肝移植术后患者急性肾损伤危险因素及严重程度分析

目的分析肝移植术后患者急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)的危险因素及AKI严重程度的影响因素。方法收集2005年1月—2015年8月在我中心进行肝移植手术患者,排除术前AKI患者,共入组469例,对该组患者术前、术中、术后影响AKI的危险因素及术后4周时的转归进行分析、研究。结果 469例患者中,术后发生AKI者274例(AKI组),无AKI者195例(非AKI组),发病率为58.4%。受体身体质量指数(body mass index, BMI)、术前肌酐水平、冷缺血时间、手术时间、下腔静脉阻断时间、术后乳酸峰值、术后AST峰值等均是发生AKI的危险因素。术后4周AKI组20.4%患者肾功能仍然异常,病死率为3.6%,较非AKI组明显升高(P=0.027)。结论肝移植术后发生AKI的影响因素较多,受体BMI、术前肌酐水平、阻断下腔静脉时间、手术时间、术后乳酸峰值、术后AST峰值均是发生AKI的独立危险因素。术后4周AKI组患者肾功能异常及病死率较非AKI组均明显升高。     

二甲亚砜不同浓度对猪肝细胞-80℃保存影响的初步研究

为寻求有效的长期保存肝细胞方法,我们采用含不同浓度二甲亚砜(DMSO)的保存液对猪肝细胞进行保存,以筛选合适的冻存条件与方法,进一步提高冻存肝细胞的活力,为生物人工肝研究提供细胞材料。 一、材料和方法 1.实验分组及方法:体外两步胶原酶灌注法获取新生中国实验性小型猪(第三军医大学动物研究所)肝细胞,以每毫升     

三明治培养新生实验小型猪肝细胞的功能与形态

目的 探索双层胶原夹心猪肝细胞的方法，观察培养猪肝细胞的功能与形态特征。方法 将两步法分离的新生中国实验小型猪肝细胞接种于胶原被覆的培养板常规培养，24h后，肝细胞上再加一层胶原形成双层胶原夹心（三明治）培养，观察培养猪肝细胞的白蛋白分泌、形态学特征和乳酸脱氢酶（LDH）漏出量。结果 成功将新生实验小型猪肝细胞固定于双层胶原中，形成三明治状。培养1周内，用SDS／PAGE可检测出猪肝细胞分泌的白蛋白，倒置相差显微镜下观察到典型的形态特征，培养期内LDH漏出量较少。结论 可用双层胶原对新生乳猪肝细胞进行三明治样培养，为肝细胞提供更接近体内的培养环境，有助于维持特殊的肝功能和形态学特征。     

甘草酸二铵治疗各类肝病629例临床观察

目的　回顾性观察甘草酸二铵注射液在慢性肝炎、肝炎肝硬化、药物性肝炎和酒精性肝炎治疗中消炎降酶的作用。方法　甘草酸二铵注射液 15 0mg ,加入 5 %～ 10 %葡萄糖注射液 2 5 0ml中静脉点滴 ,治疗轻～中度慢性肝炎、肝炎肝硬化、药物性肝炎和酒精性肝炎共 6 2 9例 ,强力宁注射液(10 0ml/d)治疗慢性肝炎 12 7例作为对照 ,治疗结束后进行疗效分析。结果　两组患者症状、体征的恢复无明显差异 ,但丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、血清胆红素 (SB)的恢复速度治疗组明显优于对照组。在治疗 17d时治疗组有 93.3%患者的ALT恢复正常 ,而对照组为 73.3% ,两组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。在治疗 10d时治疗组有 86 .7%患者的SB恢复正常 ,而对照组仅为 4 0 % ,两组有显著差异 (P<0 .0 1)。在治疗 17d时治疗组和对照组的血清白蛋白含量分别为 (4 4 .7± 5 .6 7) g/L和 (4 5 .2±5 .5 6 ) g/L ,两组差异无显著性 (P <0 .0 5 )。在本研究中 ,甘草酸二铵治疗组未发生明显的不良反应。结论　甘草酸二铵可明显改善病毒性、药物性、酒精性等肝脏急性或慢性炎症的临床症状和肝功能指标 ,在慢性肝炎组中 ,甘草酸二铵在改善临床症状和肝功能指标方面优于强力宁     

老年HBV相关慢加急性肝衰竭患者临床特点及其近期预后危险因素的研究

目的探讨老年乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者的临床特点,以及影响患者近期预后的危险因素。方法对我院2010年1月~2014年1月收治的139例老年HBV相关ACLF患者进行回顾性研究,选取同时期199例非老年HBV相关ACLF患者进行对照。运用多因素Logistic回归分析,得出影响老年患者近期(12周)预后的危险因素。结果老年组在女性发生率、肝硬化发生率、食管静脉曲张破裂出血发生率、肝肾综合征(HRS)发生率、碱性磷酸酶(ALP)、血糖(GLU)等方面高于非老年组;老年组在生存率、白细胞数(WBC)、血小板(PLT)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、胆碱脂酶(CHE)、钠(Na)等方面低于非老年组。根据近期预后将老年HBV相关ACLF患者分为生存组和死亡组,死亡组在有无乙肝家族史、肝硬化发生率、肝性脑病(HE)发生率、食管静脉曲张破裂出血发生率、HRS发生率、腹水发生率、感染发生率、国际标准化比率(INR)、总胆红素(TBIL)、胆汁酸(TBA)、肌酐(CRE)、乙肝抗原(HBe Ag)阳性率等方面高于生存组;死亡组在PLT、ALB、CHE、Na等方面低于生存组。多因素Logistic回归分析显示,乙肝家族史、HE、INR、TBIL、TBA、CRE、Na是预测老年HBV相关ACLF患者近期预后的独立危险因素。结论老年HBV相关ACLF患者肝脏基础差、并发症发生率高、女性发生率高,整体预后不良。乙肝家族史、HE、INR、TBIL、TBA、CRE、Na是预测老年HBV相关ACLF患者近期预后的独立危险因素。     

