siRNA下调Smad3基因后对多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶表达的影响

目的以Smad3基因为研究对象,筛选出该基因的有效siRNA干扰载体,并探讨下调表达Smad3基因对多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶（ppGalNAcTs）家族mRNA水平表达的影响。方法将事先构建的3个带有荧光标记的干扰载体分别转染人肝星状细胞株（HSC）中,通过RT-PCR、Western blot方法分别从mRNA水平及蛋白水平检测干扰效率。并通过转染有效的Smad3基因的siRNA表达载体,检测下调Smad3以后对糖基转移酶ppGalNAcTs家族mRNA表达的影响情况。结果成功筛选到Smad3基因的有效siRNA干扰载体,检测出转染了Smad3的siRNA表达载体的肝星状细胞中Smad3的mRNA和蛋白表达都受到了抑制,而糖基转移酶ppGalNAcTs的mRNA表达也随之发生了一些变化。结论成功筛选到一个Smad3基因的siRNA干扰载体,继而可转染人肝星状细胞,并抑制其中Smad3蛋白的表达,为研究siRNA方法在肝纤维化中的治疗作用提供了实验基础和理论支持。     

β照射对NIH3T3细胞中基质金属蛋白酶和糖基转移酶表达的影响及牛磺酸的干预作用

目的观察β射线对NIH3T3成纤维细胞中基质金属蛋白酶2（MMP2）和N-乙酰氨基半乳糖转移酶2（ppGalNAcT2，E．C2．4．1．41）基因mRNA表达的影响，并探讨牛磺酸对β辐射损伤的防护作用。方法以不同剂量的高能电子射线模拟β射线照射NIH3T3细胞，另外在15Gy照射组中提前12h加入不同浓度的牛磺酸（Tau），照后12h收集各组细胞，采用lit—PCR法检测MMP2、ppGalNAcT2在mRNA水平的表达差异。结果β射线照射NIH3T3细胞后MMP2的mRNA表达量增加，且与照射剂量呈正相关，ppGalNAcT2的变化情况正好相反，加入牛磺酸后可以起干预作用。结论5—15Gyβ射线照射对NIH3T3细胞中ppGalNAcT2在mRNA水平的表达有抑制作用，提示ppGalNAcT2可能与细胞的癌变等过程有关，牛磺酸能抑制MMP2的表达，同时促进ppGalNAcT2的表达，因而具有辐射防护作用。     

两株CML细胞K5625NMeg-01表面糖链结构的表达差异及伊马替尼对其影响

细胞表面的糖链参与信号分子识别、细胞间的识别、黏附等多种生物学功能,在肿瘤的侵袭和转移过程中也扮演重要角色。当细胞癌变时,细胞表面的糖链通常异常表达,其原因主要是合成糖链的糖基转移酶表达水平变化。该实验通过流式细胞术发现CML细胞株K562表面T抗原、唾液酸化的T抗原和多聚乳糖胺的表达水平~tMeg—01细胞高;而RT-PCR结果显示两细胞株间ppGalNAcT2、C1GalTl和ST6GalNAcl种糖基转移酶基因的mRNA的表达水平没有差异性,但K562细胞中ST3Gall、B3GnT8和ST6GalNAc4的mRNA表达水平lzLMeg．01高;并且发现伊马替尼能抑制K562细胞表面多聚乳糖胺及合成多聚乳糖胺的B3GnT8的表达。由于K562细胞是由转移至胸腔的CML细胞建系而来的,因此推测细胞表面T抗原、唾液酸化的T抗原和多聚乳糖胺在CML的侵袭转移过程中可能具有一定的作用,而伊马替尼处理K562细胞后对细胞表面糖链结构的改变其分子机制值得进一步研究。     

跨世纪生物化学教师队伍建设探讨

２１世纪是生命科学的世纪，而生物化学（简称生化）是生命科学的一门重点学科，尤其近年来随着分子生物学的迅猛发展，更带动了生物化学与分子生物学合为一体，成为生命科学中的姣姣者。为培养跨世纪的合格医学人才，建设一支跨世纪的生化教师队伍，已迫在眉睫。我们结合本院生化教师队伍的现状，对此探讨如下。１　我院生化教师队伍的结构现状近年来我院生化教师共１６名，其中教授２名，副教授３名，讲师５名，助教６名，教授∶副教授∶讲师∶助教＝２∶３∶５∶６。学历结构到１９９９年止，有博士３名（占１９％），硕士８名（占５０％…     

三氧化二砷（As2O3）诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究

目的 观察不同浓度的三氧化二砷（As2O3）作用不同时间段后对乳腺癌细胞MCF-7的诱导凋亡作用和对β3GnT2 及β3GnT8表达的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 不同浓度As2O3作用于乳腺癌细胞后,观察其对乳腺癌细胞生长状态的影响;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察其对MCF-7细胞凋亡的影响;同时采用RT-PCR 和Western Blot 检测相关基因mRNA及蛋白的表达水平变化.结果 不同浓度的As2O3 均可抑制乳腺癌细胞株MCF-7生长,其抑制作用随剂量增大而加强,呈时间剂量依赖性.RT-PCR 结果显示：β3GnT2、β3GnT8在各个浓度As2O3剂量组作用下,与空白组比较,均有不同程度的变化.1μg/mL和2μg/mL浓度组、4μg/mL和40μg/mL浓度组在相同时间段下分别比较,均有统计学差异（P ＜0.05）.Western Blot 检测相关蛋白结果与mRNA表达水平基本一致.β3GnT2蛋白表达中,4μg/mL（4h）组、40μg/mL（4h） 组分别与4μg/mL（48h）浓度组比较,均有明显差异（P＜0.05）;而在β3GnT8蛋白表达中,40μg/mL（4h）、4μg/mL（48h） 浓度组分别与空白组比较,有显著性差异（P＜0.05）.结论 As2O3对MCF-7细胞有显著的体外生长抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖性;As2O3在体外能诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡效应与剂量呈正相关;As2O3还能下调β3GnT2和β3GnT8基因的表达.     

