Ki67在结节性筋膜炎的表达及意义

目的观察Ki67在结节性筋膜炎患者中的表达及其临床意义,并与纤维瘤病及纤维肉瘤进行比较。方法收集72例结节性筋膜炎、20例韧带样型纤维瘤病及20例纤维肉瘤患者的病理标本,利用免疫组织化学方法检测Ki67的表达,计算平均每张切片阳性细胞的百分比即为Ki67指数。分析Ki67指数与结节性筋膜炎各临床病理因素之间的关系。结果 72例结节性筋膜炎均可见不同程度的Ki67染色,平均Ki67指数为(24.1±14.9)%,70.8%的结节性筋膜炎患者Ki67指数为10%~50%。韧带样型纤维瘤病平均Ki67指数为(3.2±1.3)%,明显低于结节性筋膜炎的平均指数(P<0.01);纤维肉瘤平均Ki67指数为(26.2±3.3)%,与结节性筋膜炎比较差异无统计学意义(P>0.05)。Ki67指数与病史长短有关(P<0.05),病史≤2个月者Ki67指数明显大于病史>2个月者,而与患者年龄、性别、病变大小、病变部位等均无关(P均>0.05)。45例结节性筋膜炎患者获得随访,随访时间为12~66个月,平均31个月;截止随访结束,有2例(4.4%)局部复发。结论结节性筋膜炎患者有较高Ki67指数及较大的变化范围,不能因为Ki67指数高而将结节性筋膜炎误诊为肉瘤。     

所谓肺硬化性血管瘤组织中Cox-2、bcl-2蛋白表达及意义

目的：探讨Cox-2、bcl-2在所谓肺硬化性血管瘤（So—called pulmonary sclerosing hemangioma，PSH）组织中的表达及其相互关系。方法：应用免疫组化S—P法，检测35例所谓肺硬化性血管瘤、8例肺炎性假瘤（pulmonary pseudotumor，PP）、8例正常肺组织（normal lung tissue，NL）中Cox-2的bcl-2的蛋白表达。结果：Cox-2和bcl-2蛋白在35例PSH组织中的阳性表达率分别为14．29％（5／35）和31．43％（11／35），在8例PP组织中的阳性表达率分别为0％（0／8）和12．5％（1／8），而8例NL组织中均呈阴性表达。Cox-2、bcl-2蛋白在PSH、PP、NL三种组织中的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。在PSH中，Cox-2与bcl-2蛋白表达之间存在相关关系。结论：bcl-2与Cox-2蛋白表达并不直接参与PSH的发生发展；PSH中bcl-2与Cox-2之间存在着相关性表达，即bcl-2与Cox-2蛋白在PSH发生、发展中可能存在一定的协同调控作用关系。     

非小细胞肺癌中Chibby的表达及与β-catenin表达的关系

目的探讨Chibby在非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)的表达及与临床病理因素,β-catenin表达之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测100例NSCLC及相应癌旁正常肺组织中Chibby和β-catenin的表达,采用Western Blot方法检测35例新鲜肺癌组织及其癌旁正常肺组织中Chibby的表达情况。结果 Western Blot结果显示NSCLC中Chibby蛋白表达水平与癌旁正常肺组织相比无显著差异(>0.05)。免疫组化结果显示Chibby在NSCLC组织中的细胞核阳性率为43.0%(43/100),其在正常肺组织中的细胞核阳性率为82.0%(82/100),差异显著(<0.05);肺腺癌中Chibby细胞核阳性率57.9%(33/57)显著高于其在肺鳞癌中的阳性率23.3%(10/43,<0.05);无淋巴结转移组中Chibby的细胞膜阳性率38.9%(21/54)显著高于淋巴结转移组19.6%(9/46,<0.05)。β-catenin在细胞浆中的异常表达与NSCLC的分化程度呈负相关(<0.05)。Spearman相关性分析发现,NSCLC中Chibby在细胞膜/浆中的定位分别与β-catenin在细胞膜/浆的定位具有相关性(<0.05)。结论 Chibby在NSCLC组织中的细胞核表达显著低于正常肺组织,Chibby可能作为β-catenin的分子伴侣并调控β-catenin在细胞内的定位。     

乳腺癌中TSG101与MAPK／ERK信号通路的关系

目的 研究乳腺癌中TSG101与MAPK／ERK信号通路的关系。方法应用脂质体法将靶向TSG101的siRNA转染入乳腺癌细胞株MCF-7中。分别使用免疫荧光和Westernblot方法检测siRNA干扰后MCF-7中p-ERK蛋白表达的改变。使用免疫组织化学方法检测TSG101、p-ERK蛋白在54例人乳腺癌组织中的表达。结果TSG101siRNA转染后的MCF-7中p-ERK蛋白表达明显减少。TSG101和p-ERK蛋白在乳腺癌组织中的阳性率分别为74．07％、81．48％。TSG101和p-ERK在乳腺癌组织中的蛋白表达存在正相关（r=0．371,P〈0．05）。结论TSG101在乳腺癌中可能通过MAPK／ERK信号通路发挥生物学作用。     

