S100A8启动子的克隆及转录活性的检测

目的 构建小鼠S100 A8基因启动子序列的报告基因载体,通过报告基因技术检测在静息、脂多糖（LPS）、PolyI:C及NaASO2等刺激下该段启动子的转录活性。方法 采用PCR从小鼠脾组织基因组DNA扩增S100A8启动子序列(-826～+468);将其克隆至pDsRed1-1载体上,重组质粒经过PCR、酶切及测序分析正确无误后转染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,荧光显微镜下观察静息、LPS、PolyI:C和NaASO2刺激下红色荧光蛋白表达。结果 正确扩增出小鼠S100A8启动子片段(-826～+468);成功构建其红色荧光蛋白报告基因载体,证实该质粒转染RAW 264.7细胞后静息状态下仅可见少量而微弱的红色荧光,经LPS、PolyI:C和NaASO2刺激后,红色荧光强度和亮度明显增加。结论 小鼠S100A8启动子(-826～+468)在静息状态下即具有转录活性,炎性、氧化应激刺激后S100A8表达增强;该启动子的成功克隆和其报告基因载体的构建,为进一步研究S100A8的基因表达调控机制打下了良好的基础。     

急性硬膜外血肿钻孔清除引流60例报告

目的 探讨钻孔清除引流治疗急性硬膜外血肿的疗效和预后.方法 回顾性分析60例急性硬膜外血肿经钻孔清除引流患者临床资料.结果 16例清除满意,未再使用尿激酶,42例术后血肿残留30-60%,经引流管血肿腔注入尿激酶溶血肿,引流满意,1例术中出血止血不能改骨瓣开颅治愈,另1例术后出血增加急诊开颅血肿清除治愈.结论 钻孔清除引流术治疗急性硬膜外血肿对适宜者是一种经济微创而有效的方法.     

我国成人室内外活动时间研究

目的了解我国成人的室内外活动时间,为估算人体对空气中污染物暴露健康风险评价提供重要参数。方法基于"我国居民(成人)环境暴露行为模式研究",于2011年11月—2012年5月通过问卷调查的方式获得了我国31个省、自治区、直辖市居民的室内外活动时间,分析其分布特征和影响因素。结果我国居民的平均室内活动时间为1 200 min/d,平均室外活动时间为221 min/d,室内外活动时间均存在着一定的地区、城乡、性别、年龄和季节差异,同时受气温、职业和住宅类型等因素的影响,与国外相比存在一定的差异,我国居民的室外活动时间长于美国、日本、韩国和澳大利亚;室内活动时间短于澳大利亚和韩国,但长于美国和日本。结论在进行我国居民空气暴露健康风险评价中,要考虑到居民地区、性别、年龄等差异,根据调查居民的实际情况,选择合适的室内外活动时间参数。     

我国成人土壤暴露相关行为模式研究

目的了解我国成人与土壤暴露相关行为模式,为估算人体经皮肤接触暴露土壤中污染物健康风险评价提供重要暴露参数。方法基于"中国居民(成人)环境暴露行为模式研究"于2011年11月—2012年5月通过问卷调查的方式获得了我国31个省、自治区、直辖市居民的土壤接触时间,分析土壤接触时间的分布特征和影响因素,并与国外进行了对比。结果我国47.1%的居民具有土壤接触行为,我国居民的总土壤接触时间为204 min/d,其中,务农性接触为201 min/d,其他生产性接触为140 min/d,健身休闲性接触为64 min/d,其他情况接触为108 min/d;男女性分别为212和195 min/d;18~44岁、45~59岁、60~79岁和≥80岁居民分别为209、226、198和136 min/d;城市和农村地区分别为168和214 min/d;西北地区最高,华东地区最低。结论在开展我国居民土壤接触暴露相关的健康风险评价工作时,应该考虑到居民的地区、性别和年龄等差异,选用评价居民的实际土壤接触时间参数。     

