邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露致仔鼠睾丸膜联蛋白A5的表达差异

背景：国内外关于邻苯二甲酸二丁酯导致雄性生殖系统畸形发生机制的探讨多集中于邻苯二甲酸二丁酯干扰胚胎期睾丸睾酮合成途径的研究，对其基因表达调控的因素及功能蛋白质之间相互干扰的网络效应却并不明了。蛋白质组学能够从整体水平反映蛋白质组分，并筛选功能相关蛋白。 目的：探讨邻苯二甲酸二丁酯胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白表达谱的影响，分离并鉴定差异表达蛋白质。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，实验于2006-08/2007-10在南京医科大学动物实验中心及南京医科大学生殖医学重点实验室完成。 材料：将孕鼠随机分为实验组和对照组，每组5只。妊娠14~18 d。 方法：实验组按800 mg/(kg?d)染毒孕鼠，对照组予大豆油5 mL/d。妊娠21d 取出胚胎大鼠睾丸，提取总蛋白，进行二维凝胶电泳分离和图像分析，筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定，并选择关键蛋白进行验证。 主要观察指标：①两组蛋白的电泳差异比较。②酶切，MALDI-TOF分析，数据库检索，生物信息学检索结果。③两组蛋白Western blotting检测及免疫组织化学染色结果。 结果：共筛选出33个差异表达蛋白（t≥2.831，P < 0.05），其中14个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定，包括膜联蛋白A5、过氧化物酶6、泛素羧基末端水解酶L1等。运用Western blotting，验证了膜联蛋白A5在实验组表达量明显高于对照组，通过免疫组织化学方法，发现膜联蛋白A5主要定位在胎鼠睾丸Leydig细胞中。 结论：实验运用蛋白质组学方法，建立了邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露雄性仔鼠睾丸与正常仔鼠睾丸蛋白质差异表达谱系，鉴定出14个蛋白点，确定了膜联蛋白A5在胎鼠睾丸的定位。     

邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂溶液治疗疥疮的疗效观察

邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂溶液治疗门诊疥疮患者75例，1个疗程治愈率为90．67％，分别使用二丁酯-OP乳化剂溶液和疥宁霜治疗体检疥疮患者各80例，1个疗程治愈率分别为92．5％和82．50％，差异有显著性（0。9．00，P〈0．005）。二丁酯-0P乳化剂是一种安全可靠、高效的疥疮治疗药物。     

邻苯二甲酸二丁酯对大鼠睾丸生化酶及脂质过氧化的影响

目的 :探讨邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)对睾丸生化酶及脂质过氧化的影响 ,为接触人群早期诊断及生物学监测提供参考评价指标。　方法 :选择 6周龄雄性SD大鼠随机分成 4组 ,每组 16只。灌胃给予DBP ,剂量为 0 (对照组 )、2 5 0、5 0 0、10 0 0mg/ (kg·d)。于染毒 2周和 4周末分别处死 8只大鼠 ,收集睾丸及其他脏器和血清 ,以 1∶3的比例制备睾丸匀浆。测定血清和睾丸匀浆中生化酶及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSHPx)的活性和谷胱甘肽 (GSH)的含量。　结果 :随DBP染毒剂量的增加 ,肝脏器系数明显上升 ,而睾丸脏器系数显著下降 (P <0 .0 1)。染毒 2周后 ,血清中GSHPx活性和睾丸匀浆中GSH水平下降趋势明显 ,而匀浆中GSHPx活性呈上升趋势 ,10 0 0mg/ (kg·d) 组与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。染毒 4周后 ,血清中碱性磷酸酶活性呈上升趋势 ,血清和睾丸匀浆中山梨醇脱氢酶 (SDH )活性受到明显抑制 ,10 0 0mg/ (kg·d) 组与对照组相比差异均有显著性 (P <0 .0 1)。血清GSH水平呈上升趋势 ,10 0 0mg/ (kg·d) 组与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。　结论 :DBP可对机体产生明显的毒性作用 ,主要靶器官为肝脏和睾丸。脂质过氧化可能是DBP毒性作用的机制之一 ,SDH是DBP对睾丸毒性作用较为敏感的指标之一。     

硅胶管采样—高效液相色谱法同时测定空气中的邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二辛酯

本文用高效液相色谱法同时测定空气中的邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二辛酯。空气样品用硅胶管采集,经甲醇洗脱,C_(18)不锈钢柱分离,紫外检测器检测。本法测定条件下,这两种物质的最低检出浓度均为0.01mg/m~3。浓度范围为1.0～10.0μg/ml 标准曲线成线性关系。精密度:在不同浓度下变异系数分别为1.8～7.1%和4.4～7.2%,两者的采集效率均接近100%,解吸效率分别为96.0～98.7%和96.5～99.5%,两种物质在硅胶管中可稳定15d。一般共存的其他酯类对测定无干扰。     

气相色谱法测定车间空气中邻苯二甲酸二丁酯

本文研究了车间空气中邻苯二甲酸二丁酯(DBP)的气相色谱测定方法,在0.01～0.5mg/ml范围内,DBP含量与峰面积成正比,方法简便、快速,共存物不干扰,精密度高,能满足车间空气监测的要求。     