TSG101的下调对乳腺癌细胞的作用

目的:研究肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSGl01)的下调对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞的作用及TSG101在乳腺癌组织中的表达.方法:应用脂质体法将靶向TSG101的小干扰RNA(smallinterfering RNA,siRNA)转染入乳腺癌细胞系MCF-7细胞中.分别使用MTT法、流式细胞仪、transwell小室法检测siRNA干扰后MCF-7细胞增殖能力、细胞周期、细胞凋亡率和细胞迁移能力的变化.使用免疫组织化学方法检测TSG101在54例乳腺浸润性导管癌及癌旁正常乳腺组织中的表达.结果:MTT结果显示,TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞与对照组相比,增殖能力减弱.细胞周期结果显示.TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞周期G0/G1期及S期比例(70.51±0.23;23.65±0.78)与对照组(59.15±0.77,34.96±0.45)、(59.21±0.68.34.89±0.30)相比,G0/G1期比例增多,S期比例减少.细胞凋亡结果显示,TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞(13.71±1.31)与对照组(4.37±0.87)、(6.00±0.08)相比,细胞凋亡率增加.细胞迁移结果显示,TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞(4.60±0.80)与对照组(24.47±1.90)、(23.80±2.20)相比,细胞迁移能力减弱.免疫组化实验结果显示,TSG101蛋白主要定位于乳腺癌细胞质和(或)细胞核内,呈棕黄色颖粒.54例乳腺癌组织中TSG101阳性表达40例(74.07%),TSG101在癌旁正常乳腺组织中不表达或呈微弱的胞质表达,TSG101在乳腺癌组织中的表达高于癌旁正常乳腺组织.结论:TSG101的下调能够抑制乳腺癌细胞系MCF-7细胞的增殖,诱导凋亡,阻滞细胞周期于G1/S期,并且降低其迁移能力.TSG101可能参与乳腺癌的发生、发展过程.     

非小细胞肺癌中过表达 RNF146 对 Axin 和 β - catenin 表达和定位的影响

目的：观察E3泛素连接酶RNFl46表达对Axin和B—catenin蛋A表达的影响,探讨RNFl46与Wnt／B-atenin信号通路在非小细胞肺癌（NSCLC）发生发展中的作用。方法：应用免疫组织化学EnVision法检测133例NSCLC患者肺癌中RNFl46、Axin和B-catenin的表达。构建RNFl46过表达质粒,应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、Westernblot和细胞免疫荧光方法研究RNFl46在肺癌细胞株A549和LTE中过表达对Axin和B—catenin表达及定位的影响。结果：NSCLC患者肺癌组织中RNFl46高表达72例（54．1％）中49例（68．1％）显示Axin表达减弱或缺失,19例（26．4％）出现B-catenin细胞核阳性表达;RNF146低表达61例（45．9％）中只有26例（42．6％）显示Axin表达减弱或缺失,7（11．5％）例出现B—eatenin细胞核阳性。RNFl46与Axin的表达呈明显的负相关（P=0．003）,与B—catenin的细胞核表达呈正相关（P=0．047）。肺癌细胞系中过表达RNFl46能够下调Axin蛋白的表达,诱导B—catenin蛋白表达和核内分布,但对Axin和B—cateninmRNA水平没有影响。结论：RNFl46可能通过Wnt／B-catenin通路参与肺癌的发生发展。     

β-catenin、Axin及C-myc在肺硬化性血管瘤两种细胞中表达的差异

目的:检测肺硬化性血管瘤(pulmonary sclerosing hemangioma,PSH)中β-catenin、Axin及C-myc的表达情况,探讨PSH的肿瘤性质及肿瘤中立方细胞和多角形细胞的分化水平。方法:采用SP免疫组织化学方法检测β-catenin、Axin及C-myc在52例PSH两种细胞中的表达情况。结果:52例PSH中,立方细胞均显示β-catenin连续的细胞膜强阳性表达,而多角形细胞显示β-catenin细胞膜表达减弱或缺失并伴有不同程度细胞浆表达;Axin在立方细胞中表达阳性率92.3%(48/52)显著高于其在多角形细胞中表达阳性率25.0%(13/52,P<0.05);C-myc在立方细胞表达阳性率23.1%(12/52)显著低于其在多角形细胞中表达阳性率82.7%(43/52,P<0.05)。结论:β-catenin、Axin及C-myc在PSH两种细胞中的表达具有显著性差异,两种细胞可能处于不同的分化阶段;C-myc在多角形细胞中高水平表达提示其可能具有较高的增殖活性。     

黏附调节因子p120ctn3A细胞核靶向表达质粒的构建及鉴定

目的 既往少数研究表明p120ctn存在核浆穿梭现象,为研究细胞核内p120ctn的功能,我们试图构建p120ctn 3A细胞核定向表达载体pCMV/p120ctn 3A.方法 采用PCR方法扩增人p120ctn 3A活性片段,将其插入细胞核定向表达载体pCMV/myc/nuc,构建重组体pCMV/p120ctn 3A,经脂质体介导转染肺癌细胞A549,用荧光显微镜观察绿色荧光信号,免疫细胞化学及Western blot鉴定其在肺癌细胞A549中的表达与定位.结果 限制性双酶切及DNA测序分析结果显示插入pCMV/p120ctn 3A的片段为2496bp左右,与预期p120ctn 3A基因片段大小相同.荧光显微镜观察到绿色荧光信号定位于细胞核内,免疫细胞化学结果显示表达的p120ctn 3A定位于A549细胞核.Western blot结果显示转染pCMV/p120ctn 3A的A549细胞p120ctn 3A蛋白表达量显著上调.结论 成功构建了p120ctn 3A 细胞核定向表达载体pCMV/p120ctn 3A.     

Frat1与TCF4在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的相关性及意义

目的:研究Frat1与TCF4在NSCLC中的表达及其意义。方法:用免疫组化SP法对95例原发性NSCLC患者手术标本中Frat1和TCF4的表达进行检测。结果:在NSCLC中Frat1表达与肺癌组织的低分化、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);TCF4的表达与淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);Frat1的表达与TCF4的表达有相关性(P<0.05)。结论:Frat1和TCF4在NSCLC中与肺癌的侵袭和转移等恶性表型有关,Frat1和TCF4在癌组织中的表达有相关性。