反转录病毒介导的Luciferase基因稳定转染细胞株的建立及其生物发光成像检测

目的 建立反转录病毒介导的Luciferase基因(Luc2)稳定转染的细胞株,通过体内及体外实验探讨Luc2阳性细胞数与生物发光成像系统光通量之间的关系.方法 采用分子克隆方法构建pMX-Luc2质粒,将其与pMD.G质粒共转染293T gag-pol细胞,获得表达Luc2的反转录病毒.将该反转录病毒感染小鼠结肠癌CT26、人小细胞肺癌NCI-H446、人结肠癌HT-29、人卵巢癌SKOV3、人肝癌sMMC-7721细胞系,建立并筛选Luc2阳性表达的细胞株.分别接种10～1×104个SKOV3-Luc2细胞于培养皿中,在4只裸鼠背侧皮下16个位点分别接种200μl不同浓度(1×107、5×106、2.5×106、1 × 106、5×105、2.5 × 10s、1×105、5 × 104/ml)的SKOV3-Luc2细胞,在另外4只裸鼠尾静脉中分别注射1 ×106和3×106个SKOV3-Luc2细胞.采用生物发光成像系统检测体外、体内接种细胞的光通量值.结果 成功获得表达Luc2的反转录病毒,感染肿瘤细胞系CT26、NCI-H446、HT-29、SKOV3、SMMC-7721,筛选阳性细胞株,均可稳定表达Luc2.体外生物发光成像系统检测结果表明,光通量值与培养皿中接种的细胞数之间存在显著的线性关系(R2=0.944,β=0.972,P＜0.01);活体检测结果表明,光通量值与裸鼠尾静脉注射和皮下接种的细胞数之间均存在显著的线性关系(R2=0.991,β=0.996,P＜0.01; R2=0.351,β=0.628,P＜0.01).结论 采用表达Luc2的反转录病毒感染肿瘤细胞系是快速建立Luc2阳性细胞株的一种可行方法.Luc2阳性细胞数与生物发光成像系统中光通量值具有显著的线性关系.     

乳腺专用磁共振成像、乳腺X线摄影及超声检查对乳腺癌诊断价值的对照研究

目的回顾性比较研究乳腺专用磁共振成像(dedicated breast magnetic resonance imaging,DBMRI)、超声(ultrasound,US)及乳腺X线摄影(mammography,MG)3种检查方法对乳腺癌的诊断价值。方法搜集我院行手术治疗并于术前同时行DBMRI、MG及US 3种检查的患者共612例,剔除36例于检查时已行新辅助化疗的患者,共576例患者纳入本研究,所有入组患者均以病理学结果作为金标准。数据分析与统计采用SPSS 13.0统计软件。以P<0.05为差异有统计学意义。结果 DBMR对乳腺癌病灶检出的敏感性为97.1%,高于MG(77.6%)(χ2=53.904,P=0.000)及US(91.0%)(χ2=10.370,P=0.001);MG对乳腺癌病灶检出的特异性为88.8%,高于DB-MR(82.8%)(χ2=3.925,P=0.048)及US(82.5%)(χ2=4.383,P=0.036)。对于导管内癌,DBMRI检出的敏感性为97.9%,高于US(77.8%)(χ2=29.445,P=0.000)及MG(71.1%)(χ2=9.680,P=0.002)。在致密型乳腺中,DBMRI诊断灵敏度高为96.0%,高于MG(66.7%)(χ2=35.806,P=0.000);US诊断敏感性为92.1%,高于MG(66.7%)(χ2=24.812,P=0.000)。在非致密型乳腺中,DBMR诊断敏感性为97.9%,高于MG(85%)(χ2=19.684,P=0.000)及US(90.4%)(χ2=19.684,P=0.002)。DBMRI、MG、US对伴钙化的乳腺癌检出的敏感性分别为98.3%、94.0%和94.8%。结论 DBMRI对乳腺癌的检出敏感性高,但特异性较低;对于导管内癌的诊断,DBMRI具有显著优势;在致密型乳腺乳腺癌的检出中,DBMRI与US均具有高敏感性,优于MG。     