1种血清戊型肝炎病毒荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立

目的建立一种从血清样本中基于荧光定量PCR的快速检测戊型肝炎病毒的方法。方法 (1)从GeneBank获得包含我国流行的3个基因型的100条戊型肝炎病毒序列。选择合适的序列设计合成荧光定量引物和Tanqman探针。(2)将引物从血清模板中PCR扩增片段在体外转录产物作为荧光定量PCR标准品,同时引入了微量核酸裂解液。(3)取10份临床戊肝阳性患者血清样品,用建立的方法检测,进一步验证该方法。结果该检测技术可以有效检测I型和IV型戊型肝炎阳性患者的血清样本,而对其他病毒传染病患者血清检测为阴性结果,证实该RT-PCR检测技术的特异度较高、可靠性较好。对10份临床血清样品的验证检测进一步证实了该方法快速、便捷、灵敏且重复性好。结论建立了一种适用于中国人群戊型肝炎病毒主要基因型检测的荧光定量RT-PCR检测技术。可满足戊型肝炎病毒临床早期快速诊断的需求。     

血清胱抑素C对慢加急性肝衰竭患者肾损伤的早期诊断意义

目的研究血清胱抑素C(CysC)水平对慢加急性肝衰竭(ACLF)患者急性肾损伤(AKI)的早期诊断意义。方法选取2011年8月-2012年10月于本院住院的慢性乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(ACLF)、慢性乙型肝炎(CHB)的患者各60例,同期60例健康者作为对照。肝衰竭患者随访至出院,动态收集患者血清。采用胶乳增强免疫比浊法测定血清CysC水平。通过绘制CysC、肌酐和血钠浓度诊断AKI的受试者工作特征曲线(ROC),获得其曲线下面积(AUC)及最佳临界值。正态分布的计量资料,多组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),2组间比较采用双侧t检验;否则,组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料采用χ2检验。相关分析采用Pearson相关检验。AUC及最佳临界值的计算采用Medcal 12.7.1.0进行分析。结果肝衰竭患者血清CysC水平为(1050±444)ng/ml,显著高于健康对照组(638±275)ng/ml(P=0.016)和CHB组患者(661±225)ng/ml(P=0.028)。ACLF患者血清CysC水平与肌酐水平相关性不显著(r=0.311,P0.05),但与MELD评分呈显著正相关(r=0.529,P0.01)。住院期间,共有8名肝衰竭患者(13.3%)发展为急性肾损伤,多元Logistic回归分析结果显示,血清CysC水平是ACLF患者发生肾损伤的独立影响因素(OR=1.008,P=0.021)。AUC分析显示早期诊断ACLF患者急性肾损伤的血清CysC水平建议值为1210 ng/ml。结论血清CysC检测有助于ACLF伴肌酐水平正常患者住院期间发生急性肾损伤的早期预测。     

原代乳猪肝细胞低温保存的初步探索

目的：探讨4℃低温保存肝细胞的方法。方法：两步法分离新生乳猪肝细胞，将肝细胞分别以3种不同低温保存液（RPM1－1640培养液；加有聚乙二醇（PEG）的RPM1－1640培养液；UW液）4℃保存24h、48h及72h。复苏后接种培养，作存活率、贴壁率及细胞活性等检测，并观察其形态结构变化。结果：不同低温保存液保存不同时间的猪肝细胞的活力、生物学功能及形态学表现均有所不同，其中单用RPM1－1640培养液组效果最差，PEG组和UW组结果相似，均保持70％以上存活率达48h，活力与药物代谢功能无明显差别，镜下见复苏肝细胞浆内含丰富颗粒，可见较多双核细胞，线粒体无减少，粗面内质网数下降，滑面内质网增多。结论：猪肝细胞在4℃可保存48h，加入PEG的RPM1－1640培养液可更好地保持肝细胞活性。     

对疑难肝病临床诊断的认识与思考

为进一步提高我国疑难肝病的诊断水平,本文分析我国疑难肝病增多的原因,提供部分疑难肝病疾病谱特点以供参考,并探讨疑难肝病的临床诊断路径。     

药物性肝衰竭研究进展

药物性肝衰竭(DILF)比例高，损伤机制多样，多数固有型和部分特异质型DILF可能与线粒体功能障碍、氧化应激、胆汁酸稳态改变有关，特异质性DILF是患者自身适应性免疫攻击的结果。DILF预后较差，是死亡和肝移植的重要原因，目前较多研究致力于重症化的早期预测和预后判断，产生了不同预测模型和生物学标志。