糖尿病患者红细胞膜Na~ -K~ ATP酶的改变

测定了34例无并发症的非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜Na~( )-K~( )ATP酶活性,并与20例年龄相匹配的正常人作比较。结果表明糖尿病患者红细胞膜Na~( )-K~( )ATP酶活性比正常人明显降低,该酶活性与馒头餐胰岛素释放试验的最高胰岛素水平和胰岛素曲线下面积呈明显正相关,而与空腹血糖和糖化血红蛋白无明显相关。糖尿病者红细胞超氧化物歧化酶含量明显降低,但与Na~( )-K~( )ATP酶活性之间无明显相关。提示糖尿病时Na~( )-K~( )ATP酶活性受血中胰岛素水平的调节。     

肾病患者随机尿蛋白与肌酐比值的测定及临床评价

目的　通过观察肾脏病患者 2 4h尿蛋白 (2 4UP)与随机和晨尿蛋白 /肌酐比值 (UP/Ugcr)的相关性 ,探讨采用随机尿或晨尿UP/Ugcr来代替 2 4UP 的可行性。方法　尿蛋白测定用改良双缩脲法 ,血尿肌酐测定用Jaffe法。结果　按肌酐清除率 (Ccr)将肾病患者分为 5组 ,Ccr>80ml/min、5 0～ 80ml/min、2 0～ 5 0ml/min、10～ 2 0ml/min、<10ml/min。各组随机尿和晨尿UP/Ugcr比值与 2 4UP 的相关系数分别为 0 .87、0 .94、0 .92、0 .87、0 .4 3和 0 .89、0 .85、0 .92、0 .90、0 .2 6。晨尿和随机尿液UP/Ugcr之间没有统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论　当Ccr>10ml/min时 ,随机尿和晨尿UP/Ugcr比值与 2 4UP 有良好的相关性 ,可以用随机尿或晨尿UP/Ugcr代替 2 4UP 用于临床尿蛋白程度的监测。当Ccr<10ml/min时 ,两者相关性较差 ,无临床应用价值。     

北京大学临床检验医学生毕业后医学教育的探索与实践

1　背景简介现代医学终身教育分为 3个阶段 ,即 :学校基本教育———毕业后医学教育———继续医学教育。毕业后医学教育又包括了研究生教育和住院医师、专科医师培训两种培养途径。医学检验专业大学本科教育始于 80年代 ,目前在国内有两种培养模式 :医师型和技师型。我校自 1989年起即明确实施医师型培养方案并用 ,4年时间完成检验系与医学系的前 3 5年并轨教学和后 1 5年专业教学 ,为检验医师毕业后的研究生教育和住院医师规范化培训奠定基础。自 1993年卫生部发文实施临床住院医师规范化培训以来 ,有关临床检验医学专业医师的规范化培训…     

心肌肌钙蛋白Ⅰ在非ST段抬高急性冠状动脉综合征诊断和预后中的临床应用

目的 评价心肌肌钙蛋白I（cTnI）对非ST段抬高心肌梗死（NSTEMI）的诊断价值，并探讨其与非ST段抬高急性冠状动脉综合征（NSTEACS）近期和远期预后的关系。方法 cTnI测定采用新一代Beckman Coulter AccuTnI化学发光试剂盒；应用操作者工作特征曲线（ROC曲线）分析cTnI对NSTEMI的诊断的敏感度和特异度；同时应用ROC曲线比较不同生化标志物对NSTEMI诊断价值；将269例NSTEACS患者以cTnI水平0．04“g／L为分界点进行分组，比较cTnI升高组和cTnI正常组30d内和1年内急性心肌梗死和／或心源性死亡事件的发生情况。结果ROC曲线分析结果显示诊断NSTEMI的最佳cut-off值为0．1μg/L，此界值诊断的敏感度和特异度为91．4％和89．3％；肌酸激酶及其同工酶MB、乳酸脱氢酶和“一羟丁酸脱氢酶各指标的诊断敏感度和特异度均低于cTnI；单因素分析显示cTn1升高组30d内和1年内复合心脏事件的发生率（3．6％和6．02％）较cTnI正常组（均为0）显著升高（P〈0．05）；多因素分析显示校正高血压、糖尿病、高脂血症、陈旧心肌梗死、心电图改变等危险因素后，cTnI升高是30d内发生复合心脏事件的独立危险因子，风险比值（OR）：8．175。95％可信区间（a）为1．014-65．917，P=0．049；也是1年内发生复合心脏事件的独立预告因子，OR=2．612，95％CI为1．164～5．859，P=0．02。结论 Beckman公司出品的cTnI对NSTEMI的诊断具有较高的敏感度和特异度，对NSTEACS患者的预后判断具有重要价值。     