氨肽酶抑制剂对全反式维甲酸诱导人急性早幼粒白血病细胞株NB4细胞分化作用的影响及其机制的初步探讨

为了研究氨肽酶抑制剂乌苯美司（bestatin）对全反式维甲酸（ATRA）诱导人APL细胞株NB4细胞分化作用的影响及其可能机制,NB4细胞经bestatin和ATRA单用或联合应用处理一定时间后,用光学显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测CD11b表达,四氮唑蓝（NBT）还原实验检测分化细胞功能,RT-PCR法检测c-myc和c-EBPεmRNA表达,Western blot检测c-Myc蛋白表达.结果显示：NB4细胞经100μg/ml bestatin和10 nmol/L ATRA联合处理72小时后,其分化的形态更明显;100μg/ml bestatin与不同浓度ATRA联合处理72小时,能增强NB4细胞的NBT还原能力,与单用相应浓度ATRA组相比,差异显著（P＜0.01）;从48-96小时,100μg/ml bestatin能增强10 nmol/L ATRA诱导NB4细胞的NBT还原能力,且呈时间依赖性,与相应时间点ATRA组相比,差异明显（P＜0.01）;与单用10 nmol/L ATRA组相比,ATRA（10 mmol/L）和bestatin（100μg/ml）联用处理72小时,NB4细胞CD11b阳性表达率明显增加（P＜0.01）;与单用10 nmol/L ATRA组相比,联用100μg/ml bestatin处理4小时后,NB4细胞c-myc mRNA表达的降低更明显（P＜0.05）;50、75、100μg/ml bestatin与10 nmol/L ATRA联合处理8小时后,NB4细胞c-Myc蛋白表达水平明显降低,与单用ATRA组相比差异显著（P＜0.05）;药物联用各组NB4细胞c-Myc蛋白表达水平与NBT还原能力之间呈负相关（r=-0.940,p=0.017）;与100μg/ml bestatin联用不能增强10 nmol/L ATRA上调c-EBPεmRNA的表达;50、75、100μg/ml bestatin单独处理对NB4细胞的分化无影响.结论：氨肽酶抑制剂bestatin能够增强ATRA对NB4细胞的诱导分化作用,这可能与bestatin协同ATRA下调c-myc的表达有关.     

骨霍奇金病的影像学诊断（附7例报告）

目的探讨骨霍奇金病的影像学表现及诊断和鉴别诊断要点。方法回顾性分析7例经临床及病理证实的骨霍奇金病X线、CT及MRI表现。结果5例为单骨（肱骨上段、肩胛骨、腰椎各1例，髂骨2例），2例为多发（1例侵犯肩胛骨及肱骨近端，1例侵犯骶椎及髂骨）。7例均表现为骨质破坏，破坏为浸润性、溶骨性或虫蚀状，或呈囊状膨胀性，界限较清楚。4例骨质破坏之间夹有斑点状条状骨质硬化。1例有骨膜反应并合并病理性骨折，全部有软组织肿块。结论本病常侵犯单骨，多见于扁平骨，大部病例表现为骨质破坏，以浸润性和溶骨性破坏为主多伴有骨质硬化，有软组织肿块，主要与转移性骨肿瘤、骨髓瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤等鉴别。     

奥曲肽治疗急性胰腺炎疗效观察

急性胰腺炎是常见的急腹症 ,起病急 ,治疗不当可进一步发展而产生一系列并发症 ,及时抑制胰酶的分泌是治疗的关键。我们于 1997- 0 5～ 2 0 0 1- 12采用奥曲肽治疗急性胰腺炎 ,取得良好效果 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　将有急性腹痛 ,血、尿淀粉酶增高 ,腹部 B超或 CT提示胰腺肿大而诊断为急性胰腺炎患者 91例 ,随机分为两组 :治疗组 43例 ,其中男 2 3例 ,女 2 0例 ;年龄 32～ 75岁 ,平均 5 4.3岁。对照组 48例 ,其中男 2 5例 ,女 2 3例 ,年龄 30～ 74岁 ,平均5 1.8岁。两组性别、年龄、血、尿淀粉酶、血糖、血钙差异均无显著…     

