霍乱弧菌新类型TCP氨基酸序列生物信息学分析

目的 研究4种新类型霍乱弧茼（VC）毒力协同调节菌毛（TCP）氨基酸序列进行生物信息学特征。方法基因序列及氨基酸序列利用DNAStar和BLAST进行分析。结果对4种新类型tcpA推测的氨基酸序列的俚螺旋、B折叠、疏水性、抗原表位等特征进行分析,并与国外发现的4种类型比较,N末端约100个氨基酸序列的抗原表位等特征高度一致,而C末端约60个氨基酸序列的抗原表位等特征差别较大。在对tcpA基因扩增及测序时,扩增片段包括tcpB基因5#端部分基因及其启动子区,序列分析表明,不同类型tcpB的启动子区差别较大,不同类型tcpB5#端部分基因存在多个位点突变,但均未导致氨基酸变异。结论4种新类型TCP和国外发现的4种类型的C末端抗原表位差别较大。保护性抗原表住主要啦于C末端,提示不同类型TCP抗原交叉保护性较弱。     

人脐血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

目的探索人脐静脉血内皮祖细胞的分离培养,为内皮祖细胞的临床应用提供实验方法。方法选择脐静脉血,应用密度梯度离心法,获取单个核细胞,接种于预先包埋了人纤维连接蛋白的培养板,用加入生长因子VEGF165和bFGF的内皮细胞专用培养基EGM-2MV培养细胞,3d后,洗掉非贴壁细胞,换培养液继续培养至7d,收集贴壁细胞进行细胞分析。激光共聚焦显微镜进行细胞功能学鉴定,流式细胞术测定祖细胞和内皮细胞系标志。MTT比色法检测细胞的生长状态。结果经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞能特异性吸附FITC标记的荆豆凝集素并内吞DiI-acLDL,祖细胞标志CD133及内皮细胞特异性抗原CD34、KDR检测,其阳性率分别为（27．05±2．94）％、（16．37±2．69）％和（56．67±7．29）％;体外培养的内皮祖细胞具有良好的细胞增殖活性。结论人脐静脉血中可以分离培养内皮祖细胞,为内皮祖细胞的进一步研究及临床应用奠定了基础。     

降钙素原对新生儿败血症早期诊断价值的系统评价

目的系统评价降钙素原（PCT）对新生儿败血症早期诊断价值。方法用计算机检索CNKI、VIP等数据库。按两个纳入标准分别纳入有关PCT诊断新生儿败血症的研究,采用QUADAS工具进行质量评价,利用Metadisel．4计算各个研究的合并DOR,进行异质性分析,并计算敏感度、特异度、阳性似然比和阴性似然比,进行合并受试者诊断特征曲线（SROC）分析,获得SROC曲线下面积（AUC）。用Review Manager5软件进行其它诊断试验评价指标的Meta分析。结果按照标准一,纳入8个研究;按照标准二,纳入7个研究。8个研究间不存在异质性（x^2=3．28,P=0．858,12=0．0％）。8个研究合并敏感度为0．914,合并特异度为0．935,AUC为0．9783;7项研究间不存在异质性（x^2=3．24,P=0．779,I^2=0．0％）,合并敏感度为0．876,合并特异度为0．943,AUC为O．9578。结论从目前的研究看,PCT对新生儿败血症早期诊断有很高的价值,是很好的辅助诊断指标。     

超敏C反应蛋白、脂蛋白（a）和TC/HDL-C联合检测诊断冠心病的价值

目的探讨超敏C反应蛋白（hs-CRP）、脂蛋白（a）[Lp（a）]和TC/HDL-C联合检测对冠状动脉硬化性心脏病（CHD）的诊断价值。方法对236例CHD患者和50例健康对照者进血清hs-CRP、Lp（a）、TC、HDL-C测定及分析。结果 CHD患者hs-CRP、Lp（a）和TC/HDL-C比值含量均显著高于对照组（P〈0.01）。联合应用hs-CRP、Lp（a）和TC/HDL-C比值的诊断敏感度（94.5%）高于分别应用hs-CRP（85.6%）、Lp（a）（82.3）和TC/HDL-C（76.2）的诊断敏感度（P〈0.05）。结论联合应用hs-CRP、Lp（a）和TC/HDL-C更有助于冠心病的早期诊断。     

临床微生物学检验教学改革探析

对临床微生物学检验理论课、实验课和实习进行系列教学改革：理论课教学改革,进行多媒体素材库建设,编写检验医学生物安全知识培训手册,每位教员首次讲授的理论课,均进行集体备课及试讲;实验课教学改革,设计3个基本技能培训专题、4个综合性设计性实验专题、4次见习课,依托检验医学系＂本科生临床检验诊断学创新基地＂开展课外科研活动;实习教学改革,编写实习生培训手册,对实习生考核方式进行改革,开展医院感染监测和循证检验医学研究方向,指导本科生完成毕业论文。     