肾部分切除术治疗局限性肾癌的长期结果：10年随访

为了解肾部分切除术对需要考虑保护肾功能的肾细胞癌患者的作用,作者对1980～1988年的117例局限性肾细胞癌患者施行部分肾切除手术,10例患者因在围手术期死亡或手术时已有转移故被剔除,107例获得长期随访,随访至少10年或至患者死亡。其中男性73例,女性34例,患者手术时的平均年龄为608岁。68%的患者(73例)有症状而发现肾癌,32%的患者(34例)肾癌为无意中发现。肿瘤平均大小为(47±2.4)ｃｍ(≤4ｃｍ者59例),其中Ｔ1ａ43例、Ｔ1ｂ21例、Ｔ25例、Ｔ3ａ21例、Ｔ3ｂ17例。肿瘤单发91例、多发16例。结果显示:5年肿瘤特异性生存率为88%,10年为73%。Ｃ…     

男性下尿路症状和勃起功能障碍的相关性分析

目的:了解社区年龄≥50岁男性人群中有下尿路症状(LUTS)者ED的患病情况,评估LUTS(梗阻症状、刺激症状)和ED之间的相关性。方法:2006年10～11月对社区年龄≥50岁、有固定性伴侣的男性进行IPSS、IIEF-5调查,调查对象均签署知情同意书,完成规定问诊及相关检查,应用统计学方法对IPSS评分、梗阻症状评分以及刺激症状评分与勃起功能之间的相关性进行分析。结果:共调查245例,171例有LUTS患者中ED患病率为81.9%(140/171),无LUTS患者74例作为对照组,ED患病率为29.7%(22/74)。LUTS组中各年龄组ED的患病率分别为:50～59岁73.1%(38/52)、60～69岁82.1%(46/56)、≥70岁88.9%(56/63),各年龄组之间IPSS、IIEF-5比较差异有显著性(P<0.01),各年龄组之间轻、中、重度ED所占比例比较差异有显著性(P<0.01)。LUTS组中IPSS评分程度分布:轻度80例(46.8%)、中度67例(39.2%)、重度24例(14.0%),不同程度LUTS中ED者所占比例分别为:轻度LUTS71.3%(57/80)、中度LUTS89.6%(60/67)、重度LUTS95.8%(23/24),LUTS程度和ED患病率之间有显著相差性(r=0.52,P<0.01)。171例平均梗阻症状评分(3.1±3.6)分,梗阻症状与IIEF-5评分相关系数r=-0.41(P<0.01),平均刺激症状评分(6.8±4.9)分,刺激症状与IIEF-5评分相关系数r=-0.59(P<0.01)。结论:社区LUTS人群中ED有较高的患病率,LUTS程度和ED患病率显著性正相关,与梗阻症状相比刺激症状对中老年男性性生活的影响更大。在治疗LUTS的同时应该考虑ED问题,以求更有效改善患者生活质量。     

经皮穿刺传入神经调节治疗难治性膀胱过度活动症的多中心研究

在美国约有 2 0 0 0万膀胱过度活动症患者 ,其主要症状为尿急、尿频、尿失禁和盆底疼痛。确切病因尚不清楚 ,多数学者认为是多因素 ,且与盆底密切相关。不论是何种病因 ,饮食、膀胱锻练、药物和理疗等传统的治疗方法常常耐受差 ,或是效果不佳。为此 ,作者对难治性的膀胱过度活动症患者 ,或合并有盆底功能障碍者进行了经皮穿刺外周传入神经刺激治疗方法的临床多中心研究 ,评价治疗的有效性和安全性。 5个中心共有 5 3例经传统方法治疗失败的患者入选 ,患者每周接受 1次经皮胫神经电刺激治疗 ,采用 34号针 ,针刺部位位于踝上 3横指。治疗前、…     

γ射线对白血病细胞K562 ppGalNAcT2 Mrna表达的影响及中药多糖的防护作用

目的 探讨γ射线对白血病细胞株K562中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mR-NA表达的影响,并探讨中药多糖对此种影响的防护作用。方法 以不同剂量的~(60)COγ射线照射K562细胞,并设加中药多糖实验组,观察不同剂量(5Gy、10Gy、15Gy)γ射线对K562细胞ppGalNAcT2 mRNA表达影响,及加入不同剂量中药(50mg/L,100mg/L,200mg/L)后对10Gy照射K562细胞组中T2 mRNA表达的防护作用。以RT-PCR法检测ppGalNAcT2 mRNA的表达差异变化。结果 γ射线照射K562细胞后ppGalNAcT2 mRNA表达明显减少,且与剂量呈负相关,而中药多糖则可对抗此种作用,使加中药多糖组细胞在照射后ppGalNAcT2 mRNA表达水平维持在正常细胞水平。结论 5～15Gyγ射线照射抑制白血病细胞ppGal-NAcT2 mPNA表达,可能与肿瘤细胞受照后分化抑制有关,而中药多糖明显对抗此种抑制作用。     

成人巨大苗勒管囊肿一例

患者男，55岁，因“排尿、排便困难伴全身乏力2个月”于2007年9月3日人院。患者于2个月前无明显诱因出现排尿、排便困难，排尿踌躇，尿线变细，大便次数增多，4—5次／d，量少，为黄色稀便，伴全身乏力，无明显发热及腰痛，无尿频、尿急、尿痛，无肉眼血尿及便血。就诊于当地医院，诊断为前列腺炎，给予输液（具体不详）治疗，症状无明显缓解。