大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤血管内皮细胞生长因子表达的研究

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)在局灶性脑缺血-再灌注损伤中的表达及作用。方法采用免疫组化染色、原位杂交技术检测缺血3h以及缺血3h、再灌注3、6、24、48和72h大脑中动脉栓塞模型大鼠脑组织VEGF蛋白及mRNA表达。结果正常对照组脑组织有极低水平的VEGF表达，脑缺血后表达主要位于半影区，随缺血及缺血-再灌注时间延长，中心区由表达增强降低至正常水平，半影区表达逐渐增强。结论内源性VEGF表达增强，对局灶性脑缺血-再灌注损伤具有保护作用。     

三维超声及彩色多普勒成像对肝脏良恶性肿瘤的鉴别诊断

目的探讨三维超声及彩色多普勒成像对肝脏良恶性肿瘤鉴别诊断的价值.方法采用Aloka SSD-5500超声仪及TomTec三维成像系统,对37例肝脏恶性肿瘤及36例良性肿瘤患者行三维超声成像,观察并比较两组肿瘤内部血流分布、有无穿支血流及其血流信号容积与肿瘤体积比(Ⅵ).结果肝脏良恶性肿瘤的外周血流检出率分别为88.89%(32/36)、78.83%(29/37),两组间比较差异无统计学意义(P=0.343);良恶性肿瘤的中心血流显示率分别为33.33%(12/36)、94.59%(35/37),穿支血流的检出率分别为5.56%(2/36)、62.16%(23/37),Ⅵ值分别为(4.56±0.92)、(18.98±1.87),两组间比较差异有非常显著性(P＜0.01).结论三维超声及彩色多普勒成像为肝脏良恶性肿瘤的形态、血流分布及三维血流参数方面提供了更多的诊断信息,对鉴别诊断有一定的价值.     

主动按压减压结合高频通气对心肺复苏犬的循环效应影响

目的　比较标准心肺复苏、主动按压减压心肺复苏、主动按压减压结合高频通气心肺复苏三种复苏法对心肺复苏循环效应影响 ;评价主动按压减压结合高频通气用于心肺复苏的可行性。方法　将9条犬经电击致颤制成心搏骤停模型 ,每只犬先后实施三种复苏法 ,①标准心肺复苏 ;②主动按压减压心肺复苏 ;③主动按压减压结合高频通气心肺复苏 ,实验顺序由随机法确定 ,每种复苏方法进行 5min ,待循环动力学稳定后记录收缩压、舒张压、心输出量。结果　收缩压、舒张压、心输出量均为主动按压减压结合高频通气模式大于主动按压减压心肺复苏模式 (P <0 0 1) ;主动按压减压心肺复苏模式大于标准心肺复苏模式 (P <0 0 1)。标准心肺复苏模式和主动按压减压心肺复苏模式胸外按压停顿期血压降至零 ,而主动按压减压结合高频通气心肺复苏模式血压持续稳定。结论　主动按压减压心肺复苏优于标准心肺复苏模式。主动按压减压结合高频通气心肺复苏模式既可产生较高的动脉血压、心输出量 ,又可提供充分的气体交换 ,值得进一步研究和推广应用     

高频部分液体通气对吸入性损伤犬呼吸功的影响

目的　观察高频喷射通气结合小剂量氟碳 (3ml/kg)液体通气对吸入性损伤犬呼吸的功影响。方法　将 16条犬经蒸气吸入造成吸入性损伤模型 ,并随机分为两组 ,即对照组和治疗组。两组动物致伤后均行高频喷射通气 ,但治疗组动物同时经气管导管将氟碳液体 (3ml/kg)缓慢注入肺内 ,在 90min内测机械通气功 (WOBvent)。结果　治疗组在给予小剂量氟碳后的WOBvent与致伤后比较差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,对照组治疗后的WOBvent与致伤后比较差异亦无显著意义 (P >0 0 5 ) ,治疗组与对照组各时间点的WOBvent比较差异均无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　高频喷射通气合并小剂量氟碳 (3ml/kg)部分液体通气并不增加动物的呼吸功。     

胃手术后并发呼吸道感染的危险因素及护理对策

胃手术后并发呼吸道感染是患者术后最常见的并发症之一.往往导致患者切口裂口、吻合口瘘的发生.呼吸道感染不仅延长了患者的恢复期,增加了住院费用,还提高了死亡率.笔者参考相关文献,就胃手术后呼吸道感染的原因及相应的护理对策进行总结.……