重组人α1-微球蛋白在毕赤酵母中的高效分泌性表达

目的 获得可溶、稳定、高纯度的α1-微球蛋白(α1-microglobulin,α1-MG),为临床检测标准品、质控品制备奠定基础.方法 制备构建重组人毕赤酵母真核分泌表达质粒,并对重组α1-MG进行诱导表达、纯化和鉴定.应用PCR方法扩增重组人α1-MG pET-15b质粒,得到N端带有6个组氨酸"标签"(6 × His-tag)的α1-MG融合基因,将该基因插入到真核酵母分泌表达质粒pPIC9中,筛选得到正确序列的重组分泌表达质粒pPIC9-MG、并转化毕赤酵母菌菌株GS115(Pichia pastoris GS115);用甲醇进行重组人α1-MG的诱导表达,摇瓶发酵,上清α1-MG含量测定;目的蛋白采用硫酸铵沉淀、一步亲和层析纯化并通过免疫学含量测定、PAGE电泳、Western blot以及生物质谱进行鉴定;初步进行稳定性观察.结果 成功构建了重组人α1-MG真核酵母表达载体,核酸测序与预测一致,并在毕赤酵母中实现了重组人α1-MG的分泌性表达,表达量可达73 mg/L,约占总蛋白的30%.经纯化及鉴定,得到了可溶性的、具有天然蛋白生物学活性的PAGE纯目的蛋白.结论 首次在毕赤酵母中实现重组人α1-MG的高效分泌性表达,表达目的蛋白具有良好的生物学活性、稳定性好、易纯化等优点.     

人血清假性胆碱酯酶连续监测法测定方法学的建立及其在肝功能评价中的应用

目的 建立一种稳定的人血清假性胆碱酯酶速率测定方法。方法 测定反应的初速度，对反应体系的最佳pH、离子强度、底物用量进行选择，并对所建立方法的性能，包括试剂的稳定性进行评价。结果 采用双试剂连续监测法测定假性胆碱酯酶的活性，试剂Ⅰ的最适组成：含0．25mmol/L DNTB的磷酸盐缓冲液(80mmol/L，pH7．7)；试剂Ⅱ的最适组成为：含60mmol/L碘化正丁酰硫代胆碱水溶液。液体试剂于4℃储存至少可以稳定一年。本法测定线性可达12000U/L，批内和天间变异小于2．5％，和Roche公司出品的假性胆碱酯酶测定试剂所测参考值和对患者测定结果有很好的一致性。结论 本法操作简便，试剂配制容易而且稳定性好，推荐作为常规测定的方法。     

猪肾γ-谷氨酰转肽酶纯化及其互通性初步研究

目的:从猪肾中纯化γ-谷氨酰转肽酶(GGT),并对其稳定性、互通性进行初步研究,为制备国产GGT参考物建立基础。方法:使用冷丙酮沉淀、硫酸铵处理及层析的方法从猪肾中纯化提取GGT。采用非加速试验方法观察其稳定性,并用国际临床化学协会推荐的参考方法和常规方法,分别对不同基质中的目的蛋白进行测定,根据两者偏离方向和大小与新鲜人血清是否一致判定其互通性。结果:目的蛋白经SDS-PAGE电泳呈单一条带,其GGT特异性比活为150 U/mg。-20℃下在人工基质中保存至少6个月无酶活性损失。高中低不同活性浓度的目的蛋白测定结果未偏离出由多份人血清样本预测的95%置信区间。结论:从猪肾中纯化得到的GGT,具有较高的特异性比活,在人工基质中稳定性和互通性良好。