS1的表达水平与患者临床病理学特征之间的关系,并进行生存分析。通过细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）实验、transwell迁移实验及侵袭实验检测ARAP1-AS1对ccRCC细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达变化。采用BALB/c裸小鼠移植瘤模型分析ARAP1-AS1对ccRCC细胞体内成瘤能力的影响。结果：GEPIA数据库分析结果显示,ARAP1-AS1在ccRCC中高表达,且与患者肿瘤高分期及较差的生存率相关（P均<0.05）。RTFQ-PCR显示,ARAP1-AS1在ccRCC组织及细胞系中高表达,ARAP1-AS1的高表达与肿瘤大小和分期相关（P均<0.05）。ARAP1-AS1高表达患者的总生存率较差（P<0.05）。沉默ARAP1-AS1的表达可以抑制ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭（P均<0.05）。沉默ARAP1-AS1可以降低Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平（P均<0.05）。沉默ARAP1-AS1可使ccRCC细胞体内成瘤能力减弱,并使Ki-67增殖指数降低。结论：ARAP1-AS1可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进ccRCC的进展。     

LINC02163靶向miR-338-3p影响乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移

背景与目的： 长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）已被发现在乳腺癌中失调,与肿瘤恶性行为密切相关。本研究旨在探究LINC02163靶向miR-338-3p对乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法： 收集郑州人民医院2020年1月—2021年9月收治的9例乳腺癌患者的乳腺癌组织及距其2 cm外的癌旁组织样本,通过实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测组织样本、人正常乳腺上皮细胞系（MCF-10A）和乳腺癌细胞系（MCF-7、BT-20、MDA-MB-231、T47D）中LINC02163的表达。将MDA-MB-231分为control组、sh-NC组、sh-LINC02163组、sh-LINC02163+inhibitor-NC组和sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor组。采用MTT法、transwell实验及划痕实验分别检测MDA-MB-231细胞活力、侵袭及迁移能力。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测MDA-MB-231细胞c-Myc、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）2、MMP9、E-钙粘素（E-cadherin）及N-钙粘素（N-cadherin）蛋白的表达。通过双荧光素酶报告基因实验分析LINC02163与miR-338-3p的靶向关系。采用体内成瘤实验检测BALB/c裸鼠肿瘤体积及重量。采用免疫组织化学法检测裸小鼠移植瘤组织的Ki-67增殖指数。结果： 与癌旁组织相比,LINC02163在乳腺癌组织中的表达显著升高（P<0.05）。与MCF-10A细胞相比,LINC02163在MCF-7、BT-20、MDA-MB-231及T47D细胞中的表达均显著升高,并且其在MDA-MB-231细胞中升高最为显著（P<0.05）。与control组比,sh-LINC02163组LINC02163表达、细胞存活率、侵袭细胞数及迁移率、c-Myc、MMP2、MMP9、N-cadherin表达、肿瘤体积及重量、Ki-67增殖指数显著降低,miR-338-3p、E-cadherin表达显著升高（P<0.05）。与sh-LINC02163组相比,sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor组LINC02163表达无显著变化（P>0.05）,细胞存活率、侵袭细胞数及迁移率、c-Myc、MMP2、MMP9、N-cadherin表达、肿瘤体积及重量、Ki-67增殖指数显著增加,miR-338-3p、E-cadherin表达显著降低（P<0.05）。在乳腺癌中LINC02163与miR-338-3p存在潜在的靶向关系。结论： 沉默LINC02163表达通过促进miR-338-3p表达来抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁 移。     

长链非编码RNA HOXA-AS3在结肠癌组织中的表达及与临床预后的关系

目的:观察长链非编码RNA HOXA-AS3（lncRNA HOXA-AS3）在结肠癌组织中的表达并探究其与临床预后的关系。方法:选取2012年01月至2014年02月本院外科行手术治疗的94例结肠癌患者癌变及癌旁结肠组织冻存标本,采用实时定量PCR（RT-qPCR）法检测癌组织和癌旁组织中lncRNA HOXA-AS3的表达水平,采用单因素方差分析其与结肠癌患者临床病理参数的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析lncRNA HOXA-AS3表达水平与结肠癌患者5年生存率的关系;采用COX多因素回归分析影响结肠癌患者不良预后的危险因素。结果:与癌旁组织比较,结肠癌组织中lncRNA HOXA-AS3表达水平明显升高（P＜0.05）;lncRNA HOXA-AS3在结肠癌组织中的表达水平与患者年龄、性别、病理类型无关（P＞0.05）,与TNM分期、肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移有关（P＜0.05）。lncRNA HOXA-AS3高表达组结肠癌患者5年生存率（60.98%）明显低于低表达组（94.34%）（χ2=16.41,P＜0.05）。COX回归分析结果显示,lncRNA HOXA-AS3高表达、TNM分期和淋巴结转移是影响结肠癌患者预后的独立危险因素（P均＜0.05）。结论:lncRNA HOXA-AS3在结肠癌组织中高表达,且与患者TNM分期、肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移及5年生存率有关,其表达变化可能与结肠癌的发生、发展进程有关,有潜力成为结肠癌预后评估的新型生物指标及潜在治疗靶标。