健脾方药提取物对小鼠小肠类器官的干预

目的探讨健脾方药四君子汤多糖提取物、黄芪甲苷对小鼠小肠类器官的干预作用。方法取4~6周龄小鼠小肠约20 cm,经过清洗、剪切、消化,分离出小肠隐窝细胞团后,接种于含有多种细胞因子的基质胶中,在基质胶3D结构支撑下,培养形成具有小肠上皮样形态的立体多叶结构,即小肠类器官。光镜下观察小肠类器官的形态特征;采用免疫荧光染色后在激光共聚焦显微镜下观察E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达;传代2天后的小鼠小肠类器官分为3组:对照组、四君子多糖组(终浓度为100 mg/L)以及黄芪甲苷组(终浓度为10μmol/L),继续培养48 h后观察四君子汤多糖提取物、黄芪甲苷对小肠类器官出芽生长及增殖细胞核核抗原Ki-67表达。结果分离出的小鼠隐窝细胞团1天类似囊状,中心具有单个内腔;2~3天开始出芽;4~5天出芽增多,管腔结构进一步清晰,形成小肠类器官,初步建立了小肠类器官培养模式;四君子多糖组(100 mg/L)小肠类器官出芽数量较对照组明显增多(2.31±1.60vs 4.15±1.91,P<0.05);黄芪甲苷组较对照组中小肠类器官Ki-67表达明显增高。结论小肠类器官模型的构建为探讨肠黏膜修复的病理生理机制及药物干预提供了更完善的体外研究模型。四君子汤多糖提取物、黄芪甲苷的肠黏膜保护作用可能与其促进隐窝干细胞更新能力有关。     

基于全-精细指纹图谱与多元统计分析的栀子炒制前后差异评价

目的比较栀子炒制前后化学成分差异,明确其差异标志物,为栀子与炒栀子质量标准的制定提供参考。方法采用全-精细指纹图谱和多指标含量同时测定对栀子炒制前后样品进行分析,采用层次聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析对栀子与炒栀子指纹图谱进行比较,筛选出导致差异的特征性成分。结果栀子炒制前后指纹图谱中共有15个峰,其中12个峰为两者所共有,栀子与炒栀子对照指纹图谱的全指纹图谱相似度为0.991,而去除栀子苷积分后建立的精细指纹图谱相似度为0.880,低于0.90,可基本实现两者区分;多元统计分析结果表明栀子与炒栀子可明显分为2类,并筛选得到贡献度较大的4个差异标志物,分别为峰3、5、9(栀子苷)、11(西红花苷I);含量测定结果表明栀子炒制后栀子苷、西红花苷I、西红花苷II含量显著降低,而去乙酰车叶草酸甲酯含量显著升高。结论栀子炒制前后成分差异显著,建立的精细指纹图谱结合多成分含量测定方法可有效区分栀子与炒栀子,筛选得到的差异标志物可为其质量标志物的选择提供参考。     

调强放疗对肺癌患者心电图心肌酶谱及B型利钠肽的影响

  目的  探讨调强放疗（intensity modulated radiation therapy，IMRT）对肺癌患者心电图、心肌酶谱及B型利钠肽的影响。  方法  回顾性分析天津医科大学肿瘤医院2013年6月至2015年6月接受IMRT的肺癌患者203例，比较分析放疗前、放疗后1个月、2个月及3个月的心电图、心肌酶谱及B型利钠肽的变化，采用Logistic回归分析对可能引起上述指标异常的临床因素进行分析。  结果  放疗后心电图异常率52.1%，大多发生在放疗后第1个月，以ST-T改变为主，IMRT后患者心电图ST-T改变较放疗前的发生率明显增加，差异具有统计学意义（P < 0.001）；放疗后心肌酶谱和B型利钠肽异常率分别为39.9%和4.9%，放疗后2个月肌酸激酶、肌酸激酶同工酶及B型利钠肽明显升高，差异具有统计学意义（P=0.034，P=0.045，P=0.012）。肿瘤大体分型、治疗方式及放疗总剂量是影响肺癌患者放疗后心电图改变的独立危险因素；放疗总剂量是影响心肌酶谱及B型利钠肽改变的独立危险因素。  结论  肺癌IMRT可导致心电图、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶及B型利钠肽异常，其异常程度与放疗总剂量密切相关。      

葫芦素B固体分散体的制备

目的制备葫芦素B固体分散体。方法溶剂法制备固体分散体后,以溶出度为评价指标筛选药物-载体(PVP K30)比例。扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、差示扫描量热(DSC)、X射线衍射(XRD)进行表征。结果药载比为1∶11时,60 min内溶出度为62.01%。葫芦素B可能以无定形状态分散于载体中。结论该方法简便可行,葫芦素B制成固体分散体后体外溶出度明显提高。     

N末端B型脑钠肽及同型半胱氨酸对老年慢性病患者5年预后的预测价值

目的分析血浆N末端B型脑钠肽(NT-proBNP)和同型半胱氨酸(Hcy)对老年慢性病患者5年预后的预测价值。方法选取2012年1月-2014年7月国网湖北省电力有限公司职工医院检验科(健康体检业务)体检查出的老年慢性病患者226例,另选取同期体检健康老年人群50例作为对照组,检测研究对象NT-proBNP和Hcy水平,并随访5年观察患者死亡事件。结果死亡组患者的NT-proBNP和Hcy水平高于生存组和对照组(P<0.05),且死亡组患者随生存时间减少,NT-proBNP和Hcy水平逐渐上升(P<0.05)。NT-proBNP和Hcy水平与患者死亡事件呈正相关(P<0.001);NT-proBNP和Hcy水平与患者生存时间呈负相关(P<0.001)。NT-proBNP作为患者死亡事件的预测指标,ROC曲线下面积=0.773,最佳阈值=3149.50 pg/ml,灵敏度为82.9%,特异度为62.6%。Hcy作为患者死亡事件的预测指标,ROC曲线下面积=0.784,最佳阈值=39.50μmol/L,灵敏度为60.4%,特异度为88.7%。NT-proBNP阳性组的5年累积生存率明显小于NT-proBNP阴性组(P<0.001);Hcy阳性组的5年累积生存率明显小于Hcy阴性组(P<0.001)。结论NT-proBNP和Hcy水平对老年慢性病患者5年预后有一定预测价值,患者NT-proBNP水平>3149.50 pg/ml,Hcy水平>39.50μmol/L时,患者死亡风险明显增加,可作为老年患者慢性病危险分层的监控指标。     