JNK信号通路对NaAsO2诱导NIH3T3细胞中hnRNP K蛋白聚集体形成的影响

 目的：观察核不均一核糖核蛋白(hnRNP)K的表达与定位以及亚砷酸钠（NaAsO2）刺激NIH3T3细胞的反应情况及氧化应激变化,探讨JNK信号通路在hnRNP K蛋白聚集体形成中的作用。方法：构建重组载体pcDNA3-hnRNP K-HA,转染NIH3T3细胞,荧光显微镜观察内源性hnRNP K在细胞中的表达与定位,以及在NaAsO2不同刺激时间该蛋白聚集体的形成情况,并利用活性氧（ROS）检测试剂盒测定胞内ROS水平;给予JNK、MEK、PI3K/Akt、NF-κB和核转运等5种信号通路的抑制剂预处理后,观察聚集体的变化情况。结果：重组质粒构建正确,荧光显微镜观察显示hnRNP K主要定位于胞核中,而重组质粒转染NIH3T3细胞后,可见胞内有蛋白聚集体形成并随NaAsO2刺激时间的延长而递增,且过表达hnRNP K可抑制NaAsO2刺激细胞生成ROS;JNK信号通路抑制剂SP600125明显抑制聚集体的形成。结论：hnRNP K主要定位在NIH3T3细胞的胞核中,胞浆少量分布;NaAsO2可诱导NIH3T3细胞形成hnRNP K蛋白聚集体,此聚集体可抑制胞内ROS生成,且该聚集体的形成有赖于JNK介导的信号通路。     

大规模噬菌体DNA测序样品制备方法的改进与应用

目的优化大规模噬菌体DNA测序样品制备的方法，提高筛选效率。方法通过PCR扩增噬菌体环七肽库第一轮、第二轮和第三轮淘选产物中含插入目的片段噬菌体DNA，经琼脂糖凝胶电泳和DNA测序鉴定，并与经典的噬菌体DNA提取方法进行比较。结果PCR扩增法和经典法制备的噬菌体DNA的测序成功率分别为92．73％、93．75％，差异无统计学意义（P〉0．05）；两种方法制备的同一个噬菌体克隆的DNA经测序鉴定显示测序结果一致；第一轮、第二轮和第三轮淘选产物的噬菌体克隆经PCR扩增和电泳鉴定，发现无插入目的片段的噬菌体克隆检出率逐轮增加分别为1．04％、4．17％和22．69％（P〈0．01）。结论PCR扩增含插入目的片段噬菌体DNA的方法可使大规模噬菌体筛选和DNA测序更加方便、快捷、实用，值得推广。     

远志总苷对快速老化模型（SAM—P／8）小鼠学习记忆能力的作用及其机理研究

目的探讨远志总苷对快速老化模型小鼠学习记忆能力的作用及其机制。方法以SAM—P／8小鼠为对象，给予远志总苷，连续灌胃30d，采用水迷宫方法逐日测定小鼠的学习记忆能力，用化学比色法测定脑组织总蛋白含量、总抗氧化能力和乙酰胆碱酯酶活性，用放免法测定血清中IL-2含量。结果远志总苷能明显提高SAM—P／8小鼠的学习记忆能力，缩短到达目的地的时间；显著提高脑组织总蛋白含量、总抗氧化能力、降低乙酰胆碱酯酶活性及血清中IL-2含量。结论远志总苷可提高SAM—P／8小鼠的学习记忆能力，其作用机理可能与降低脑组织氧化损伤有关。     

严重急性呼吸综合征患者细胞因子与趋化因子表达谱的特征

由于严重急性呼吸综合征(SARS)的免疫病理机制尚未阐明,目前尚无有效药物或治疗方法能够控制这种疾病.为了探讨SARS发病的免疫学机制,我们研究了SARS患者外周血细胞因子与趋化因子的表达谱以及肺和淋巴组织的免疫病理改变.采用液相芯片技术,动态扫描了23例诊断明确的SARS患者血中14种细胞因子与趋化因子;应用反转录PCR、免疫组化和免疫荧光技术对SARS死亡患者经尸体解剖的肺和淋巴组织进行免疫病理学观察.     

血运障碍性肠梗阻的诊断与治疗

血运障碍性肠梗阻病情凶险,误诊率及病死率均较高。早期诊断,及时恢复受累肠管血运是改善其预后的关键因素。目前临床检查方法有多种,CT以其诊断率高达90%以及无创的优势而取代血管造影成为血运障碍性肠梗阻确定性诊断的首选方法。治疗方法的选择因病因不同而不同,动脉栓塞者多需手术治疗,静脉血栓形成者以抗凝治疗为主。