邻苯二甲酸二丁酯对大鼠睾丸毒性的研究 Ⅱ.作用机制

作者继DBP对睾丸生精细胞的损伤情况和时间效应关系的研究之后,进一步探讨了DBP对生精细胞毒性作用的机制。结果表明,DBP可损伤支持细胞多种细胞器,使SDH和ACP活性降低,LDH活性增高,但支持细胞紧密连接完整,间质细胞超微结构、睾酮的合成和分泌均无异常。因而认为,DBP对生精细胞的损伤主要是通过影响支持细胞的营养、调控功能而起作用的。     

环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二丁酯的生物降解特性

以邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)为唯一碳源驯化活性污泥 ,并在恒温摇床中用驯化污泥对DBP进行降解试验。以研究环境内分泌干扰物DBP的生物降解特性。结果表明 ,48h内DBP可降解 90 % ,其降解的最适条件是 :温度为 2 5～ 3 5℃ ,pH值为 6 0～ 8 0 ,停留时间 (HRT)为 12～ 2 4h ,浓度在 3 0 0mg L以下。DBP生物降解过程符合酶促一级反应动力学模型     

邻苯二甲酸二丁酯研究进展

作为塑料行业广泛使用的增塑剂 ,邻苯二甲酸二丁酯对环境和生物体的潜在危害已逐渐引起人们的重视。本文就邻苯二甲酸二丁酯的暴露、代谢、毒性作用、内分泌干扰作用等方面进行综述     

高效液相色谱法测定水中的邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二辛酯

邻苯二甲酸二丁酯 (ＤＢＰ)和邻苯二甲酸二辛酯 (ＤＯＰ)是环境激素类物质 ,对人类具有严重的潜在危害。也广泛应用于塑料、胶膜制造业[1] 。目前世界上使用的增塑剂多是邻苯二甲酸类化合物 ,该类化合物进入水中的主要途径是生产厂和使用该化合物的工厂的排水、排气 ,以及焚烧塑料垃圾、喷涂涂料、农用薄膜中增塑剂的挥发等 ,它们在空气中可吸附在颗粒物的表面 ,最后以干沉降和雨的方式降落到地面。用紫外分光光度法测定空气中的ＤＢＰ和ＤＯＰ ,由于两个化合物的吸收波长相同 ,不能分别测定两种化合物 ,只能测定两者的总量。国内外均有报道…     

人乳和牛乳中有机物种类及邻苯二甲酸二丁酯水平的比较

目的 比较人乳和牛乳中有机物种类及邻苯二甲酸二丁酯(DBP)的污染水平.方法 选取40名健康产妇,年龄(27.44±3.43)岁.分别采集每名产妇乳汁5 ml.采用简单随机抽样的方法选取市售常见4种不同品牌鲜牛奶和1种品牌的奶粉,每种品牌的牛奶制品分别抽取3个样品,共取样15份(其中鲜牛奶12份,奶粉3份).应用气相色谱-质谱(GC-MS)联用法分别对样品中有机物种类进行定性分析及DBP的定量测定.结果 在40份人乳中共检出有机物176种,平均(10.58±4.16)种;12份鲜牛奶中共检出有机物37种,平均为(8.67±1.61)种;3份奶粉中共检出有机物31种,平均(12.67±0.58)种.奶粉中的有机物检出种类数高于人乳和鲜牛奶(t值分别为2.09、4.00,P值均<0.05).在人乳与牛乳中检出率均较高的有机物主要是9-十八烯酸,人乳中检出率为45.00%(18/40),牛乳中检出率为53.33%(8/15).人乳中DBP的含量为(57.78±35.42)μg/L,鲜牛奶中DBP的含量为(20.76±6.60)μg/L,奶粉中DBP的含量为(0.45±0.05)mg/kg[相当于浓度值为(66.78±7.60)μg/L].鲜牛奶中DBP含量低于人乳和奶粉(t值分别为37.02、46.02,P值均<0.05).结论 人乳与牛乳中均含有多种环境有机污染物,部分污染物具有生殖和发育毒性.

Abstract：

Objective To explore types of organic components and pollution level of di-n-butyl phthalate (DBP) between human milk and cow milk products. Methods Forty healthy postpartum women with an average age of (27.44 ± 3.43) years old were selected, and a 5 ml sample of breast milk were collected. Four different brands of fresh cow milk and 1 brand of milk powder were randomly selected in the market. A total of 15 samples were collected with 3 from each brand,and the qualitative analysis of types of organic components and quantitative analysis of DBP were conducted by gas-chromatography and massspectrometry(GC/MS) method. Results A total of 176 different types of organic components were detected in 40 samples of human milk (averaged at (10. 58 ± 4. 16) types per sample); 37 different types were detected in 12 samples of fresh cow milk (averaged at (8.67 ± 1.61) types per sample); while 31 types of organic components were detected in 3 samples of milk powder (averaged at (12. 67 ± 0. 58) types per sample). It was obvious that the types of organic components in milk powder were significantly higher than the other two groups (t =2. 09,4. 00, P < 0. 05). The most frequent organic component in human milk and cow milk was 9-octadecenoic acid (45.00% (18/40) in human milk; 53. 33% (8/15) in cow milk). DBP concentrations were (57.78 ± 35.42) μg/L, (20. 76 ± 6. 60) μg/L and (0. 45 ± 0. 05) mg/kg (equal to (66.78 ± 7.60) μg/L) in human milk, fresh cow milk and milk powder, respectively. The DBP concentration in fresh cow milk was significantly lower than those in human milk and milk powder (t =37.02,46. 02,P <0. 05). Conclusion Both human milk and cow milk contain different types of organic pollutants, some of which have toxic effects on reproduction and human development.