原发性干燥综合征患者T细胞亚群及CD4~+CD25~+ T细胞检测的意义

目的探讨T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+T细胞在原发性干燥综合征(PSS)患者中的检测意义。方法用流式细胞仪检测18例PSS患者以及20例健康体检者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、NK细胞(CD3-/CD16+56+)、CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节T细胞水平。结果 PSS患者与正常对照组比较,CD3+CD4+细胞亚群的百分率明显升高(P<0.05);CD4+/CD8+与对照组比较有明显升高(P<0.05);CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分率明显降低(P<0.01),其它T细胞亚群无明显变化。结论 PSS患者T淋巴细胞亚群的水平是异常的。T细胞亚群的比例异常与疾病的病程和临床表现相关联。CD3+CD4-CD8-和CD4+CD25+调节性T细胞水平降低导致机体自身免疫反应抑制功能减弱,免疫耐受状态被打破,可能是引发PSS发生发展的重要因素。     

实验诊断学双语教学的实践与思考

为了适应现代医学教育的发展,提高医学生的综合素质,在实验诊断学教学的过程中,针对不同学制、不同专业的医学生应采用不同程度、不同比例的双语教学。本文就实验诊断学在实施双语教学中的几点策略并结合自己的实践进行了讨论。     

小鼠骨髓耐受性树突状细胞的体外培养与鉴定

目的建立一种简单经济的小鼠骨髓耐受性树突状细胞（DC）的培养方法，为进一步研究耐受性DC在自身免疫性疾病治疗中的运用打下基础。方法取小鼠的骨髓细胞作为DC的前体细胞，加入细胞因子rmGM—CSF和IL-4，分成磷酸酯多糖（LPS）-DC和单纯DC两组，前者在培养结束前18h加入LPS，后者不加；培养6d后收集疏松贴壁细胞进行形态、细胞表面标记以及免疫功能的鉴定。结果用此方法培养的细胞其表面CD11c的表达率超过76％，具有典型的DC形态。单纯组DC的细胞中度表达MHCⅡ类分子，低水平表达共刺激分子，刺激T细胞增殖的能力较弱；LPS—DC组细胞高水平表达MHCⅡ类分子和共刺激分子，能够诱导T细胞大量增殖。结论利用此法能在体外培养出大量的未成熟DC，具有耐受性．为其在治疗自身免疫性疾病的应用奠定了基础.     

利用小干扰RNA表达框鉴定小鼠骨髓树突状细胞有效沉默RelB基因的实验研究

目的 构建靶向小鼠RelB基因的小干扰RNA（siRNA）表达框，鉴定针对小鼠骨髓树突状细胞（DC）的RelB基因最有效的siRNA序列。方法 利用PCR方法构建3个不同位点的表达框，R1／siRNA、R2／siRNA和R3／siRNA分别位于1027、302和1121位点。利用阳离子脂质体AdvantGene转染小鼠骨髓DC，转染24h后，脂多糖（LPS）刺激DC，用RT-PCR和免疫荧光方法检测DCReIB基因表达的变化。结果 经LPS刺激后DC成熟，RelB基因表达显著高于未成熟DC；R1／siRNA和R3／siRNA转染DC后，LPS刺激仍然可以增强RelB基因表达，而R2／siRNA转染DC后，LPS刺激不能增加RelB基因表达。结论 R2／siRNA可有效抑制RelB基因表达，有望用于构建新的耐受性DC应用于临床免疫耐受的诱导。     

网织血小板与血常规中血小板相关参数之间的相关性

目的探讨静脉血中网织血小板百分比与血常规中血小板相关参数之间的相关性。方法对72例男性及75例女性静脉血样本同时检测其网织血小板百分比（RP％）与PLT、MPV、PDW、P-LCR，并对它们的检测结果进行相关分析，比较RP％与它们之间的相关性。并将MPV进行分组比较，比较两者的差异性。结果RP％与PLT之间均RP％与PLT之间无相关关系，相关系数分别为男性组r=-0．033（P〉0．05），女性组r=-0．092（P〉0．05），而RP％与MPV、PDW、P-LCR之间在男性组及女性组之间均有相关关系，P〈0．01。女性MPV≥11．0fl组RP％高于MPV〈11．0 fl组的RP％，二者具有显著性差异，P〈0．01。结论RP％与PLT之间无相关关系，而RP％与MPV、PDW、P-LCR之间均具有良好相关性。