雷公藤多苷联合来氟米特治疗老年活动性类风湿性关节炎的效果观察

目的观察雷公藤多苷联合来氟米特治疗老年活动性类风湿性关节炎(EORA)的临床效果。方法选取2017年1月-2018年6月桂林市第二人民医院收治的EORA患者78例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组39例。对照组单独应用来氟米特治疗,观察组给予雷公藤多苷联合来氟米特治疗。比较2组临床疗效、临床指标变化情况。结果观察组治疗总有效率为100.00%,高于对照组的87.18%(P<0.05);治疗后,观察组类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白水平(CRP)、关节压痛指数、肿胀关节数均优于治疗前,且观察组优于对照组(P<0.01)。结论雷公藤多苷联合来氟米特治疗EORA的效果较好,有助于改善患者临床症状,值得临床推广应用。     

下调FAM111B对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨下调FAM111B对乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF7细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:构建siR-FAM111B慢病毒载体,转染乳腺癌MDA-MB-231和MCF7细胞,qRT-PCR检查转染组与对照组FAM111B mRNA表达,Western blotting法检测各组细胞FAM111B蛋白表达。用CCK-8法检测细胞的增殖能力。流式细胞术检测Annexin-V/PI双染各组细胞的凋亡情况。Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:siR-FAM111B成功转染MDA-MB-231和MCF7细胞,转染后应用qRT-PCR和Western blotting检测,结果显示,FAM111B mRNA与蛋白水平均下调。siR-FAM111B能抑制两种细胞的增殖。Annexin-V/PI双染结果显示,下调FAM111B诱导两种细胞凋亡。Western blotting结果显示,下调FAM111B可以促进两种细胞Bax的表达,抑制Bcl-2的表达。结论:下调FAM111B能够抑制乳腺癌细胞的增殖,通过调节线粒体凋亡通路诱导细胞凋亡。     

益气小复方通过PI3K/AKT通路逆转乳腺癌他莫昔芬耐药的机制研究

目的:研究益气小复方在乳腺癌他莫昔芬(TAM)耐药中的作用及对胞内磷脂酞肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路的影响。方法:建立乳腺癌TAM耐药细胞(MCF-7/TAM)模型,细胞形态观察及MTT法测定细胞抑制率;不同浓度益气小复方处理MCF-7/TAM细胞,MTT法测定增殖抑制率,流式细胞仪测定凋亡率,蛋白印迹法(WB)测定细胞bax、bak、Bcl-2、PI3K、AKT、p-AKT、P-gp、PTEN蛋白表达水平。结果:与MCF-7细胞相比,MCF-7/TAM细胞形态不规则,细胞变大,触角延伸,细胞呈簇状生长,同浓度TAM处理后,MCF-7/TAM细胞抑制率明显降低,IC_(50)值显著升高(P0.05)。进一步研究益气小复方对MCF-7/TAM细胞增殖抑制发现,与MCF-7细胞相比,同浓度益气小复方处理后,MCF-7/TAM细胞细胞抑制率、IC_(50)值无差异(P0.05);选取40mg/ml、80mg/ml、160mg/ml进行后续实验,与MCF-7/TAM细胞组相比,低、中、高剂量益气小复方处理MCF-7/TAM细胞48h后,细胞凋亡率显著升高(P0.05);与MCF-7细胞组相比,MCF-7/TAM细胞组PI3K、P-gp、Bcl-2蛋白表达水平、AKT磷酸化水平显著升高(P0.05),PTEN蛋白表达水平、bax、bak显著降低(P0.05);与MCF-7/TAM细胞组相比,低、中、高剂量益气小复方组PI3K、P-gp、Bcl-2蛋白表达水平、AKT磷酸化水平显著降低(P0.05),PTEN蛋白表达水平、bax、bak显著升高(P0.05),呈剂量依赖性。结论:益气小复方可能通过抑制PI3K/AKT通路活化,逆转乳腺癌他莫昔芬耐药。     

基于NF-κB信号通路的细柱五加中impressic acid的抗炎作用研究

目的 研究细柱五加Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith中impressic acid（IA）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用。方法 以LPS诱导RAW264.7细胞建立炎症模型；使用EZ4U细胞增殖与细胞毒性分析试剂盒检测IA对RAW264.7细胞的毒性作用；Griess法测定一氧化氮（NO）水平；ELISA法测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）水平；RT-PCR法检测TNF-α、IL-1β mRNA表达；Western blotting检测高迁移率族蛋白B1（HMGB1）蛋白表达；ELISA法细胞质和细胞核的核因子-κB（NF-κB）水平。结果 Impressic acid可以显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中TNF-α、IL-1β水平和HMGB1蛋白表达，并抑制NF-κB从细胞质向细胞核的转移（P<0.05、0.01）。结论 细柱五加中IA对LPS诱导的RAW264.7细胞具有抗炎作用。