应用单分子触发式级联指数恒温扩增技术检测长链非编码RNA方法的建立 |
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引用本文: | 张斌,李增健,关一夫,袁莹,李硕.应用单分子触发式级联指数恒温扩增技术检测长链非编码RNA方法的建立[J].解剖科学进展,2020,26(4):454-457. |
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作者姓名: | 张斌 李增健 关一夫 袁莹 李硕 |
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作者单位: | 中国医科大学附属口腔医学院口腔颌面外科教研室,辽宁沈阳110002;中国医科大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室,辽宁沈阳110122 |
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基金项目: | 辽宁省第三批新冠肺炎疫情防控应急科研攻关计划 |
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摘 要: | 目的建立一种利用核酸恒温指数扩增技术特异性检测长链RNA的高灵敏度检测方法。方法利用恒温指数扩增(EXPAR)反应对所建立的方法进行反应条件的优化,并对该方法的通用性、特异性和灵敏度进行了系统分析。结果单分子触发反应产物可以作为引物触发指数恒温扩增;柔性引物可以提高检测特异性,柔性臂长7nt;单分子触发式级联指数恒温扩增技术能够有效检测出待检样品浓度在10fmol/L~100pmol/L范围内的靶标RNA,线性响应良好(R 2=0.955)。结论单分子触发级联式恒温指数扩增技术可以快速、准确检测长链RNA。
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关 键 词: | 长链RNA 恒温指数扩增 单分子触发式级联反应 |
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